张亮
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：东南大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝样细胞的诱导分化及处理胆红素的能力
- 2009年
- 目的：利用肝细胞生长因子（HGF）、表皮生长因子（EGF）和成纤维细胞生长因子-4（FGF-4）诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）向肝细胞分化,为肝组织工程提供新的细胞来源。方法：取志愿者骨髓,使用密度梯度离心法联合贴壁筛选法获取MSCs,用含有HGF、EGF、FGF的培养基进行培养。用流式细胞仪、免疫细胞化学法鉴定细胞表型,检测诱导后细胞胆红素处理能力。结果：骨髓MSCs生长良好,表型为CD29阳性,CD34阴性。诱导后细胞可在21～28 d时形成肝样细胞。诱导7 d后细胞检测到AFP的表达,第14天时CK18呈阳性表达,随着诱导时间的延长,阳性率增加,并能显著降低胆红素浓度。结论：HGF、EGF、FGF联合能诱导骨髓MSCs分化为具有处理胆红素能力的肝样细胞。
- 张永臣许晓珣赵伟张亮赵磊文剑
- 关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞生长因子表皮生长因子胆红素
- 抗HIV-1 gp120单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的制备抗HIV-1 gp120单克隆抗体,鉴定其特性,为进一步研制HIV治疗性抗体提供贮备。方法将HIV-1 gp120基因片段连接到经酶切的原核表达载体PEGX-4T-2中,利用大肠杆菌XL1-blue表达GST-HIV蛋白。表达的蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆。重组免疫印迹分析(RIBA)和Western blot检测抗体特异性。结果构建的重组质粒的外源基因片段经测序与预期HIV-1 gp120抗原基因片段大小一致。纯化蛋白SDS-PAGE可见1条相对分子质量(Mr)32 000的表达蛋白条带。获得6株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其细胞培养上清效价为10-3,小鼠腹水效价为10-5,抗体亚型均为IgG1。RIBA结果显示6株单抗皆只与HIV-1 gp120抗原反应。Western blot结果显示在Mr32 000处可见1条单一目的条带。结论获得6株稳定分泌抗HIV-1 gp120单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为进一步研制抗HIV治疗性抗体奠定了基础。
- 张永臣文剑张亮赵磊
- 关键词：HIV-1原核表达单克隆抗体杂交瘤细胞
- HBsAg和HBeAg阳性孕妇新生儿血清HBeAg与调节性T细胞的关系被引量：3
- 2010年
- 目的研究HBsAg和HBeAg阳性孕妇经母婴联合免疫阻断后婴儿HBV标志物（HBVM）与调节性T细胞（Treg）的关系,探索Treg在HBV的母婴间传播中的作用。方法选择2008年2-8月在本院分娩的48例HBsAg和HBeAg双阳性孕妇的新生儿,分娩后抽取新生儿股静脉血用流式细胞仪检测Treg,化学发光法定量检测HBVM水平。1月龄时复查HBVM。比较HBeAg阴性和阳性两组婴儿Treg水平。结果HBeAg阳性组新生儿CD4＋CD25＋T细胞明显高于HBeAg阴性组,两组间差异有统计学意义,P〈0.01。结论1月龄新生儿HBeAg持续阳性可能是因为CD4＋CD25＋T细胞的比例较高所致。
- 张永臣王念跃王佳张亮文剑
- 关键词：HBEAG调节性T细胞流式细胞术
