李欢
- 作品数：4 被引量：25H指数：3
- 供职机构：陕西中医药大学药学院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 综合评分法优选黄芪中6种皂苷类成分的提取工艺被引量：10
- 2019年
- 目的:优选黄芪中6种皂苷成分(黄芪甲苷,黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,异黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ)的提取工艺。方法:采用正交试验设计,以甲醇的体积分数、提取时间、提取次数为考察因素,以黄芪中6种皂苷成分的含量为评价指标,用多指标综合评分法进行数据处理分析,优选最佳提取工艺。结果:黄芪中6种皂苷成分最佳提取工艺为:采用加热回流提取法,80%甲醇提取3次,每次提取1h。结论:通过重复试验验证表明,优选的最佳提取工艺稳定可靠,有效成分提取效率高。
- 王亚丽田曼李江王昌利葛人杰李欢王媚颜永刚张岗
- 关键词：正交试验综合评分法皂苷
- 铁皮石斛过氧化氢酶基因DoCAT1的鉴定与表达分析
- 目的 分离铁皮石斛DoCAT1全长,进行生物信息和表达分析.方法 RACE获基因全长;生物信息预测基因编码蛋白的分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 6.0进行多序列比对和进化树构建分析;qPCR 检测基因表达模...
- 张娜黑小斌李欢李元敏颜永刚沈霞李依民张岗
- 关键词：铁皮石斛过氧化氢酶基因克隆定量PCR
- 铁皮石斛转录因子基因DoWRKY3的克隆与分子特性分析被引量：8
- 2017年
- 目的克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛转录因子基因DoWRKY3,并进行生物信息学和表达模式分析。方法采用RT-PCR和RACE技术获取基因全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等分子特性;用软件DNASTAR 6.0和MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助定量PCR检测基因表达模式。结果分离到DoWRKY3基因(GenBank注册号KT957549),cDNA全长2 065 bp,编码1条由509个氨基酸组成的多肽,相对分子质量55 580,等电点6.58;推定的DoWRKY3氨基酸序列具有植物WRKY蛋白家族保守的2个WRKY结构域(217~279、381~449)、2个WRKYGQK位点和2个C_2H_2型锌指结构元件(C-X_4-C-X_(22-23)-H-X_1-H);该蛋白预测无信号肽或跨膜域,定位在细胞核;DoWRKY3蛋白与多种植物WRKY蛋白一致性较高(46.3%~57.4%),与拟南芥At WRKY3、At WRKY4和丹参Sm WRKY54蛋白等亲缘关系近,聚在WRKY分子进化树的Group 1分支;DoWRKY3基因具有组织表达特异性,其转录本在石斛根和叶中表达量较高,分别为茎中的2.32倍和1.69倍。结论 DoWRKY3基因全长的分子克隆与特征分析,为深入研究该基因在铁皮石斛生长发育、逆境生理以及次级代谢调控中的生物学功能奠定基础。
- 张岗刘思思彭亮周丽思刘亮亮李欢黑小斌沈霞郭顺星
- 关键词：铁皮石斛WRKY克隆定量PCR
- 铁皮石斛2个F家族ABC转运蛋白基因的克隆和表达研究被引量：10
- 2017年
- 目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale ABC(ATP-binding cassette)转运蛋白F家族基因并进行生物信息学分析。方法利用RACE从铁皮石斛叶片cDNA中分离ABC基因,并进行编码蛋白相对分子质量、等电点、结构域、信号肽、跨膜域及亚细胞定位等生物信息学分析;采用DNASTAR和MEGA6进行氨基酸多序列比对和分子进化分析;借助实时荧光定量PCR技术检测基因组织表达模式。结果从铁皮石斛中分离到2个F家族ABC转运蛋白基因DoABCF1和DoABCF2(Gen Bank注册号KU160474和KU160475),全长为2 104 bp和2 193 bp,各编码1条由600和659个氨基酸组成的肽链,相对分子质量67 030和74 140,等电点6.20和5.71;DoABCF1和DoABCF2蛋白均包含2个保守的ABC结构域(分别为74~314、385~600和65~323、392~607)和多个基元;2个蛋白不含信号肽或跨膜域,预测均定位在叶绿体。2个基因与植物F家族ABC转运蛋白基因相似性高达80%以上,与玉米和水稻等单子叶植物F家族ABC转运蛋白基因亲缘关系较近。DoABCF1和DoABCF2基因转录本在石斛3个器官中差异表达且均在叶中高度表达,茎和根中相对表达量差异不显著;以茎为校正样本,前者在根中相对表达量为茎中的1.74倍,后者在叶中表达量为茎中的3.44倍。结论成功获得DoABCF1和DoABCF2基因全长cDNA,二者在铁皮石斛叶中的高表达特征暗示其可能在铁皮石斛生长发育过程中起一定作用。
- 李依民雷根平颜永刚彭亮张娜刘亮亮黑小斌李欢张岗郭顺星
- 关键词：铁皮石斛ATP-BINDINGCASSETTE转运蛋白
