张永臣
- 作品数：10 被引量：47H指数：5
- 供职机构：东南大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：南京市医学科技发展项目江苏省自然科学基金南京市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲型H1N1流感患者治疗前后外周血淋巴细胞与T细胞亚群的变化被引量：5
- 2010年
- 目的研究甲型H1N1流感患者经治疗后淋巴细胞亚群数量与比例的变化,探讨病毒对机体免疫系统的影响。方法 LH750血液分析仪及FACScalibur流式细胞仪测定患者治疗前后外周血淋巴细胞和CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞绝对数与比例(%)。结果 H1N1病毒感染后血液中淋巴细胞,CD3+、CD4+、CD8+T细胞数量下降,治愈后恢复正常(P<0.01)。结论 H1N1病毒感染后淋巴细胞减少可能与甲型H1N1流感发病机制有关。
- 张永臣赵伟王念跃
- 关键词：甲型H1N1病毒T细胞细胞免疫
- 慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞计数变化及其临床意义被引量：8
- 2010年
- 目的观察慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞数量的变化。方法在56例乙型肝炎肝衰竭、49例HBeAg阳性慢性乙型肝炎和41例乙型肝炎病毒携带者使用流式细胞仪检测外周血CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞和NK(CD3-CD16+CD56+)细胞占淋巴细胞的比率(%)。结果肝衰竭患者CD3+T细胞和CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒携带者显著性降低(P<0.05);慢性乙型肝炎患者CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比乙型肝炎病毒携带者显著性升高(P<0.05)。结论乙型肝炎肝衰竭患者外周血T细胞和NK细胞数量减少,而HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T细胞数量增多。
- 邱洁龙启强冯艳红张永臣张绍峰
- 关键词：慢性乙型肝炎外周血NK细胞T淋巴细胞
- GM-CSF分泌型肝癌疫苗对荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群的影响
- 2010年
- 目的研究粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)分泌型肝癌疫苗对小鼠移植性肝癌H22的免疫调节效应。方法将构建完成的GM-CSF分泌型H22肝癌瘤苗免疫ICR小鼠(肝癌组),同时设立无GM-CSF基因修饰H22肝癌瘤苗组及PBs对照组;应用流式细胞术检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群,CCK-8法检测脾细胞细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。结果肝癌组免疫小鼠外周血中CD8+T的含量高于瘤苗组及对照组(P<0.01);肝癌组CTL杀伤活性亦远高于其他两组(P<0.01)。结论 GM-CSF分泌型肝癌细胞疫苗可抑制肿瘤细胞生长,并且诱导自体T细胞向CTL方向增殖分化;CTL的增殖是该瘤苗引起特异性抗瘤免疫的基础,而GM-CSF的分泌则极大的增强了该瘤苗的免疫效果,此免疫效果主要通过直接活化CD8+CTL细胞产生。
- 郭银燕赵伟文剑张永臣
- 关键词：肝癌粒细胞巨噬细胞集落刺激因子肿瘤疫苗
- 手工洗板和机洗板对ELISA法检测HIV抗体结果的比较被引量：6
- 2014年
- 目的:探讨手工洗板和洗板机洗板对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HIV抗体结果的影响。方法:通过用手工洗板和洗板机洗板方法对3000份艾滋病高危人群人员的血清样品进行HIV抗体初筛检测,对两种洗板方法的检测结果进行比较;将1 NCU/mL质控物分别经手工洗板和洗板机洗板检测10次所得结果进行比较。结果:手工洗板检测结果为阳性数47例,阴性数2953例,阳性率为1.57%;洗板机洗板检测结果为阳性50例,阴性2950例,阳性率为1.67%;洗板机洗板检测结果阳性而手工洗板检测结果阴性8例;洗板机洗板检测结果阴性而手工洗板检测结果阳性5例,经配对X2检验,洗板机洗板检测和手工洗板初筛检测HIV抗体的阳性率无统计学差异(P>0.05)。洗板机洗板和手工洗板两种检测方法初筛检测结果共同阳性42例,共同阴性2945例,总符合率为98.57%。1NCU/mL质控物分别经手工洗板后OD=0.681±0.02,经洗板机洗板后OD=0.675±0.01,经配对t检验,P>0.05,两者差异无统计学意义。结论:在ELISA方法检验当中,手工洗板和洗板机洗板没有本质上的差别,只要严格按照说明书进行规范操作,均能得到正确的结果。
- 李金龙谈国蕾王念跃赵伟张永臣
- 关键词：ELISAHIV抗体
- 肝样细胞的诱导分化及处理胆红素的能力
- 2009年
- 目的：利用肝细胞生长因子（HGF）、表皮生长因子（EGF）和成纤维细胞生长因子-4（FGF-4）诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）向肝细胞分化,为肝组织工程提供新的细胞来源。方法：取志愿者骨髓,使用密度梯度离心法联合贴壁筛选法获取MSCs,用含有HGF、EGF、FGF的培养基进行培养。用流式细胞仪、免疫细胞化学法鉴定细胞表型,检测诱导后细胞胆红素处理能力。结果：骨髓MSCs生长良好,表型为CD29阳性,CD34阴性。诱导后细胞可在21～28 d时形成肝样细胞。诱导7 d后细胞检测到AFP的表达,第14天时CK18呈阳性表达,随着诱导时间的延长,阳性率增加,并能显著降低胆红素浓度。结论：HGF、EGF、FGF联合能诱导骨髓MSCs分化为具有处理胆红素能力的肝样细胞。
- 张永臣许晓珣赵伟张亮赵磊文剑
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞生长因子表皮生长因子胆红素
- 抗HIV-1 gp120单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的制备抗HIV-1 gp120单克隆抗体,鉴定其特性,为进一步研制HIV治疗性抗体提供贮备。方法将HIV-1 gp120基因片段连接到经酶切的原核表达载体PEGX-4T-2中,利用大肠杆菌XL1-blue表达GST-HIV蛋白。表达的蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆。重组免疫印迹分析(RIBA)和Western blot检测抗体特异性。结果构建的重组质粒的外源基因片段经测序与预期HIV-1 gp120抗原基因片段大小一致。纯化蛋白SDS-PAGE可见1条相对分子质量(Mr)32 000的表达蛋白条带。获得6株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其细胞培养上清效价为10-3,小鼠腹水效价为10-5,抗体亚型均为IgG1。RIBA结果显示6株单抗皆只与HIV-1 gp120抗原反应。Western blot结果显示在Mr32 000处可见1条单一目的条带。结论获得6株稳定分泌抗HIV-1 gp120单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为进一步研制抗HIV治疗性抗体奠定了基础。
- 张永臣文剑张亮赵磊
- 关键词：HIV-1原核表达单克隆抗体杂交瘤细胞
- 甲型H1N1流感患者实验室指标变化与临床的关系被引量：10
- 2011年
- 目的分析208例甲型H1N1流感患者实验室检测指标,探讨其变化特点对甲型H1N1流感诊断及评估病情发展变化的价值。方法在病程中进行血常规、肝、肾功能指标、T淋巴细胞亚群以及其他感染性实验室指标的检测。对检验结果进行回顾性总结和统计学分析。结果入院初期绝大多数患者红细胞、血小板计数在正常范围内;43.3%患者白细胞总数下降,有36.1%患者中性粒细胞和16.8%患者淋巴细胞数降低;入院初期绝大多数患者肝、肾功能生化指标正常,部分患者存在电解质紊乱;CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数下降比较显著,特别是重症患者,并在入院数天后降至极低值,又随病情好转而回升正常。结论 CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞及血常规检查的淋巴细胞计数,是甲型H1N1流感患者早期鉴别诊断以及病情严重程度的重要指标,动态观察其变化对患者的病情发展、疗效观察及预后判断等方面有重要的指导价值。
- 王念跃张永臣郑以山谢垚
- 关键词：甲型H1N1流感
- HIV感染者和AIDS患者及正常人CD_4与CD_8细胞计数对照研究被引量：13
- 2011年
- 目的研究正常人与艾滋病(AIDS)患者、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者之间免疫指标CD4细胞计数、CD8细胞计数及CD4/CD8比值的差异。方法使用BD公司CD4T细胞检测试剂对我院体检的43份正常人全血样本(正常组),与随访检查的199例HIV感染者(感染组)及49例AIDS患者(患者组)的全血样本进行检测。结果正常组与患者组及感染组CD4细胞计数、CD8细胞计数、CD4/CD8比值之间差异有统计学意义(P<0.05),患者组、感染组CD4细胞计数、CD4/CD8比值显著低于正常组(P<0.05),CD8细胞计数显著高于正常组(P<0.05);患者组与感染组CD4细胞计数、CD4/CD8比值、CD8细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HIV感染者、AIDS患者的CD4细胞计数、CD4/CD8细胞计数降低,而CD8细胞计数升高。
- 赵磊李金龙林湘云张永臣王念跃
- 关键词：CD4淋巴细胞计数CD4/CD8比值艾滋病感染者
- HBsAg和HBeAg阳性孕妇新生儿血清HBeAg与调节性T细胞的关系被引量：3
- 2010年
- 目的研究HBsAg和HBeAg阳性孕妇经母婴联合免疫阻断后婴儿HBV标志物（HBVM）与调节性T细胞（Treg）的关系,探索Treg在HBV的母婴间传播中的作用。方法选择2008年2-8月在本院分娩的48例HBsAg和HBeAg双阳性孕妇的新生儿,分娩后抽取新生儿股静脉血用流式细胞仪检测Treg,化学发光法定量检测HBVM水平。1月龄时复查HBVM。比较HBeAg阴性和阳性两组婴儿Treg水平。结果HBeAg阳性组新生儿CD4＋CD25＋T细胞明显高于HBeAg阴性组,两组间差异有统计学意义,P〈0.01。结论1月龄新生儿HBeAg持续阳性可能是因为CD4＋CD25＋T细胞的比例较高所致。
- 张永臣王念跃王佳张亮文剑
- 关键词：HBEAG调节性T细胞流式细胞术
- 联合检测血清IL-23、甲胎蛋白、同工铁蛋白对原发性肝癌的诊断价值被引量：1
- 2011年
- 目的探讨联合检测血清白细胞介素-23、甲胎蛋白、同工铁蛋白对原发性肝癌的诊断价值。方法采用ELISA和电化学发光免疫法检测60例健康人、39例肝硬化患者和59例原发性肝癌患者血清白细胞介素-23和甲胎蛋白含量，采用散射比浊法检测同工铁蛋白含量。结果原发性肝癌患者血清中白细胞介素-23、甲胎蛋白、同工铁蛋白阳性率分别为72.88％，76.27％和71.18％，显著高于对照组和肝硬化组（P〈0．01）。结论与甲胎蛋白同时检测血清白细胞介素-23和同工铁蛋白，对原发性肝癌的早期诊断具有重要价值。
- 黄菁张永臣虞玲
- 关键词：原发性肝癌白细胞介素-23甲胎蛋白同工铁蛋白
