冯毅
- 作品数：56 被引量：120H指数：6
- 供职机构：山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金国家自然科学基金山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术经济管理更多>>
- shRNA沉默骨膜蛋白基因抑制人骨肉瘤的血管生成被引量：1
- 2019年
- 背景:骨膜蛋白(periostin,POSTN)是一种细胞外基质蛋白,在多种肿瘤组织中表达上调,与肿瘤的迁移、增殖和血管生成能力有关。血管内皮生长因子受体2(vascularendothelialgrowthfactor2,VEGFR2/KDR)与其配体血管内皮生长因子结合后主要调控血管的发生和构建,但KDR与POSTN在骨肉瘤中的相互作用尚不清楚。目的:探讨POSTN在体内、外水平对人骨肉瘤增殖和体内血管生成能力影响及其作用机制。方法:①体外实验:qRT-PCR和Westernblot检测人骨肉瘤临床标本组织中POSTN和KDR的mRNA及蛋白表达水平;qRT-PCR检测3株不同人骨肉瘤细胞系内POSTN表达,筛选基因表达最高的细胞系进行转染实验;转染慢病毒包装pPLK-POSTN-shRNA进入Saos-2细胞,选出3个作用靶点中抑制率最高的序列进行后续实验;②体内实验:取裸鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)12只,实验组(n=6)将慢病毒包装pPLK-POSTN-shRNA转染的Saos-2细胞注射至胫骨髓腔中,对照组(n=6)将慢病毒包装pPLK-Scramble-shRNA转染的Saos-2细胞注射至胫骨髓腔中,接种5周后,测量瘤体体积与质量;接种3周后,应用小动物活体成像检测血管生成情况;接种5周后取瘤体组织,Westernblot检测POSTN、增殖细胞核抗原、KDR和p-AKT蛋白表达,病理切片免疫组织化学染色内皮细胞黏附分子蛋白表达。实验方案经山西医科大学第二医院伦理委员会批准(编号:2018002)。结果与结论:①体外实验:骨肉瘤组织中POSTN和KDR的mRNA及蛋白水平表达均高于正常骨组织(P<0.01);Saos-2细胞中的POSTN基因表达量较MG-63和U2-OS细胞高;②体内实验:实验组瘤体体积和质量均小于对照组(P<0.05);实验组瘤体内血管生成量少于对照组(P<0.05);实验组POSTN、增殖细胞核抗原、KDR和p-AKT及内皮细胞黏附分子蛋白表达均低于对照组(P<0.05);③结果表明:沉默POSTN基因可抑制骨肉瘤血管生成,其机制可能与KDR/PI3K/AKT通路活化有关�
- 徐朝健张龙程才统冯毅吕嘉孙晓娟吕智
- 关键词：骨肉瘤血管生成KDRSAOS-2细胞
- 膝关节骨巨细胞瘤的治疗
- ＜正＞目的:骨巨细胞瘤是常见的潜在恶性的良性肿瘤,好发于膝关节周围,采取不同的治疗方式其复发率不同,病灶刮除植骨术由于其较高复发率临床上应用较少,常见的治疗方法是病灶扩大刮除灭活植骨和骨水泥填充,其保留了关节软骨下骨,膝...
- 李立志吕智冯毅卫小春
- Shh、Smo、Ptch和Gli-1在骨肉瘤细胞中的表达与临床价值的研究
- 2014年
- 目的研究Sonic hedgehog信号通路中Shh、Smo、Ptch、Gli-1在骨肉瘤中的表达并分析其与临床特征、预后的相关性。方法收集27例骨肉瘤患者的临床资料和石蜡标本及8例正常骨组织石蜡标本。采用免疫组化S-P法对石蜡标本中Shh、Smo、Ptch和Gli-1蛋白进行检测。结果免疫组化显示骨肉瘤患者中Shh、Smo、Ptch、Gli-1蛋白比正常骨组织中明显高表达;Smo的表达程度与患者的Enneking分期相关,余指标与临床特征无关;9例肺转移的骨肉瘤患者中Gli-1阳性表达的程度与未转移者有明显差异。结论 Shh、Smo、Ptch、Gli-1在骨肉瘤患者中有不同程度的高表达,有助于对骨肉瘤患者的早期诊断;骨肉瘤中Smo的表达程度与Enneking分期有相关性;Gli-1可作为判断骨肉瘤恶性程度及预后的重要指标。
- 武壮壮吕智刘小丽冯毅李立志陈军白军军张维松
- 关键词：骨肉瘤
- 肿瘤假体置换术与瘤段灭活再植术治疗四肢骨肉瘤效果观察被引量：6
- 2019年
- 目的评价保肢手术肿瘤假体置换术与瘤段灭活再植术治疗四肢骨肉瘤患者的效果。方法以2010年12月至2017年6月于山西医科大学第二医院行保肢手术治疗的54例EnnekingⅡ期四肢骨肉瘤患者为研究对象。采用Kaplan-Meier法对肿瘤假体置换术组与瘤段灭活再植术组患者进行生存分析,比较两组患者的5年生存率及远处转移率。采用χ^2检验和t检验对两组患者局部复发率以及局部感染发生率、术后功能恢复情况进行比较。结果46例骨肉瘤患者获得随访,随访时间3~84个月。肿瘤假体置换术组35例,瘤段灭活再植术组11例。Kaplan-Meier生存分析显示,肿瘤假体置换术组与瘤段灭活再植术组患者5年生存率及远处转移率比较(52.5%比59.4%,38.5%比35.7%),差异均无统计学意义(χ^2值分别为0.084、0.013,均P>0.05)。瘤段灭活再植术组局部复发率、患肢局部感染率均高于肿瘤假体置换术组[36.4%(4/11)比8.6%(3/35),36.4%(4/11)比11.4%(4/35)],差异均有统计学意义(χ^2值分别为4.181、5.020,均P<0.05)。两组患者术后6个月功能评分比较显示,瘤段灭活再植术组功能恢复差于肿瘤假体置换术组[(17.4 ±2.5)分比(24.3±4.8)分],差异有统计学意义(t=-4.911,P<0.05);术后18个月功能评分比较显示,瘤段灭活再植术组功能评分有所上升,高于肿瘤假体置换术组[(27.3 ±2.7)分比(24.8±4.6)分],但差异无统计学意义(t=1.811,P>0.05)。结论肿瘤假体置换术疗效优于瘤段灭活再植术,可作为现阶段四肢骨肉瘤患者保肢治疗时的首选手术方式。
- 任杰吕智李立志冯毅吕嘉白军军
- 关键词：骨肉瘤再植术保肢生存率
- 3D打印技术在脊柱结核治疗中的应用
- 目的脊柱结核至今尚无一种公认的方法用于确定精确的病灶范围，制定直观具体的手术计划和实时动态手术指导评价手术疗效。利用CT影像学资料所提供的断层解剖信息，联合3D打印技术全面评价脊柱结核病灶变化，制定个体化的治疗方案，进行...
- 张桦栋吕智冯毅
- 关键词：3D打印脊柱结核
- 骨肉瘤相关基因甲基化研究进展
- 2021年
- 骨肉瘤的发生与多种癌基因、抑癌基因有关。DNA甲基化是表观遗传的重要特征,能够引起癌基因的激活与抑癌基因的失活。DNA甲基化是研究骨肉瘤的转移、复发乃至耐药的重要因素之一。研究骨肉瘤相关基因的甲基化,为研究骨肉瘤的发生、转移以及耐药提供理论支持,同时为临床诊断、预后预测和靶向治疗及新型药物的研究提供理论依据。
- 武太勇李健付海军程才统吕智冯毅
- 关键词：骨肉瘤基因甲基化
- 全反式维甲酸联合TK基因治疗对骨肉瘤旁观者效应的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察全反式维甲酸(ATRA)联合脂质体介导的自杀基因/丙氧鸟苷(TK/GCV)系统对人骨肉瘤U-2细胞旁观者效应的影响。方法重组质粒plRES-EGFP-TK培养和转染人骨肉瘤U-2细胞,荧光倒置显微镜和流式细胞仪观察转染后的细胞生长状态,MTT法检测plRES-EGFP-TK/GCV系统对人骨肉瘤U-2细胞的杀伤力。ELISA检测细胞培养液中连接蛋白(CX)43的表达情况。结果 plRES-EGFP-TK/GCV系统对人骨肉瘤U-2细胞旁观者效应在TK+∶TK-细胞比例为5∶5时明显出现(P<0.05),而联合ATRA后,在TK+∶TK-细胞比例为3∶7时明显出现(P<0.05),且在细胞生存率均在50%时,TK+细胞比例下降20%。ATRA(10-6mol/L)处理人骨肉瘤U-2细胞24h、48h、72h后,CX43蛋白的浓度分别为(0.559±0.018)ng/mL、(0.654±0.023)ng/mL、(0.826±0.065)ng/mL,均P<0.01。结论全反式维甲酸可能通过增强CX43的表达,提高plRES-EGFP-TK/GCV系统对人骨肉瘤U-2细胞的杀伤效应。
- 霍洪亮吕智冯毅李晋惠原元凯张桦栋
- 关键词：TK基因骨肉瘤全反式维甲酸旁观者效应
- 脊柱结核外科治疗进展被引量：8
- 2021年
- 脊柱结核是脊柱感染性疾病中最常见的类型。当患者出现脊柱稳定性进行性降低,严重结核中毒症状,严重神经压迫症状时,常需手术治疗。正确有效的抗结核药物治疗是手术治疗的基础。一期前路手术是脊柱结核手术的经典入路,其安全性和有效性已被验证。近年,单纯后路手术治疗脊柱结核也得到越来越多的学者推崇。有效的病灶清除、植骨融合以及坚强内固定是脊柱结核手术成功的关键,正确的术后处理及监测复发也是提高手术疗效必不可少的部分。
- 李健武太勇付海军吕智冯毅
- 关键词：脊柱结核手术入路手术方式术后监测
- Nocodazole对骨肉瘤MG-63细胞增殖凋亡的影响及机制研究被引量：2
- 2011年
- 目的以细胞有丝分裂阻滞剂Nocodazole为诱导物,诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡,并进行生物化学指标的检测。方法首先,观察1nmol/L～10μmol/L递增浓度的Nocodazole对MG-63细胞的作用,然后选取10,50,100,500nmol/L4个浓度诱导凋亡,通过噻唑蓝(MTT)比色实验测定细胞生长曲线;流式细胞技术(FCM)分析细胞周期;免疫细胞化学方法检测PLK1表达情况;用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析Nocodazole作用前后MG-63细胞内PLK1基因表达情况。结果不同浓度Nocodazole作用MG-63细胞24h后,对细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性增加。流式细胞仪分析结果显示,Nocodazole作用MG-63细胞后,G0/G1期细胞含量降低,S期细胞比例增加,G2/M期细胞比例则明显增加,且随着处理浓度的增加其G2/M期细胞含量逐渐增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Nocodazole作用后,免疫细胞化学检测显示,PLK1表达明显下降。RT-PCR分析显示经Nocodazole作用后的骨肉瘤细胞株MG-63表达PLK1较用药前明显下降。上述结果都有明显的量-效关系。结论 Nocodazole诱导MG-63细胞凋亡、G2/M期阻滞的机制可能是通过抑制PLK1基因的表达实现的。
- 贾鹏吕智刘小丽冯毅薛小云
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖细胞凋亡
- TK/GCV系统对骨肉瘤MG-63细胞杀伤的体外实验研究被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨脂质体介导的TK/GCV系统对骨肉瘤MG-63细胞的杀伤作用以及所产生的旁观者效应。方法:脂质体介导TK基因体外转染骨肉瘤MG-63细胞,倒置荧光显微镜观察细胞转染是否成功,流式细胞仪检测转染细胞与未转染细胞的转染效率。将未转染的骨肉瘤MG-63细胞分为3组,实验1组用转染TK/GCV的细胞上清液与原培养液按1/10、1/7、1/5、1/2比例混和液培养;实验2组用0.22μm滤器过滤的转染后的细胞上清液与原培养液按1/10、1/7、1/5、1/2比例混和液培养;对照组用培养液培养,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分别测定各组细胞的生长抑制率及骨肉瘤细胞对TK/GCV系统的敏感性。结果:经TK基因转染的MG-63细胞,倒置荧光显微镜下有大量绿色荧光蛋白表达,流式细胞仪检测转染TK基因的细胞转染效率可达75.5%。6 d后MTT检测结果显示实验1组中各比例浓度的混合培养液对细胞的抑制率与对照组相比有统计学意义(P<0.05);实验2组中1/10、1/7比例浓度的混合培养液对细胞的抑制率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。经TK基因转染的MG-63细胞随GCV浓度增加,细胞凋亡率增加。结论:脂质体介导的TK/GCV系统能够通过旁观者效应抑制骨肉瘤MG-63细胞的生长。
- 张桦栋吕智冯毅刘小丽侯慧铭
- 关键词：骨肉瘤旁观者效应
