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宽体金线蛭有效成分分子量分布和纯化工艺考察被引量：2: 2017年; 目的:采用不同方法对宽体金线蛭活性溶液进行不同分子量的含量测定和物质分离,获得最优条件。方法:采用不同分子通透性的透析膜对宽体金线蛭活性溶液进行分子量的含量测定。再分别采用大孔树脂、Q Sepharose FF、SP Sepharose FF对宽体金线蛭活性溶液进行纯化。通过考察不同纯化条件以达到分离有效物质的目的,并结合体外抗凝实验对最佳组分进行活性检测。结果:分别采用500 Da、1000 Da、3000 Da的透析膜对活性溶液进行分子量含量测定,得出<500 Da的物质占37.6%;500 Da^1000 Da的物质占到18.5%;1000 Da^3000 Da的物质占28.1%;>3000 Da物质占到15.7%。采用大孔树脂DA201-C处理得出50%乙醇洗脱液具有很好的活性。再采用Q Sepharose FF、SP Sepharose FF分别对宽体金线蛭活性溶液进行处理,采用不同洗脱剂进行洗脱然后进行活性验证得出1.0%Na Cl的p H值=8.5的Tris缓冲溶液洗脱组分活性比较强。结论:采用不同方法对宽体金线蛭活性溶液进行研究,获得较纯的活性组分,为后期的继续研究做好基础。; 王少平孟莹李亚男宋晓光李秉润于帅刘庆丰王升光于盈盈刘国飞高鹏代龙杨培民; 关键词：纯化分子量活性宽体金线蛭

水蛭活性肽的纯化工艺被引量：7: 2017年; 目的:对水蛭活性肽进行纯化,并对水蛭活性肽进行树脂纯化条件考察。方法:采用DA201-C大孔吸附树脂进行极性分离,后经D201阴离子交换树脂进行电荷分离,最终得到纯化的水蛭活性肽组分。结果:DA201-C大孔树脂,上样肽浓度20 mg·m L-1,流速1.0 BV·h-1,依次用25%乙醇、50%乙醇和75%乙醇溶液洗脱,各洗脱部位得率及活力较高,但总体活性成分被分散,以上各洗脱部位经D201离子交换树脂,pH 4.0,上样肽浓度30 mg·m L-1,流速3.0 BV·h-1,分别用2.5%氯化钠的25%乙醇、2.5%氯化钠的50%乙醇、2.5%氯化钠的75%乙醇溶液洗脱,2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱部位有明显的抗凝活性,经过分析性RP-HPLC验证后,基线平稳,各组分分离度良好。结论:经DA201-C大孔树脂和D201离子交换树脂纯化后的水蛭活性肽,2.5%氯化钠的25%乙醇和2.5%氯化钠的50%乙醇洗脱部位活力较高,分离度好。; 宋晓光李秉润王少平王升光于帅刘庆丰于海涛刘国飞张继娟高鹏代龙; 关键词：水蛭纯化大孔树脂 HPLC

银翘消疹合剂质量标准被引量：3: 2018年; 目的建立银翘消疹合剂的质量标准。方法采用薄层色谱法对银翘消疹合剂中金银花、连翘、牛蒡子进行薄层鉴别;采用高效液相色谱法测定银翘消疹合剂中黄芩苷的含量。结果薄层色谱中金银花、连翘、牛蒡子斑点清晰,专属性强;黄芩苷线性范围为0.122 5~1.531 2μg,r=0.999 9,平均加样回收率99.42%,RSD为2.19%。结论所采用的薄层色谱和高效液相色谱方法简便易行,专属性强,重复性好,可用于银翘消疹合剂的质量控制。; 宋晓光王少平李秉润王升光于海涛于帅刘庆丰李圆圆李婷刘晓美代龙高鹏

不同分子量土鳖虫活性小肽凝胶的透皮特性研究被引量：1: 2018年; [目的]研究不同分子量土鳖虫活性小肽凝胶的透皮特性,筛选土鳖虫活性小肽凝胶最佳组分。[方法]采用酶解法和超滤法得到不同分子量段土鳖虫活性小肽(P1:M<1KDa,P2:1KDa3KDa),并采用folin法对3种组分进行含量测定。以肽含量为指标采用改良Franz扩散池法对比3种土鳖虫活性小肽凝胶剂与水溶液的透皮吸收率,并对最佳土鳖虫活性小肽凝胶组分筛选不同部位鼠皮透皮率,不同促渗剂及浓度的促渗效果。[结果]不同分子量土鳖虫活性小肽的肽含量顺序为P2(70.84%)>P3(52.08%)>P1(40.13%),3种土鳖虫活性小肽凝胶剂透皮吸收率分别为P1:96.16%、P2:81.92%、P3:62.45%,水溶液组分的透皮吸收率为P1:62.92%、P2:52.28%、P3:38.26%,P1凝胶剂的透皮吸收率最佳。P1凝胶剂组分腹部皮肤透皮率为96.19%,大于背部皮肤透皮率54.03%。3种促渗剂对P1凝胶组分的促渗作用为氮酮>PEG400>油酸,氮酮的促渗效果优于其他促渗剂。不同浓度氮酮促渗剂促渗效果差异不大,1%浓度即可满足实验要求。[结论]土鳖虫3种活性小肽组分中,P1凝胶透皮渗透率更高,优选的P1凝胶组成合理。; 刘庆丰于帅孙甜甜李敏丛竹凤高鹏代龙; 关键词：透皮吸收凝胶剂

桃红四物汤药效物质基础与质量控制方法研究进展被引量：5: 2019年; 桃红四物汤由桃仁、地黄、红花、川芎、当归、白芍6味药材组成。该文综述了近年来桃红四物汤相关的文献报道,以方剂药效物质基础和质量控制方法为切入点进行了总结,以期为桃红四物汤及其相关方剂的药效物质基础研究和质量标准研究提供参考和依据。; 赵赞赞刘庆丰李亚男林倩张康华姜珊高鹏; 关键词：桃红四物汤药效物质基础

土鳖虫酶解液不同脱盐方式研究被引量：2: 2017年; 目的:采用不同方式对土鳖虫酶解液进行脱盐操作,优选最佳脱盐方式和工艺。方法:以脱盐率、肽损失量、固体物质保留量为指标,分别采用大孔树脂方法、阴阳离子混合树脂方法、纳滤方法、电渗析方法对土鳖虫酶解液进行脱盐实验,并对最佳方式进行工艺优化,得到最优脱盐工艺。结果:采用大孔树脂、阴阳离子混合树脂、纳滤、电渗析4种方法对土鳖虫酶解液进行脱盐处理,得出4种方法的脱盐率分别为95.19%、60.97%、90.01%、94.43%。其中4种方法造成的肽损失率和固体物质保留率分别为32.12%、20.91%、40.55%、10.12%;50.43%、80.45%、52.76%、81.23%。说明电渗析脱盐方式较其他脱盐方式对于土鳖虫酶解液的损失小。同时脱盐率可以达到90%以上,同时考察酶解液的p H、固体浓度、脱盐时间对脱盐率的影响进行了考察,得出采用p H=6.5、生药浓度为500 mg/m L、脱盐时间在150 min时脱盐率可以达到90%以上。并采用方法学对电渗析脱盐工艺进行验证,得出方法可行、准确。结论:采用电渗析方法对土鳖虫酶解液进行脱盐,试验方法可行、准确、脱盐率高。; 王少平孟莹宋晓光李秉润李敏于盈盈王升光于帅刘庆丰高鹏刘国飞王广录代龙杨培民; 关键词：脱盐电渗析

不同阿胶酶解液相对分子量分布及补血升白作用对比研究被引量：9: 2017年; 目的:制备阿胶及其酶解液,对比阿胶酶解前后相对分子量分布及补血、升白的作用。方法:采用TSKge L G2000SWXL(7.8 mm×300 mm,平均孔径512?),流动相为0.1 mo L/L Na CL+0.05%Na N3+0.1mo L/L磷酸缓冲液(p H=6.7),流速0.5 mo L/min,检测波长280 nm,对阿胶原液、阿胶猪胰脏粗酶酶解液、阿胶猪胰脏匀浆酶解液,匀浆空白液进行相对分子量分布测定;采用放血法致小鼠血虚模型及药物环磷酰胺所致小鼠白细胞减少模型,考察阿胶及其酶解液补血升白作用。结果:阿胶原液的蛋白质及多肽的相对分子质量主要区间为168 Da^1.7×105 Da,阿胶酶解液的相对分子量在3×103 Da^3×104 Da的区间内显著增多;阿胶酶解液可使失血所致血虚小鼠模型Hb、RBC水平显著提高,环磷酰胺所致小鼠白细胞减少模型的WBC、RBC、Hb水平显著提高。结论:阿胶酶解后相对分子质量减小,且酶解后补血升白效果更优;猪胰脏粗酶及匀浆物与胰蛋白酶的酶解效力相当。; 李敏庞萌萌田晨颖刘庆丰于帅王少平刘国飞刘玉军高鹏代龙; 关键词：阿胶酶解分子量

猪皮酶解液分子量分布与除盐工艺考察被引量：2: 2019年; 目的:考察猪皮酶解液的分子量分布和除盐工艺,以筛选出最佳除盐方案。方法:以不同分子量物质的含量和除盐效果为指标,采用膜处理和电渗析除盐的方法对猪皮酶解液进行分子量分布测定和除盐工艺的考察。结果:通过对不同分子量物质的重量测定,得出猪皮肽在>3000 Da、1000～3000 Da和<1000 Da分子量下所占比例分别为21.36%、56.19%、4.72%,1000～3000 Da比例最高;通过电导率的变化、除盐率和肽回收率的考察,得出猪皮酶解液在电压31 V、流速15 L·h^(-1)、除盐时间2 h、药液浓度200 mg·mL^(-1)的条件下,效果最好,平均除盐率为93.58%,且肽回收率高达82.28%。结论:猪皮肽的分子量主要集中在1000～3000 Da,其除盐工艺合理可行,对后期实验进行和产品开发奠定了一定的实验基础。; 于帅刘庆丰李秉润董丹华吴明泽胡祥昊宋晓光林倩高鹏代龙; 关键词：猪皮分子量除盐

雄土鳖虫活性物质分离工艺考察被引量：3: 2017年; 目的:采用不同方法对雄土鳖虫虫活性物质进行分离,得到活性组分。方法:比较Sephadex G15、Sephadex G25对样品的分离情况,需用最佳的物质对雄土鳖虫虫活性物质进行分离,然后再采用高效液相仪对分离后的组分进行鉴别,同时采用半制备液相柱对物质进行分离,获得活性单体。并对活性单体进行体外溶栓和抗凝验证。结果:实验得出Sephadex G25对雄土鳖虫虫活性物质分离效果比较好。而后采用高效液相仪对分离后的活性组分进行分析,图谱出现五个含量较大的组分。并采用半制备液相柱进行分别收集后,验证得到第二个组分和第三个组分活性较强。结论:采用不同方法对雄土鳖虫虫活性物质进行系统分离后,得到纯度较高的活性组分,为后期研发和应用奠定基础。; 王少平宋晓光李秉润孟莹刘晓美于帅刘庆丰王升光于盈盈刘国飞高鹏王广录代龙杨培民; 关键词：活性测定

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刘庆丰

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