李清华
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 肝癌细胞Huh7与SMMC-7721抗ROS能力对比与机制初步研究
- 2017年
- 目的:比较Huh7、SMMC-7721细胞系抵抗外源性活性氧类(reactive oxygen species,ROS)物质能力的不同,并初步探究肝癌细胞抗ROS的机制。方法:不同浓度的H_2O_2处理Huh7和SMMC-7721细胞后,比较两者凋亡、坏死的差异,检测细胞内ROS、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)含量及细胞活性、肿瘤干性分子、ROS清除酶基因和DNA修复酶基因的表达变化。结果:同浓度H_2O_2处理后,SMMC-7721细胞凋亡和坏死数目多于Huh7细胞,其细胞活性明显低于Huh7细胞,在1μmol/m L H_2O_2浓度组,计数1 500个细胞内SMMC-7721与Huh7细胞凋亡与坏死数目分别为(841.7±78.7)个、(169.7±76.1)个(t=10.638,P=0.000);SMMC-7721与Huh7细胞活性分别为(0.21±0.02)、(0.74±0.14)(t=6.478,P=0.022)。肝癌细胞内ROS的水平随H_2O_2浓度增加呈升高趋势,但Huh7细胞内明显低于SMMC-7721细胞,在1μmol/m L H_2O_2浓度组,SMMC-7721与Huh7细胞细胞内ROS水平分别为(128 793±1 158)、(103 455±1 665)(t=21.639,P=0.000);Huh7细胞比SMMC-7721细胞有更高含量的GSH、SOD,并且在H_2O_2处理后GSH、SOD下降趋势缓于SMMC-7721细胞,在1μmol/m L H_2O_2浓度组,SMMC-7721与Huh7细胞内GSH含量分别为(32.85±4.47)mg/g prot、(106.60±6.83)mg/g prot(t=15.655,P=0.000),SMMC-7721与Huh7细胞内SOD含量分别为(19.22±2.93)U/mg prot、(23.57±4.85)U/mg prot(t=1.332,P=0.254);整体上肝癌细胞内GSH、SOD的变化早于细胞内ROS和细胞活性的变化;Western blot提示Huh7细胞比SMMC-7721细胞高表达肿瘤干性分子CD133、Bmi-1、ROS清除酶基因SOD2和DNA修复基因Rad51。结论:Huh7比SMMC-7721有更强的抗ROS能力,相对高表达CD133、Bmi-1、SOD2及Rad51,这些分子可能参与了肝癌细胞抗ROS的过程,且可能通过细胞内GSH、SOD直接发挥作用。
- 李高峰徐伟李培培李清华吴东
- 关键词：肝癌DNA修复基因
