刘娜
- 作品数：15 被引量：48H指数：4
- 供职机构：天津市农业科学院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划项目转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学医药卫生更多>>
- 应用微滴数字PCR技术快速检测食用菌中沙门氏菌被引量：30
- 2017年
- 定量风险评估是整个风险评估体系的发展趋势和终极体现形式,而快速、准确、简便的定量技术则是保障整个体系顺利、有效完成的核心支撑。作者根据沙门氏菌inv A毒力基因序列,在前人对引物研究结果基础上,合成特异性引物和探针。以沙门氏菌标准菌株为研究对象,建立沙门氏菌微滴数字PCR的快速定量检测方法,并对其特异性、灵敏度、样品实测等关键指标与传统培养法进行对照验证。结果表明,所建立的微滴数字PCR方法具有较好的特异性,检测灵敏度可达到10~2CFU/m L,样品实测与传统国标法对比,二者符合率100%。所建立的沙门氏菌微滴数字PCR定量检测方法,可以快速、准确、直接地分析沙门氏菌的含量,无需构建质粒和标准曲线,避免了因标准曲线量值偏差而影响样品定值的准确性,所建立的方法为食源性沙门氏菌污染的快速定量检测提供了技术支撑,为微生物风险评估体系的完善奠定了基础。
- 赵新兰青阔陈锐朱珠刘娜王永
- 关键词：沙门氏菌
- 天津市2015~2019年生鲜果蔬病原微生物污染排查分析被引量：4
- 2022年
- 为排查天津市即食生鲜果蔬病原微生物污染情况,2015~2019年在生产环节和流通环节抽取生菜、番茄、黄瓜、苦菊、桃和梨等6种即食果蔬品种共计654批次样品,采用国家标准方法分析样品中菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌、蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌O157:H7污染状况进行风险分析。结果显示,654批次样品中检出食源性致病菌135批次,检出率为20.6%,其中包括沙门氏菌1份,金黄色葡萄球菌6份,蜡样芽孢杆菌128份,其他致病菌均未检出。食源性致病菌检出率较高的样品多出现在超市和农贸市场,表明即食果蔬致病菌的污染易发生在流通环节。即食生鲜果蔬中食源性致病菌污染对消费者健康存在潜在的安全隐患,需加强采后流通环节污染防控,保障即食果蔬食品安全,防止食源性疾病暴发。
- 徐石勇于海涛刘娜李瑞环高芳瑞黄凤军王永赵新
- 关键词：食源性致病菌检出率
- 转基因检测标准物质研制关键环节质量控制研究被引量：2
- 2022年
- 在转基因产品检测方法开发、身份鉴定和产品成分定性、定量检测过程中,标准物质是不可缺少的物质基础。本研究对标标准物质申报要求,着重对比了基体标准物质、基因组DNA标准物质、质粒标准物质三种类型转基因检测标准物质的研制过程,提出关键环节的质量控制要求,为促进转基因检测标准物质研制过程标准化、提升研制报告编制质量、提高申报通过率提供技术支撑。
- 高芳瑞王颢潜李瑞环刘娜王永武玉花李亮赵新梁晋刚
- 关键词：转基因检测基体标准物质
- 一种实时荧光定量PCR检测耐除草剂转基因大豆J12含量的方法
- 本发明公开了一种实时荧光定量PCR检测耐除草剂转基因大豆J12含量的方法，该方法以抗除草剂转基因大豆J12其3’端转化体特异性序列设计合成特异性引物和探针，结合大豆内标基因<I>Lectin</I>，通过稀释标准品制作标...
- 赵新刘双刘娜李瑞环王成于海涛兰青阔王永
- 转基因大豆‘ZH 10-6’数字PCR精准定量检测方法的建立被引量：5
- 2021年
- 为实现转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’转化体成分的精准定量检测,以转基因大豆‘ZH 10-6’的5′端边界序列为靶序列,设计PCR扩增引物和TaqMan探针,并对引物探针浓度进行优化,经特异性测试,建立了耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’的微滴式数字PCR检测方法。结果表明:1)特异性良好:只有以转基因耐除草剂大豆品种‘ZH 10-6’基因组为模板才有扩增信号;2)灵敏度高:在相对标准偏差≤25%的情况下,方法的检出限(LOD)为13.0个拷贝;定量限(LOQ)为66.0个拷贝;3)PCR扩增反应模板含量与样品拷贝数之间线性相关系数R^(2)>0.99,DNA含量线性范围为0.08%~100.00%。综上,本研究建立的转基因耐除草剂大豆‘ZH 10-6’转化体定量方法特异性强、稳定性好、准确度和灵敏度高,可用于对转基因大豆品种‘ZH 10-6’的定量检测。
- 刘双赵新李瑞环刘娜兰青阔檀建新王永
- 一种微滴数字PCR分析抗除草剂转基因大豆J12拷贝数的方法
- 本发明公开了一种微滴数字PCR分析抗除草剂转基因大豆J12拷贝数的方法，该方法以抗除草剂转基因大豆J12的<I>G2‑epsps</I>和<I>GAT</I>外源插入目的基因序列、3’端转化体特异性序列设计合成特异性引物...
- 赵新刘双刘娜李瑞环王成于海涛兰青阔王永
- 文献传递
- 微流控芯片及微流控芯片的制备方法
- 本发明公开了一种微流控芯片及微流控芯片的制备方法，其中，微流控芯片包括反应模块，反应模块包括进样流道、分样流道和反应池，进样流道的一端设有进样口；分样流道包括多个，所有分样流道沿进样流道内流体运动方向依次与进样流道连接；...
- 齐欣赵新刘娜李瑞环王成兰青阔王永
- 天津地区黄瓜中风险性食源性致病菌污染水平分析
- 2022年
- 为掌握天津地区黄瓜中食源性致病菌的污染情况,2017—2019年随机从基地和市场环节采集158份黄瓜样本和38份环境交叉污染样本,对其进行沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌及大肠杆菌O157:H7的检测。结果表明:158份黄瓜样本中检出3份食源性致病菌,其中金黄色葡萄球菌检出比例为2/158,沙门氏菌检出比例为1/158,38份环境交叉污染样本均为检出。由于国内外暂未发布实施沙门氏菌的定量检测标准,本试验仅对有定量检测标准的金黄色葡萄球菌进行研究。通过设置黄瓜中金黄色葡萄球菌QMRA污染水平分析,得出结论贮藏温度与最终污染量/概率分布的相关性最大。因此,建议黄瓜在购买后,应注意低温保存,以有效保证居民的食用安全。
- 于海涛刘娜李瑞环徐石勇黄凤军赵新
- 关键词：黄瓜金黄色葡萄球菌贮藏温度
- 基于单拷贝核基因的数字PCR定量检测肉制品中羊源性成分被引量：3
- 2021年
- GeneBank搜索牛、绵羊、山羊、猪、马、驴、鸡、鸭、鹅、火鸡、狗、猫、鼠、兔、貂等15种动物的单拷贝核基因组序列信息,应用生物信息学分析筛选15种动物共有的种间保守区域,设计一对可同时扩增15种动物源性DNA的内参基因引物和探针;同时分析筛选绵羊和山羊共有且和其余动物种内特异性区域,设计一对只能扩增羊源性DNA的特异性基因引物和探针。基于微滴数字PCR技术,引入内参基因校正羊种属特异性基因测定方法,建立科学准确的肉制品中羊源性成分量化判定方法。结果表明,所建立方法具有良好的特异性和通用性,内参基因和羊种属特异性基因的最低检出限分别为32和26 copies/μL,模拟添加样品的正确度偏差均值为8.66%,符合数字PCR方法制定指南要求不得大于25%,说明量化判定方法结果具有较高的准确性。
- 赵新陈锐刘娜王一衡刘双李瑞环王永兰青阔
- 关键词：核基因组内参基因肉制品
- 一种实时荧光定量PCR检测耐除草剂转基因大豆J12含量的方法
- 本发明公开了一种实时荧光定量PCR检测耐除草剂转基因大豆J12含量的方法，该方法以抗除草剂转基因大豆J12其3’端转化体特异性序列设计合成特异性引物和探针，结合大豆内标基因<I>Lectin</I>，通过稀释标准品制作标...
- 赵新刘双刘娜李瑞环王成于海涛兰青阔王永
- 文献传递
