周玲
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：吴阶平医学基金国家自然科学基金吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- H2-calponin在食管鳞癌中的表达及意义被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨H2-钙调理蛋白(H2-calponin)在食管鳞癌中的表达及意义。方法:免疫组化技术检测30例食管鳞癌患者癌组织及癌旁组织芯片中H2-calponin的表达水平;体外培养人食管鳞癌ECA109、TE-1细胞株和正常食管上皮Het-1a细胞;荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞株中H2-calponin的表达;将食管鳞癌TE-1细胞分为空白对照组(常规培养)、阴性对照组(转染空载体siRNA)和H2-calponin siRNA组(转染H2-calponin siRNA),采用蛋白质印迹法测定细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、内皮生长因子-A(VEGF-A)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)蛋白的表达;ELISA法测定各组细胞培养上清液中MMP-2,MMP-9和VEGF-C含量;荧光定量PCR检测NF-κB通路抑制剂PDTC处理前(0 h)及处理后0.5,1,2,4,8,12 h H2-calponin mRNA的表达;蛋白质印迹技术检测H2-calponin及NF-κB通路蛋白的表达。结果:免疫芯片结果显示,食管鳞癌组织中H2-calponin表达量低于癌旁组织,H2-calponin阳性表达率与食管鳞癌患者性别、年龄、肿瘤部位及病理分级之间无明显相关性(P均>0.05);荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中H2-calponin表达明显低于正常食管细胞(P<0.01);下调H2-calponin表达后,PCNA、E-钙黏蛋白和VEGF-A表达无明显变化,而波形蛋白、MMP-2、MMP-9和VEGF-C表达明显增加;ELISA结果显示,MMP-2、MMP-9和VEGF-C分泌量明显增加(P<0.05);PDTC处理后可显著增加IκBα的蛋白表达进而恢复并上调H2-calponin的表达(P<0.01)。结论:NF-κB通路通过抑制H2-calponin表达保证波形蛋白,MMP-2,MMP-9,VEGF-C持续表达,促进食管鳞癌细胞侵袭、转移发生。
- 周玲凌锐周月鹏毛朝明陈德玉
- 关键词：NF-KB食管鳞癌
- Wnt1诱导分泌蛋白-1通过NF-κB通路促进食管鳞癌细胞的增殖和侵袭转移被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨Wnt1诱导分泌蛋白-1(Wnt1 induced secreted protein-1,WISP-1)在食管鳞癌细胞侵袭转移的作用机制。方法:体外培养人食管鳞癌细胞株Eca109、TE-8和正常食管上皮细胞Het-1a,荧光定量PCR和蛋白质印迹检测WISP-1表达。将食管鳞癌细胞株Eca109和TE-8分为空白对照组、阴性对照组和WISP-1 siRNA组,利用CCK8法检测各组细胞增殖改变;流式细胞术分析不同处理组细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力变化;蛋白质印迹法检测细胞中VEGF-A,VEGF-C,MMP2,MMP9以及NF-κB通路相关蛋白的表达量;酶联免疫吸附法测定培养上清液中VEGF-C和MMP9分泌量。结果:荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中WISP-1表达量高于正常食管上皮细胞(P<0.01);CCK8和流式细胞术结果显示,下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株增殖明显抑制(P<0.05),凋亡率无明显影响;蛋白质印迹结果显示,下调WISP-1对VEGF-A和MMP2表达无明显影响,而VEGF-C和MMP9表达明显得到抑制;酶联免疫吸附结果显示,VEGF-C和MMP9分泌量随WISP-1下调也出现明显下降(P<0.05);下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株侵袭能力明显降低(P<0.01);下调WISP-1表达显著抑制NF-κB磷酸化并促进IκBα的磷酸化,抑制NF-κB信号活化水平。结论:WISP-1可通过NF-κB通路,增加MMP9,VEGF-C的表达和分泌,促进食管鳞癌细胞增殖及侵袭转移的能力。
- 凌锐周玲周月鹏毛朝明陈德玉
- 关键词：食管鳞状细胞癌VEGF-CMMP9NF-KB信号通路
- ACSS2上调参与食管鳞癌细胞缺氧诱导的放疗抵抗被引量：3
- 2017年
- 目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)上调对食管鳞癌细胞缺氧诱导的放疗抵抗效应形成的影响及潜在的分子作用机制。方法:免疫组化及免疫荧光技术细胞共定位检测65例食管鳞癌患者组织切片中ACSS2和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达和活化水平;将食管鳞癌ECA-109细胞分为对照组、ACSS2 siRNA组、缺氧组和缺氧+ACSS2 siRNA组,利用克隆形成实验检测不同处理组细胞对不同照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)的放射敏感性;选择8 Gy照射处理后,采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡,蛋白质印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白cleaved-caspase 3/caspase 3、Bcl-2的表达及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、核糖体蛋白S6激酶(p70S6)等信号通路蛋白的表达。结果:食管鳞癌病理切片中ACSS2高表达,细胞密集区域尤为明显,与p-mTOR呈显著正相关(r=0.707,P<0.01);细胞克隆实验表明缺氧组细胞的存活分数比对照组明显下降(P<0.01),放疗敏感性降低,下调ACSS2可以逆转这一趋势;缺氧环境诱导的ACSS2升高促进了ECA-109细胞Bcl-2表达上调、抑制了cleaved-caspase 3的表达,同时细胞凋亡率下降(P<0.01);在缺氧条件下,下调ACSS2可以抑制mTOR信号通路相关蛋白mTOR、p-mTOR、p70S6的活化。结论:缺氧条件下的ACSS2累积通过活化mTOR通路促进放疗抵抗效应。
- 朱宇胡格凌锐周玲周月鹏陈德玉
- 关键词：电离辐射食管鳞状细胞癌MTOR信号通路
