吴东
- 作品数：50 被引量：200H指数：6
- 供职机构：第二军医大学东方肝胆外科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市市级医院新兴前沿技术联合攻关项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝脏肿瘤和移植病理学诊断体系的创新与应用
- 丛文铭卫立辛苏长青董辉金光植殷正丰俞花叶菲孙斌赵骞吴东高璐陆新元冼志红顾怡瑾
- 中国肝胆肿瘤发病率和手术切除率位居世界前列，但肝胆肿瘤病理学自20世纪80年代起步之时学科十分薄弱，分子病理诊断长期处于空白状态；中国临床肝移植发展很快，但直至21世纪初期仍极少施行肝穿刺病理诊断，肝移植病理学科长期处于...
- 关键词：
- 关键词：肝脏肿瘤肝脏移植病理诊断个体化治疗
- 肝脏手术治疗风险无创评估模型的建立方法
- 一种肝脏手术治疗风险无创评估模型的建立方法，包括：(1)手术前临床资料的采集。(2)手术中门静脉压力的测定。(3)门静脉压力预测方程的建立。肝脏手术治疗风险无创评估模型的建立：门静脉压力小于12cmH<Sub>2</Su...
- 吴东陈绪涛翟健张一军沈峰吴孟超
- 文献传递
- 肝癌细胞Huh7与SMMC-7721抗ROS能力对比与机制初步研究
- 2017年
- 目的:比较Huh7、SMMC-7721细胞系抵抗外源性活性氧类(reactive oxygen species,ROS)物质能力的不同,并初步探究肝癌细胞抗ROS的机制。方法:不同浓度的H_2O_2处理Huh7和SMMC-7721细胞后,比较两者凋亡、坏死的差异,检测细胞内ROS、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)含量及细胞活性、肿瘤干性分子、ROS清除酶基因和DNA修复酶基因的表达变化。结果:同浓度H_2O_2处理后,SMMC-7721细胞凋亡和坏死数目多于Huh7细胞,其细胞活性明显低于Huh7细胞,在1μmol/m L H_2O_2浓度组,计数1 500个细胞内SMMC-7721与Huh7细胞凋亡与坏死数目分别为(841.7±78.7)个、(169.7±76.1)个(t=10.638,P=0.000);SMMC-7721与Huh7细胞活性分别为(0.21±0.02)、(0.74±0.14)(t=6.478,P=0.022)。肝癌细胞内ROS的水平随H_2O_2浓度增加呈升高趋势,但Huh7细胞内明显低于SMMC-7721细胞,在1μmol/m L H_2O_2浓度组,SMMC-7721与Huh7细胞细胞内ROS水平分别为(128 793±1 158)、(103 455±1 665)(t=21.639,P=0.000);Huh7细胞比SMMC-7721细胞有更高含量的GSH、SOD,并且在H_2O_2处理后GSH、SOD下降趋势缓于SMMC-7721细胞,在1μmol/m L H_2O_2浓度组,SMMC-7721与Huh7细胞内GSH含量分别为(32.85±4.47)mg/g prot、(106.60±6.83)mg/g prot(t=15.655,P=0.000),SMMC-7721与Huh7细胞内SOD含量分别为(19.22±2.93)U/mg prot、(23.57±4.85)U/mg prot(t=1.332,P=0.254);整体上肝癌细胞内GSH、SOD的变化早于细胞内ROS和细胞活性的变化;Western blot提示Huh7细胞比SMMC-7721细胞高表达肿瘤干性分子CD133、Bmi-1、ROS清除酶基因SOD2和DNA修复基因Rad51。结论:Huh7比SMMC-7721有更强的抗ROS能力,相对高表达CD133、Bmi-1、SOD2及Rad51,这些分子可能参与了肝癌细胞抗ROS的过程,且可能通过细胞内GSH、SOD直接发挥作用。
- 李高峰徐伟李培培李清华吴东
- 关键词：肝癌DNA修复基因
- LIGHT:一个新的TNF超家族成员
- 2002年
- 肿瘤坏死因子超家族成员可诱导多种生物学效应 ,包括细胞的生长、分化以及死亡。其家族成员在炎症反应的调节、对感染的免疫反应以及组织的自稳态中都起到了重要的作用。近年来发现了不少新的TNF超家族成员 ,LIGHT是其中具有特殊作用的成员之一 ,它在诱导一些肿瘤细胞凋亡的同时 ,对T细胞的活化也具有特殊的作用 ,可通过树突状细胞 (DC)而诱导抗原特异性的CTL反应 ,有望用于肿瘤临床的免疫治疗。
- 吴东
- 关键词：LIGHT肿瘤坏死因子生物学功能肿瘤树突状细胞
- 人THANK基因转染人肝癌细胞及生物学特性
- 2005年
- [目的]将人THANK基因转染入人肝癌细胞SMMU-7721中稳定表达,检测转染后细胞的生物学特性变化。[方法]将由pMD18-T-THANK质粒上获得的THANK全长cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3.1中;用脂质体法将pcDNA3-THANK导入人肝癌细胞株SMMU-7721中,G418筛选克隆,再以RT-PCR及Westernblot检测THANK的表达,流式细胞仪及细胞毒杀伤实验分析转染后细胞的生物学特性变化。[结果]THANK在7721细胞中的表达可抑制7721细胞的生长,使肿瘤细胞的生长停滞于S期,且可在体外诱导强烈的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应,人外周血单个核细胞(PBMC)对THANK-7721细胞的杀伤活性明显增强。THANK的转染与IFN-γ协同可增强7721细胞的凋亡比例。[结论]THANK基因的转染改变了7721细胞的生物特性,在体外诱导PBMC的CTL反应,有可能用于肝癌的免疫治疗。
- 吴东沈锋吴孟超
- 关键词：THANK多聚酶链反应逆转录流式细胞术
- 重组THANK诱导表达和变性、复性及纯化被引量：1
- 2001年
- 目的 :获得较纯的具有生物学活性的 THANK蛋白。方法 :THANK基因在大肠杆菌中高效表达 ,菌体超声破碎后 ,以洗涤剂反复洗涤包涵体。包涵体经 8mol/L尿素变性溶解后 ,再用 Sephacryl S- 2 0 0凝胶过滤层析初步纯化 ,对重组蛋白浓度、氧化还原剂等复性参数进行优化和选择 ,将蛋白稀释复性。复性后组分经 Q Sapharose Fast Flow离子交换层析再次纯化 ,最后以 Sep hadex G- 2 5脱盐。 结果 :得到了纯度 >97%、具有一定生物学活性的 THANK蛋白。 结论 :THANK蛋白变性、复性及纯化方法的建立 ,为
- 吴东沈锋娄永华彭敏焦炳华吴孟超
- 关键词：THANK重组蛋白质类基因调控免疫调节肿瘤细胞
- 腺病毒介导的THANK基因在SMMC-7721细胞中的表达
- 2005年
- 目的:构建THANK腺病毒载体,观察腺病毒感染后THANK在SMMC-7721细胞中的表达情况。方法:把THANK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrackCMV中,与腺病毒骨架质粒pAdEasy1共转染大肠杆菌BJ5183,获得腺病毒重组质粒,再将获取的腺病毒重组质粒转染入293细胞进行包装,获取THANK重组腺病毒,以不同感染复数(MOI)腺病毒感染SMMC-7721细胞,观察腺病毒对SMMC7721细胞的感染情况。结果:成功地构建了THANK腺病毒,该腺病毒可高效介导THANK在SMMC-7721细胞中表达,基因转染后第5天,THANK表达高于35ng/ml,且随时间延长增加。结论:腺病毒可诱导THANK基因在SMMC-7721细胞中高表达。
- 吴东沈锋吴孟超
- 关键词：THANK基因表达肝肿瘤腺病毒
- 肥胖对肝癌患者肝切除术预后的影响被引量：5
- 2013年
- 目的研究分析肥胖对肝癌患者肝切除术预后的影响。方法前瞻性分析1996年2月至2002年12月之间我院470例行肝切除术的肝细胞癌患者临床资料。根据体质量指数(BMI),将患者分为非肥胖组和肥胖组,肥胖组105例,其中男94例,女11例,平均年龄53岁,伴有肝硬化76例;非肥胖组365例,其中男311例,女54例,平均年龄50岁,伴有肝硬化263例。对比分析两组肝癌术后的结局。结果与非肥胖组比较,肥胖组的年龄、术中输血、术中失血量均存在统计学差异(P<0.05)。单因素分析显示,肥胖组的总生存率及无瘤生存率明显比非肥胖组要低(P<0.05)。COX多因素分析,影响生存的因素包括肿瘤大小、包膜、术中失血量及MVI、BMI分级;影响肝癌复发的因素包括肿瘤大小、乙肝感染、肝硬化、包膜、术中失血量、术中输血及BMI分级。结论肥胖是影响肝癌患者肝切除术预后的独立危险因素。
- 王嘉译周成吴越张旭光翟健屈淑平吴东
- 关键词：肝细胞肝癌肥胖预后
- 腹腔镜与开腹行胃癌根治术比较的Meta分析被引量：13
- 2016年
- 目的系统评价腹腔镜辅助胃癌根治术(LDG)与传统开腹胃癌根治术(ODG)治疗胃癌的临床效果。方法计算机检索PubMed、Medline、Embase、Cochrane Library等数据库,同时根据以上检索所得文献的参考文献进行扩大检索。采用Cochrane协作网提供的RevMan5.3.4统计软件进行Meta分析。结果共纳入10项符合标准的研究,共计3239例患者。结果显示:LDG与ODG相比,在手术时间、术中出血、通气时间以及术后住院时间方面差异有显著性,而在淋巴结清扫以及术后并发症方面差异无显著性。结论通过本次Meta分析发现,LDG与ODG在治疗胃癌方面的安全性及有效性一致,并具有一定的自身优势。
- 王杰吴东
- 关键词：腹腔镜胃癌胃癌根治术META分析
- LIGHT基因的克隆及其可溶性表达被引量：1
- 2002年
- 目的 克隆LIGHT基因 ,构建含有人LIGHT基因的表达载体 ,诱导其在大肠杆菌中可溶性表达 ,并对表达的LIGHT蛋白的生物学活性进行检测。方法 从人的外周血单个核细胞中克隆LIGHT全长cDNA及其胞外区片段 ,并将其胞外区片段亚克隆至原核表达载体pET 11a中 ,筛选阳性重组质粒pET LIGHT ,以IPTG诱导其可溶性表达 ,并以SDS PAGE和Westernblot检测进行分析。表达的蛋白初步纯化后 ,进行生物学活性分析。结果 RT PCR扩增出了LIGHT全长 72 3bp的cDNA。SDS PAGE和Westernblot分析证实重组pET LIGHT质粒可表达出相对分子质量 (Mr)为 19× 10 3的蛋白。可溶性LIGHT重组蛋白可共刺激T细胞的增殖及诱导IFN γ的产生。结论 本实验成功地将LIGHT胞外区片段在大肠杆菌中进行表达 ,表达的蛋白具有生物学功能 。
- 吴东沈锋娄永华焦炳华吴孟超
- 关键词：基因克隆基因表达生物学
