兰青阔 作品数:87 被引量:285 H指数:11 供职机构: 天津市农业科学院 更多>> 发文基金: 国际科技合作与交流专项项目 天津市应用基础与前沿技术研究计划 转基因生物新品种培育专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 更多>>
便携式转基因快速检测箱 本实用新型公开了一种便携式转基因快速检测箱,该检测箱由箱体和箱盖组成,其特征在于包括箱体及箱盖内分布嵌置槽,所述嵌置槽内配置有移液器、枪头盒、管盒、纸巾盒和手套盒、可控温金属加热设备、废物缸以及连体可移动操作台和试剂存放... 王永 兰青阔 徐石勇 赵新 朱珠 郭永泽 程奕文献传递 转基因耐除草剂大豆ZH10-6实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:5 2021年 转基因耐除草剂大豆ZH10-6是含有G2-EPSPS基因和GAT基因耐除草剂大豆新品系,对广谱型除草剂草甘膦具有耐受性,在中国具有重要产业化应用前景。本研究以其转化体特异性序列为靶标,建立了基于Taqman水解探针的实时荧光定量PCR检测方法。该方法能特异、定量检测出转基因耐除草剂大豆ZH10-6转化体成分,线性度大于0.995,RSD为0.17%~2.07%,定量限达0.16%,检测限达到0.032%。该方法为转基因耐除草剂大豆ZH10-6的精准定量检测提供了一种新的技术手段,为农业转基因监管提供技术支撑。 刘双 陈笑芸 曹际娟 兰青阔 檀建新 王永关键词:转基因大豆 实时荧光定量PCR 一种精准定量检测转基因耐除草剂大豆ZH10-6的方法 本发明公开了一种精准定量检测转基因耐除草剂大豆ZH10‑6的方法,它是采用一对特异性的引物、带有荧光标记的探针及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在PCR反应前由微滴发生器将PCR体系分配到足够小的反应单元中,实现每个反... 王一衡 赵新 刘双 尉万聪 兰青阔 王永文献传递 基于代谢组学的转基因水稻生物安全评价方法研究 被引量:2 2020年 代谢组学因其全面无偏向性、非靶标轮廓分析的技术优势,成为目前转基因生物安全评价技术研究的热点。以转基因抗虫水稻及其非转基因受体为研究对象,采用基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-QTOF/MS)分析的转基因作物代谢组评价技术流程,对代谢组提取方法、数据处理方法、分析平台等进行了探索。结果表明,应用80%甲醇水能有效提取水稻苗期叶片中的代谢物;经UPLC分离、QTOF/MS分析、正交校正的偏最小二乘辨别分析(OPLS-DA)等计算方法,能够有效发现转基因水稻及其受体之间的差异代谢物。本研究建立的完整的转基因水稻代谢组分析方法具有分辨率高、易掌握的优点。本研究丰富了现有的转基因生物安全评价的内容和方法,为转基因生物安全管理提供技术支撑。 兰青阔 赵新 沈晓玲 魏静娜 刘双 陈锐 檀建新 王永关键词:转基因抗虫水稻 转基因作物外源转基因成分环介导等温扩增技术检测方法的建立及应用 被引量:32 2009年 【目的】建立转基因作物外源转基因成分环介导等温扩增技术检测方法。【方法】以转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)为主要研究对象,利用环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP),针对CaMV35S基因的6个区域设计4种特异引物,利用1种链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在65℃保温1h,通过荧光显色即可完成对转基因作物鉴定工作。同时对7种转基因作物进行LAMP检测。【结果】该LAMP方法通过特异性检测含有CaMV35S启动子的转基因作物,其检测结果的特异性与常规PCR方法结果一致,灵敏度是常规PCR的10倍。【结论】转基因作物LAMP检测方法具有高度的特异性及稳定性,结果可靠,非常适合转基因作物的快速检测,有较好的应用价值。 王永 兰青阔 赵新 朱珠 程奕关键词:转基因作物 环介导等温扩增技术 4种食源性致病菌多重PCR检测技术的研究及应用 被引量:8 2009年 为建立一种利用多重PCR技术检测和鉴定沙门氏菌(Salmonellla spp)、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的方法,根据沙门氏菌侵袭力蛋白A基因(invA gene)、单核细胞增生李斯特菌蛋白转录调控基因(prfA gene)、金黄色葡萄球菌自溶素基因(alt gene)、蜡样芽孢杆菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB gene)设计引物,进行多重PCR扩增,并对多重PCR反应体系进行优化。在此基础上建立了4种致病菌的多重PCR检测体系,同时以国标法进行对比验证。结果表明,本研究建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高,具有很好的应用前景。 赵新 王永 兰青阔 朱珠 程奕关键词:食源性致病菌 多重PCR 一种快速检测转基因大豆的方法 本发明公开了一种转基因大豆的快速检测方法。其原理是采用4条特异引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在65℃左右对核酸进行扩增,短时间扩增效率可达到10<Sup>9</Sup>-10<Sup>10</Sup>个拷贝。其... 王永 兰青阔 程奕 张丽华 朱珠 赵新文献传递 一种实时荧光定量PCR检测耐除草剂转基因大豆J12含量的方法 本发明公开了一种实时荧光定量PCR检测耐除草剂转基因大豆J12含量的方法,该方法以抗除草剂转基因大豆J12其3’端转化体特异性序列设计合成特异性引物和探针,结合大豆内标基因<I>Lectin</I>,通过稀释标准品制作标... 赵新 刘双 刘娜 李瑞环 王成 于海涛 兰青阔 王永一种快速检测转基因玉米品系BT176的方法 本发明公开了一种转基因玉米BT176的快速检测方法及所用引物。其原理是采用5条特异引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,在64℃左右对样品模板DNA进行扩增,短时间扩增效率可达到10<Sup>9</Sup>-10<Su... 王永 兰青阔 程奕 赵新 朱珠文献传递 应用微滴数字PCR技术快速检测食用菌中沙门氏菌 被引量:31 2017年 定量风险评估是整个风险评估体系的发展趋势和终极体现形式,而快速、准确、简便的定量技术则是保障整个体系顺利、有效完成的核心支撑。作者根据沙门氏菌inv A毒力基因序列,在前人对引物研究结果基础上,合成特异性引物和探针。以沙门氏菌标准菌株为研究对象,建立沙门氏菌微滴数字PCR的快速定量检测方法,并对其特异性、灵敏度、样品实测等关键指标与传统培养法进行对照验证。结果表明,所建立的微滴数字PCR方法具有较好的特异性,检测灵敏度可达到10~2CFU/m L,样品实测与传统国标法对比,二者符合率100%。所建立的沙门氏菌微滴数字PCR定量检测方法,可以快速、准确、直接地分析沙门氏菌的含量,无需构建质粒和标准曲线,避免了因标准曲线量值偏差而影响样品定值的准确性,所建立的方法为食源性沙门氏菌污染的快速定量检测提供了技术支撑,为微生物风险评估体系的完善奠定了基础。 赵新 兰青阔 陈锐 朱珠 刘娜 王永关键词:沙门氏菌