周文娇
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
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- 衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白Vp1蛋白IN5部分的克隆、表达、鉴定及其对沙眼衣原体抑制作用的研究被引量：5
- 2017年
- 目的 探讨衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白Vp1蛋白IN5部分在Vp1抑制沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）生长过程中的作用.方法 以Vp1质粒为模板,PCR扩增IN5环基因片段,构建重组质粒pET28a/IN5,转化后诱导表达鉴定,收集纯化的IN5蛋白.将IN5蛋白、Vp1蛋白及各对照组作用于Ct培养过程中,48 h后碘染色及间接免疫荧光进行包涵体计数,采用单因素方差分析比较各组间包涵体均数的差异,若各组均数间差异有统计学意义,采用Bonferroni法对任两个均数进行比较,最后计算IN5蛋白和Vp1蛋白对Ct的抑制率.结果 成功地诱导表达出Vp1蛋白的IN5部分,并发现在浓度均为53 μg/mL时,IN5蛋白对Ct的抑制率为52.42%,而Vp1的抑制率为78.04%.结论 IN5蛋白同样对Ct生长有抑制作用,但较Vp1弱,这为寻找Vp1蛋白抑制Ct生长的优势蛋白区域提供了初步探索的经验.
- 郑蕾刘原君郭睿周全周文娇刘全忠
- 关键词：衣原体沙眼
- 白细胞介素22对人表皮角质形成细胞CC趋化因子配体27表达的影响被引量：5
- 2018年
- 目的 研究白细胞介素22（IL-22）对人表皮角质形成细胞CC趋化因子配体27（CCL27）表达的影响及机制。方法 免疫组化法检测10例银屑病患者皮损及5例健康对照组皮肤中CCL27的表达。培养HaCaT细胞，分为8组：对照组用PBS处理，IL-22处理组分别用12.5、25、50、100、200 μg/L IL-22处理，信号通路阻断组先分别加入50 μmol/L AG490（JAK2/STAT3通路抑制剂）或PD98059（MAPK-ERK1/2通路抑制剂）阻断处理，2 h后各加入50 μg/L IL-22，继续于37 ℃、5% CO2孵箱中培养。孵育24 h 后，分别提取 HaCaT 细胞总蛋白并收集上清液，Western印迹、ELISA法分别检测CCL27表达。结果 免疫组化检测示，银屑病患者皮损中CCL27的表达水平明显高于正常人皮肤。Western 印迹显示，HaCaT细胞分别用12.5、25、50、100、200 μg/L IL-22处理后，CCL27相对表达量逐渐升高至0.491 ± 0.013、0.620 ± 0.019、0.623 ± 0.014、0.802 ± 0.052、1.138 ± 0.013，均较对照组（0.413 ± 0.013）升高（P＜0.01）；IL-22 ＋ AG490组及IL-22 ＋ PD98059组CCL27表达量分别为0.411 ± 0.019和0.280 ± 0.012，均低于50 μg/L IL-22组（均P＜0.01）。ELISA法检测显示，各组HaCaT细胞CCL27分泌水平变化趋势与Western印迹法检测结果一致。结论 IL-22可促进HaCaT 细胞CCL27表达，其机制可能与MAPK-ERK1/2和JAK2/STAT3通路有关。
- 周文娇任杰韩珑刘欣欣汤坤龙罗素菊
- 关键词：角蛋白细胞JANUS激酶2白细胞介素22
- 白细胞介素22对HaCaT细胞CCL28表达的影响被引量：1
- 2020年
- 目的探讨白细胞介素(IL-22)对HaCaT细胞黏膜相关上皮趋化因子(CCL28)表达的影响。方法培养HaCaT细胞,将其分为6组:4个IL-22组(分别用12.5、25、50、100μg/L的IL-22进行干预处理);阻断剂组(50μmol/L PD98059阻断干预,2 h后加入50μg/L IL-22);对照组(用PBS处理)。24 h后,用CCK-8检测细胞的增殖;用实时荧光定量RT-PCR检测CCL28 mRNA的水平变化;用蛋白免疫印迹法、酶联免疫吸附法和免疫荧光检测CCL28蛋白水平的变化。结果CCK-8检测显示,上述浓度的IL-22作用于HaCaT细胞24 h后,对细胞的增殖有明显的促进作用,且这种促进作用能被PD98059抑制,差异具有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量RT-PCR检测显示,上述浓度的IL-22作用于HaCaT细胞,细胞中CCL28 mRNA逐渐升高,均较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01);通路阻断剂组较50μg/L IL-22组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。用蛋白免疫印迹法和酶联免疫法检测到CCL28蛋白水平变化的趋势与实时荧光定量RT-PCR检测到的CCL28 mRNA的水平变化的趋势一致,且差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测显示,HaCaT细胞内CCL28蛋白主要表达在细胞质。结论IL-22可剂量依赖促进HaCaT细胞增殖和CCL28的表达,其可能通过MAPK-ERK1/2通路作用。
- 熊传茜周文娇王惠平韩珑樊雁飞刘原君刘全忠罗素菊
- 关键词：银屑病丝裂原激活蛋白激酶类HACAT细胞
