郭思远
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 供职机构：首都医科大学中医药学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 雷公藤属植物叶片中萜类成分的差异性被引量：6
- 2018年
- 目的:测定雷公藤属植物叶片中5种萜类成分的含量并比较差异,研究3个物种间的化学亲缘关系。方法:采用HPLC法测定28批雷公藤属植物叶片中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷酚新内酯、雷酚内酯和雷公藤红素5个成分的含量,并进行方差分析和聚类分析。结果:雷公藤属植物叶片中,雷公藤甲素、雷酚内酯和雷公藤红素的含量差异有统计学意义(P<0.05);雷公藤内酯酮和雷酚新内酯含量差异无统计学意义(P>0.05)。运用系统聚类将28批雷公藤属植物聚为4类:第I类为东北雷公藤和昆明山海棠;第II类为雷公藤;第III类为雷公藤;第IV类为雷公藤和昆明山海棠。结论:雷公藤属植物叶片中部分萜类成分含量差异明显。东北雷公藤与雷公藤化学亲缘关系较远;昆明山海棠混在2者之间,与2者无明显区分。
- 郭思远马宝伟吴晓毅李佳高伟黄璐琦
- 关键词：雷公藤属萜类成分化学分类
- 芍药甘草滴丸的制备及其芍药苷、甘草苷和甘草酸的HPLC含量测定被引量：9
- 2019年
- 目的:制备芍药甘草滴丸(SGDP),测定其主要成分芍药苷、甘草苷、甘草酸的含量,以及其他与质量控制相关的指标,为有效控制其质量提供重要指标和参数。方法:采用水煎煮提取,乙醇沉淀、HP-20大孔树脂纯化后,选择合适的基质和冷却剂,制备SGDP;采用HPLC-DAD法测定SGDP中芍药苷(230 nm)、甘草苷(276 nm)、甘草酸(250 nm)的含量。并按照《中华人民共和国药典》2015版的方法对其外观、重量差异、溶散时限进行检查。结果:成功制备了SGDP,HPLC法可同时测定SGDP中芍药苷、甘草苷、甘草酸铵盐的含量,分别是(32. 66±0. 46) mg/g、(9. 23±0. 23) mg/g、(17. 48±0. 86)mg/g;平均回收率分别是111. 23%、96. 04%、104. 43%。外观、重量差异、溶散时限均符合药典要求。结论:SGDP的制备工艺合理可行。HPLC法灵敏、准确可靠,重复性好,可用于同时检测SGDP中芍药苷、甘草苷、甘草酸的含量,为其质量控制提供参考依据。
- 王敏龚慕辛刘正跃史赫男黄秋阳张芮乾郭思远贺蕊
- 关键词：芍药苷甘草酸甘草苷
- 东北雷公藤DXR HMGR基因克隆及生物信息学分析被引量：3
- 2019年
- 目的:克隆东北雷公藤萜类物质生物合成关键酶基因3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)基因和1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶(1-deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因全长,并对其进行生物信息学分析。方法:根据东北雷公藤转录组数据,设计特异性引物,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术克隆东北雷公藤DXR、HMGR基因编码区的全长序列,并进行一系列生物信息学分析。结果:成功克隆东北雷公藤DXR、HMGR基因各1条,分别命名为TrDXR和TrHMGR,两者分别长1410、1770 bp,编码469个和589个氨基酸。TrDXR为亲水性蛋白,亚细胞定位在叶绿体,无跨膜结构,转运肽定位于叶绿体,含有2个结合功能域和2个活性位点基序;TrHMGR为疏水性蛋白,亚细胞定位在内质网,有跨膜结构,无转运肽,含有4个结合功能域。TrDXR和TrHMGR与不同物种同源序列的相似性高,保守性强。结论:克隆获得TrDXR、TrHMGR基因cDNA全长,并对其生物功能进行了初步预测,为基因功能鉴定及东北雷公藤萜类物质分子形成机制研究奠定基础。
- 郭思远闫琦李佳
- 关键词：东北雷公藤基因克隆生物信息学分析
- 滇重楼糖基转移酶基因的克隆和原核表达被引量：3
- 2021年
- 目的:克隆滇重楼皂苷类成分生物合成途径中关键酶糖基转移酶基因(PpUGT1,PpUGT7),并对其进行生物信息学分析、相对表达量分析和原核表达。方法:试剂盒法提取滇重楼RNA并反转录,根据滇重楼转录组数据设计特异性引物,克隆基因全长,使用软件对其进行生物信息学分析,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测基因相对表达量,构建原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导表达目的蛋白。结果:PpUGT1和PpUGT7分别长1 827 bp和1 380 bp,分别编码608和459个氨基酸,相对分子质量分别为67.6 kDa和51.3 kDa,其中PpUGT1预测为甾体类糖基转移酶,PpUGT7预测为三萜类糖基转移酶。两蛋白均为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽,均与同类蛋白具有较高的保守性。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)结果显示,PpUGT1的表达量由高到低依次为根>叶>花>茎,PpUGT7的表达量由高到低依次为茎>叶>花>根。此外,成功在大肠埃希菌中以可溶形式表达目的蛋白。结论:克隆得到PpUGT1和PpUGT7基因,证明其在不同植物器官中存在差异表达,并在大肠埃希菌中成功表达其重组蛋白,为进一步鉴定PpUGTs功能、解析滇重楼中皂苷类成分生物合成途径奠定基础。
- 郭思远尹艳石颖慧李佳李佳高伟
- 关键词：滇重楼糖基转移酶基因克隆生物信息学分析原核表达
- 防晒霜组方优化及评价
- 2017年
- 目的 筛选和评价防晒霜优化配方.方法 采用正交试验设计,将一定量不同配方的防晒霜涂抹于贴有3M胶带的比色皿上,分别测定其在280～320 nm和320～400 nm之间各波长对应吸光度（A）的算术平均值,并通过比较A值大小,确定防晒效果以及影响防晒效果的主要因素,再将筛选出的优化配方用多点递增紫外辐照的方法进行人体防晒效果测试.结果 含有5种防晒剂的防晒霜处方1的长波紫外线（UVA）吸光度为1.02,中波紫外线（UVB）吸光度为3.62,防晒指数（SPF）为18左右,UVA防护指数等级PA为＋.防晒剂甲氧基肉桂酸辛酯（OMC）、天来施M、芦丁、珍珠粉、黄芩苷均具有防UVA的显著效果,OMC还具有防UVB的显著效果.结论 含5种防晒剂的处方1在UVA和UVB区均有较好的防晒效果.
- 王家典卢鋆崔淦徐俊达邢博宇郭思远龚慕辛
- 关键词：防晒霜正交试验防晒效果
- 雷公藤中一个合成香茅醇的单萜合酶基因的克隆与表征被引量：2
- 2019年
- 雷公藤是临床常用于治疗类风湿性关节炎的药用植物,又有抗肿瘤和肥胖症治疗等药理活性。雷公藤中的已知活性成分以萜类为主,但是含量都非常低,因此对雷公藤中萜类化合物生物合成途径的解析成为解决雷公藤资源问题的一大研究热点。而萜类合酶(TPS)是催化形成多种多样的萜类骨架的关键酶。该研究从雷公藤中克隆到一条ORF长度为1 785 bp的基因片段TwMES,利用NCBI的BLASTP,ProtParam,Interpro在线工具以及MEGA 6.0软件对序列进行了生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR检测了该基因对茉莉酸甲酯的响应,同时采用原核表达和体外酶促的方法对其体外催化功能进行了验证。生物信息学分析表明,该基因编码的氨基酸序列同时具有萜烯合酶N-末端结构域、萜环化酶样1 C-末端结构域,以及萜类合酶家族class I的DDxxD保守结构域。在与已知同源萜类合酶序列构建的邻接树中,TwMTS与TPS-b亚家族聚为一支。RT-PCR结果显示50μmol?L^-1 的MeJA 12 h能导致TwMTS的表达量上升到对照组的735倍,24 h达到1 644倍。此外,体外酶促反应结果显示TwMTS能催化GPP生成β-香茅醇,表明TwMTS是一个单萜合酶。以上研究结果为雷公藤萜类成分的生物合成学研究提供了新的元件,为未来生物合成研究奠定了基础。
- 尹艳尹艳郭思远李桂林李桂林高伟
- 关键词：雷公藤香茅醇
