刘锐
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 伤寒沙门菌长链非编码RNA AS-RpoH分子鉴定被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨伤寒沙门菌非编码RNA AS-RpoH的分子特性,为进一步研究其调控功能和机制奠定基础。方法:在AS-RpoH表达高峰区设计特异性探针,运用RNA印迹检测AS-RpoH的表达;通过PCR寻找AS-RpoH可能的转录起始位点和终止位点;在yhhk编码区设计特异性探针,运用RNA印迹分析yhhk的转录产物。结果:RNA印迹结果显示,AS-RpoH在沙门菌中确实存在,长约3 000 nt;PCR结果表明,AS-RpoH的转录终止位点位于rpo H基因起始密码子上游191~238 nt之间;而其转录起始位点可能位于yhh K上游;RNA印迹分析结果表明yhh K基因的转录产物与AS-RpoH的长度一致。结论:长链非编码RNA AS-RpoH在伤寒沙门菌中存在表达,可能为yhh K的3'非翻译区。
- 李雪娇刘锐熊昌艳赵昕黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌非编码RNA分子鉴定
- 细菌素免疫蛋白调控伤寒沙门菌耐药和生物膜的形成被引量：2
- 2017年
- 目的:研究伤寒沙门菌SPI-8编码的两种细菌素免疫蛋白的功能。方法:用自杀质粒p GMB151介导的同源重组法,制备细菌素免疫蛋白基因缺陷变异株(△t3036,△t3038,△t3036△t3038);采用药敏纸片法检测细菌对8种抗菌药物的抵抗能力;结晶紫染色法观察细菌生物膜的形成。结果:通过PCR验证及序列比对,伤寒沙门菌细菌素免疫蛋白基因缺陷变异株制备成功;药敏实验结果显示,△t3038和△t3036△t3038变异株对氨苄西林、庆大霉素、多黏菌素B、环丙沙星、卡那霉素、亚胺培南等6种抗菌药物的抵抗能力明显变弱(P均<0.01),△t3036对8种抗菌药物的抵抗能力均无明显变化;生物膜形成实验结果显示,与野生株相比,△t3036生物膜形成能力增强(P<0.05),△t3038和△t3036△t3038生物膜形成能力明显减弱(P均<0.01),而△t3036△t3038生物膜形成能力较△t3038减弱。结论:伤寒沙门菌细菌素免疫蛋白T3036和T3038均能够促进细菌生物膜形成,T3038能够增强细菌对抗菌药物的抵御。
- 陈珉池刘锐颜冬梅赵昕黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌耐药生物膜
- 伤寒沙门菌非编码RNA AsfD的分子鉴定及表达特性
- 2018年
- 目的:对伤寒沙门菌flhDC基因对侧编码的疑似非编码RNA AsfD进行分子鉴定及表达特性分析。方法:在AsfD已知序列区设计特异性引物,体外转录制备RNA探针,通过RNA印迹检测伤寒沙门菌AsfD的表达;使用cDNA末端快速扩增(5'rapid amplification of cDNA ends,RACE)和RT-PCR分析AsfD的转录起始位点和终止区域;用qRT-PCR检测AsfD在伤寒沙门菌不同生长时相和环境应激下的表达特性。结果:RNA印迹结果表明,伤寒沙门菌中确实存在AsfD表达,长度在2 300 nt左右;5'RACE分析表明,AsfD转录起始点位于flhC基因终止密码子下游590 bp;RT-PCR结果表明其转录终止区域位于flhD基因起始密码子上游558～788 bp之间;序列分析显示AsfD全区域没有明显的ORF结构;qRT-PCR结果显示,AsfD在伤寒沙门菌生长的稳态期表达较高,酸、氧和高渗环境应激后均明显下降(P<0.01)。结论:AsfD为伤寒沙门菌一长链非编码RNA,在不同时相和应激条件下存在表达调节。
- 刘锐种晓丹赵昕陆仁飞孙嘉遥黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌非编码RNA环境应激
