梁敏
- 作品数：5 被引量：71H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 晚期糖基化终产物刺激内皮细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1信号传导途径被引量：32
- 2003年
- 目的 研究晚期糖基化终产物 (AGE)修饰蛋白对人内皮细胞分泌单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)的影响及其作用的信号传导途径。方法 将培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)和人内皮细胞株ECV30 4与不同浓度AGE修饰的人血清白蛋白 (AGE HSA)或牛血清白蛋白 (AGE BSA)共同培养。用Western印迹及酶联免疫吸附法 (ELISA)检测MCP 1蛋白合成及分泌 ,用逆转录PCR(RT PCR)法检测MCP 1mRNA表达 ,用流式细胞术观察细胞内氧化应激 ,用免疫沉淀 激酶活性测定法分析细胞p38丝裂素活化蛋白激酶 (p38 MAPK)活性。结果 AGE HSA和AGE BSA以时间和剂量依赖的方式上调内皮细胞MCP 1mRNA和蛋白的表达并诱导细胞氧化应激和活化p38 MAPK。 5 0 μg/mlAGE HSA与HUVEC共同培养 12h ,使细胞上清中的MCP 1浓度由 4 8 3pg/μg± 0 6pg/μg蛋白上升至 14 8 1pg/μg± 12 6pg/μg蛋白 (P <0 0 1)。5 0 μg/mlAGE HSA与HUVEC共同孵育 30min ,使p38 MAPK的磷酸化活性升高 91%± 14 % (P <0 0 1)。抗氧化剂或p38通路特异阻断剂SB 2 0 35 80能够阻断AGE修饰蛋白诱导的MCP 1表达。结论 AGE修饰蛋白能够通过p38 MAPK信号传导途径上调内皮细胞分泌MCP 1,这一作用是经氧化应激机制介导。
- 郭志坚侯凡凡梁敏王力张训刘志强
- 关键词：糖基化终产物内皮细胞单核细胞趋化蛋白-1信号传导途径
- 甲基乙二醛对人血管内皮细胞的毒性作用被引量：9
- 2002年
- 目的 探讨甲基乙二醛(methylglyoxal,MGO)对人血管内皮细胞的毒性作用及其机制。方法 体外培养的人脐静脉血管内皮细胞与不同浓度MGO共同孵育后,通过形态学观察和原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,并以荧光Annexin-V及碘化丙碇(PI)染色,经流式细胞仪定量检测凋亡细胞和死亡细胞。细胞内氧化水平以氧化敏感的荧光染料2,7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,用流式细胞仪测定。结果 MGO刺激后,内皮细胞形态和超微结构出现凋亡的特异性变化,并且TUNEL染色阳性,流式细胞仪测定显示凋亡细胞和死亡细胞数量与MGO呈时间和剂量依赖关系;同时,MGO刺激后细胞内氧化水平明显升高,其时效与量效关系与细胞凋亡和死亡的变化相似。抗氧化剂(N-乙酰半胱氨酸和丙丁酚)及羰基化合物清除剂(氨基胍)对MGO引起的细胞氧化应激和细胞毒性具有抑制作用。结论 MGO对人血管内皮细胞具有直接的毒性作用,其机制可能是诱导细胞氧化应激。这些结果提示,活性羰基化合物蓄积可能与慢性肾功能衰竭和糖尿病血管并发症的形成有关。
- 梁敏侯凡凡易朝辉张训张训刘志强
- 关键词：甲基乙二醛血管内皮细胞细胞毒性氧化应激
- 单核细胞RAGE表达上调:慢性肾功能衰竭微炎症的机制被引量：27
- 2004年
- 目的 探讨慢性肾功能衰竭 (CRF)时细胞表面晚期糖基化终产物 (AGE)受体 (RAGE)的表达及其在单核细胞介导的炎症反应中的作用。方法 96例非糖尿病CRF患者的断面队列研究。用密度梯度离心加免疫磁珠法分离外周血单核细胞 (PMC) ,用特异性抗RAGE抗体染色、流式细胞仪检测PMC表面RAGE表达 ,Scatchard印迹法分析PMC结合AGE的位点数和亲和力 ,用ELISA法测定循环新蝶呤、TNF α、C反应蛋白 (CRP)和AGE水平。结果 CRF患者PMC表面RAGE表达明显上调并随肾功能恶化而增加 (r2 =0 73) ,RAGE上调程度与血浆AGE水平呈正相关 (r =0 71) ;CRF患者PMC与AGE的结合位点数和亲和力明显高于正常人 ,在相同剂量AGE刺激下 ,CRF患者PMC生成的TNF α明显多于正常PMC ,且AGE诱导的TNF α分泌可被抗RAGE抗体所抑制 ;患者PMC表面RAGE表达水平与循环TNF α水平呈正相关 (r=0 6 1) ,与单核细胞活化标志物———新蝶呤 (r=0 6 5 )和急性时相反应蛋白———CRP(r =0 4 4 )呈正相关。结论 CRF患者RAGE表达增加 ,RAGE上调可能通过促发炎症正反馈环导致单核细胞持续活化 ,从而参与CRF由单核细胞介导的全身微炎症反应。
- 侯凡凡任昊郭志坚陈平雁梁敏张训
- 关键词：CRF单核细胞上调
- 化学修饰蛋白质类尿毒症毒素的检测方法与评价被引量：2
- 2003年
- 慢性肾衰竭时,化学修饰的蛋白质,包括晚期糖基化终产物(AGE)修饰的蛋白质、氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)和晚期氧化蛋白产物(AOPP)等,在循环和组织中蓄积.已证实这些被修饰的蛋白参与慢性肾衰竭并发症的形成,如透析相关性淀粉样变、动脉粥样硬化、神经系统和免疫功能异常等.
- 梁敏侯凡凡陈瑗
- 关键词：化学修饰蛋白质尿毒症尿毒症毒素慢性肾功能衰竭
- 肝组织学检查对诊断终末期肾病合并病毒性肝炎的意义被引量：1
- 2002年
- 目的 评价肝组织学检查对诊断终末期肾病合并病毒性肝炎的临床意义。方法 84例合并慢性乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染的终末期肾病患者接受肝穿刺活检术,以半定量积分法评价肝组织炎症和纤维化程度,将其与临床表现、血清学指标进行对比分析。结果 终末期肾病合并肝炎病毒感染者肝组织的炎症活动度与纤维化程度显著相关(P<0.01);根据临床表现和生化指标诊断病毒性肝炎与组织学诊断的符合率为38.1％;肝组织炎症活动度和纤维化程度不同的患者之间,血清丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸转氨酶、白蛋白、总胆红素和凝血酶原活动度均无明显差异(P均>0.05)。结论 对终末期肾病患者而言,肝组织学检查是诊断慢性肝炎并判断肝脏病变程度唯一可靠的指标。
- 梁敏侯凡凡王力周展眉
- 关键词：病毒性肝炎终末期肾病组织病理学
