刘丹
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PRMT5通过抑制NF-κB削弱DR4介导的趋化因子CCL20释放
- 2013年
- 构建表达DR4的质粒pCMV-DR4-HA(DR4)和表达PRMT5的质粒pCMV-PRMT5-Flag,共转染293T细胞,验证DR4和PRMT5的相互作用.将DR4和蛋白精氨酸N端甲基化转移酶5(protein arginine methyltransferase5,PRMT5)两种质粒分别或者共转染293T细胞,研究PRMT5对DR4引起的炎症因子释放的影响,探讨PRMT5抑制DR4(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor1)引起炎症因子释放的分子机制.分别通过RT-PCR和ELISA方法对炎症因子的表达进行定量检测.通过双荧光报告基因方法检测PRMT5对DR4引起NF-κB活性变化的影响,并且使用WesternBlot方法检测ERK的表达变化.DR4和PRMT5在293T细胞中能相互结合,PRMT5过表达降低了DR4引起的NF-κB活性和ERK的磷酸化,导致CCL20分泌减少.因此,PRMT5在293T细胞中与DR4结合,通过改变NF-κB和ERK激酶活性影响了CCL20的分泌,参与了DR4介导的细胞免疫调节.
- 王东生刘丹高静刘敏刘士廉刘彦信郑德先
- MiR-146a调节TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移及其分子机制被引量：3
- 2013年
- 目的研究miR-146a及其靶基因EGFR对乳腺癌细胞迁移的影响。方法用终浓度为50、100、200和500μg/L的重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)持续刺激对TRAIL敏感的MDA-MB-231细胞4周,筛选得到TRAIL不敏感的乳腺癌细胞MDA-MB-231/TR。RT-PCR检测miR-146a的表达;Transwell实验以及划痕实验检测乳腺癌细胞的迁移能力;双荧光素酶报告基因分析以及Western blot鉴定MDA-MB-231/TR细胞中miR-146a与EGFR基因的靶向调控关系;Western blot检测DR4、DR5、IRAK1、CXCR4、p-IκBα、IκBα、caspase 8和caspase 3的蛋白表达水平;染色质免疫共沉淀技术(ChIP)分析MDA-MB-231和MDA-MB-231/TR细胞中NF-κB P65亚基与miR-146a启动子区的结合情况。结果 TRAIL细胞毒作用不敏感的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231/TR中miR-146a的表达降低,并引起其靶基因EGFR的表达增加,最终导致TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移能力增强。同时发现NF-κB参与miR-146a低表达的调控。结论 miR-146a对TRAIL不敏感的乳腺癌细胞迁移起重要的调节作用。
- 刘丹姜明红刘敏高静刘彦信郑德先
- 关键词：TRAIL乳腺癌细胞MIR-146A迁移
- 764-3对Alzheimer’s病样大鼠的治疗作用被引量：11
- 2001年
- 向大鼠侧脑室内注射聚集态的β 淀粉样多肽 (Aβ 2 5 35 ) 15mmol后 ,动物在三种行为试验中都出现学习记忆障碍 ,同时海马和大脑皮层的胆碱乙酰转移酶 (ChAT)活性下降。这表明应用Aβ 2 5 35脑室内注射造成Alzheimer’s病动物模型的可行性。 76 4 3于手术后早期多次给药 (2mg/ 0 5mL 每天 1次i p )明显改善Aβ 2 5 35所致的学习记忆缺陷 ,并使海马的ChAT回升。本文又首次报告Aβ 2 5 35引起前脑多个脑区的一氧化氮合酶(NOS)表达上调 ,76 4 3拮抗此反应。结果提示 76 4 3的作用机制与其在脑内提高ChAT活性和抑制病理性的NOS表达有关。
- 张世仪陈艳左萍萍袁勃刘丹井艳玲刘燕
- 关键词：阿尔茨海默病丹参有效成分
- miR-23a对LPS诱导小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响被引量：9
- 2013年
- 目的探讨miR-23a对LPS诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响。方法 Real-time PCR定量分析LPS刺激不同时间的腹腔巨噬细胞中miR-23a的表达以及瞬时转染miR-23a mimics和inhibitors的腹腔巨噬细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α等促炎性细胞因子的表达;ELISA检测mRNA变化明显的细胞培养上清的IL-6的含量。结果原代腹腔巨噬细胞在LPS刺激后,miR-23a的表达明显下调;在转染miR-23a mimics后,IL-6的表达和分泌明显升高(P<0.05),但对IL-1β和TNF-α的表达没有明显影响。而转染miR-23a inhibitors后,则IL-6的表达水平受到抑制。结论 LPS刺激原代巨噬细胞可抑制miR-23a的表达;miR-23a可促进炎性细胞因子IL-6的表达,对IL-1β和TNF-α无显著影响。
- 刘敏姜明红高静刘丹刘彦信郑德先
- 关键词：巨噬细胞LPS促炎性细胞因子
