李旭勇
- 作品数：22 被引量：91H指数：5
- 供职机构：聊城大学农学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学医药卫生生物学更多>>
- 3株H9N2亚型禽流感病毒基因组分子特征及遗传进化分析被引量：2
- 2021年
- 为了解山东省活禽市场上分离的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的分子特征及遗传进化规律,试验选取本实验室分离鉴定的3株H9N2 AIV进行遗传进化分析,并对数据库中历年分离的H9N2毒株血凝素(HA)的关键氨基酸位点残基组成、变异趋势,以及分离株与疫苗株HA、NA基因的核苷酸差异性进行统计分析。结果显示:3株分离株的基因同源性依次为PB2 96.4%~96.8%、PB1 94.8%~97.6%、PA 96.3%~96.9%、HA 95.6%~98.0%、NP 97.3%~98.7%、NA 97.3%~97.6%、M 94.2%~97.8%、NS 97.4%~98.3%。PB1、NP、PA基因属于F98分支,M基因属于G1分支,PB2、NS基因与早年分离的代表性流感病毒毒株的遗传进化关系比较远,形成单独的Unknown Avian分支。H9N2 AIV的HA蛋白第183位(对应H3亚型位置)由早年的H逐渐向N转化,第190位点主要比例由A向T转化,第226位氨基酸由早年的Q突变为L。本试验说明H9N2 AIV不断变异,与疫苗株的差异性逐渐增大,需对其关键位点变异及跨种间传播进行持续监测。
- 高鑫鑫王艳文郭晶赵聪慧王文婷刘文强李旭勇
- 关键词：H9N2亚型遗传进化
- 虚拟仿真实验在动物生物化学实验教学中的应用被引量：13
- 2017年
- 虚拟仿真实验是建立在虚拟仿真技术之上,模拟现实实验环境的多学科相结合的综合性集成技术。将虚拟仿真实验引入动物生物化学实验教学后降低了实验成本,拓展了实验内容,有效解决了教学需求和实验资源不足之间的矛盾。通过对2届受试学生成绩统计分析,证明虚拟仿真实验教学模式的引入提高了教学质量,培养了学生发现问题、分析问题和解决问题的能力。
- 郭晶李旭勇刘文强
- 关键词：虚拟仿真实验教学
- 人源和禽源H7N9亚型禽流感病毒遗传进化分析及对小鼠的毒力评估
- 2020年
- 新型禽源A型H7N9禽流感病毒一直威胁着人类健康,对病毒的遗传进化和生物学特性进行持续研究对于H7N9禽流感的防控十分重要。为了解导致禽类和人类感染的H7N9病毒的进化、突变及其生物学特性,2014年和2015年从中国江苏分离出1株禽源和2株人源H7N9病毒,分别对这3株病毒的进化进行了评估。序列分析显示,HA基因在核苷酸水平上有98.7%至99.5%的同源性,并聚集成两个系统发育群。3株病毒的6个内部基因在核苷酸水平上具有96.8%至99.6%的同源性。在2株人源分离株的PB2中有E627K氨基酸位点突变,且在血凝素(HA)切割位点无连续碱性氨基酸插入。动物试验表明,人源分离株SZ19在小鼠中的毒力比禽源分离株CK/SZ141高,接种了SZ19病毒的小鼠体重下降了18%。此外,在观察期间2株试验病毒均未致死小鼠。病理学研究结果显示,与禽源病毒相比,人源H7N9病毒更容易感染小鼠的上呼吸道和下呼吸道。试验结果提示对禽类和人类进行H7N9禽流感系统监测的重要性以及在哺乳动物模型中对H7N9病毒的复制和致病性进行系统评估的必要性。
- 郭晶郭晶夏瑜张晓璇高鑫鑫刘成刘成
- 关键词：毒力小鼠
- 1998-2021年我国人感染H9N2亚型禽流感病毒的遗传演化规律被引量：4
- 2022年
- 【目的】通过分析1998—2021年间我国人感染H9N2亚型禽流感病例的发病时间、所在省份、年龄和性别等信息,明确H9N2亚型禽流感病毒的流行病学特征;通过分析人源H9N2亚型禽流感病毒的基因特征,阐明人源H9N2亚型禽流感病毒的遗传演化规律;为H9N2亚型禽流感病毒跨种间传播的预警和防控提供数据支撑。【方法】基于流感基因数据库、病例报道和文献资料,获得1998—2021年我国人感染H9N2亚型禽流感病毒的病例信息和毒株序列数据。从时间、空间、性别和年龄的分布对感染病例进行分析,明确人源H9N2亚型禽流感病毒感染的流行病学特征。通过DNASTAR中的MegAlign软件对人源H9N2病毒的各基因片段的核苷酸序列进行同源性分析,利用MEGA7.0软件构建系统进化树和分析病毒蛋白关键位点,揭示遗传演化趋势和病毒蛋白关键氨基酸位点的变异情况。通过GISAID网站下载2019—2021年间我国H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸序列,利用mafft比对后在MEGA7.0中查看人源与禽源H9N2病毒关键氨基酸位点的突变差异,揭示当前人源和禽源H9N2病毒可能引起的风险。【结果】1998—2021年我国人感染H9N2亚型禽流感病毒病例共71例,从空间分布分析,病例分布于16个省市,其中91.55%的病例来自于南方12个省市;从时间分布分析,2013年以后,我国报道的感染病例呈增长趋势,2013—2021年累计感染病例数占总病例数的61.97%;从性别和年龄分布分析,男、女性别比为1:1.68,感染病例主要见于幼儿和少儿,占总病例的74.14%。对人源H9N2病毒进行基因组比对分析,发现这些病毒均属于欧亚分支,但是这些病毒各基因片段的核苷酸序列同源性差异较大,HA、NA、PB2、PB1、PA、NP、M和NS的同源性分别为75.3%—100%、80.1%—100%、78.7%—100%、82.5%—100%、72.6%—100%、74.1%—100%、65.5%—100%、82.0%—100%;22株具有完整基因片段的病毒分为8个基因�
- 王艳文王梦静张虹高鑫鑫郭晶李旭勇
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型流行病学遗传进化
- 宿主蛋白ANP32A对流感病毒功能影响的研究进展被引量：1
- 2021年
- 流感病毒是一类危害人和动物健康的RNA病毒,其在宿主细胞内的有效复制离不开宿主蛋白酸性核磷蛋白32家族成员A(ANP32A)和病毒RNA聚合酶的协助和支持。病毒RNA聚合酶由3种蛋白PB1、PB2和PA组成,且ANP32A与病毒RNA聚合酶的最强相互作用需要这3种蛋白的共同参与。ANP32A是酸性富含亮氨酸的核磷蛋白32(ANP32)家族成员,其被确认为支持细胞核中病毒RNA聚合酶活性的关键宿主因子,对流感病毒的复制具有重要的作用。ANP32A的物种特异性差异决定了病毒RNA聚合酶的宿主范围:独特的33个氨基酸序列存在于禽类ANP32A(avANP32A),而在哺乳动物ANP32A中缺乏此氨基酸序列。avANP32A中特有的33个氨基酸序列能增强ANP32A的功能,从而增加禽源特征流感病毒聚合酶活性。禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)不能有效利用较短的ANP32A(即缺乏独特33个氨基酸序列的ANP32A),因而哺乳动物ANP32A无法支持禽源特征聚合酶活性,然而在人ANP32A(huANP32A)中插入这33个氨基酸能促进其对AIV聚合酶的支持作用。此外,流感病毒的适应性突变也能增强AIV在哺乳动物中的传播力和致病性。AIV适应哺乳动物时往往会发生E627K突变,以增强其在哺乳动物中的复制能力。作者主要介绍了宿主蛋白ANP32A对流感病毒复制、转录的影响和流感病毒发生适应性突变的作用机制,简要论述了ANP32A与聚合酶的相互作用对流感病毒跨物种感染的分子机制。
- 张晓璇郭晶李旭勇
- 关键词：流感病毒
- 马立克病肿瘤组织内HSP60表达及生物学作用初步研究
- 2019年
- 本试验旨在研究HSP60与马立克病肿瘤发生、发展之间的相关性。通过人工感染,建立鸡马立克病肿瘤模型,定期剖杀,利用病理组织学和免疫组织化学方法,检测HSP60与肿瘤细胞定位之间的相关性;设计HSP60 RNA干扰序列,构建重组慢病毒,转染MSB-1细胞,利用流式细胞技术,探索降低HSP60转录表达对MSB-1细胞凋亡水平的影响。结果显示:HSP60在肿瘤细胞的细胞质内强表达;成功构建了HSP60 RNA干扰慢病毒,且5147序列干扰效果最佳;5147序列慢病毒转染48 h时,与对照序列组和空白对照组相比,HSP60转录、表达水平极显著降低(P<0.01),MSB-1细胞凋亡水平极显著升高(P<0.01)。在马立克病肿瘤发生、发展过程中,HSP60组织细胞定位与肿瘤细胞具有明显的相关性,降低HSP60表达水平能够导致MSB-1细胞凋亡升高,说明HSP60对肿瘤细胞的存活具有重要的生物学作用。
- 王俊丽李玉保段世豪路建彪丁飞司振书李旭勇贾克金张云飞
- 关键词：RNA干扰免疫组织化学热休克蛋白60
- 鸡马立克病肝组织肿瘤病变与热休克蛋白转录、表达的相关性研究被引量：1
- 2019年
- 研究马立克病毒引发肿瘤的发生、发展过程中,热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)转录表达水平、组织细胞内定位与肝病理组织学损伤之间的相关性,为进一步阐述HSPs的生物学作用奠定基础。通过人工感染建立鸡MD肿瘤模型,定期剖杀试验鸡,采集肝组织,利用组织学、免疫组织化学、荧光定量RT-PCR及ELISA方法,检测肝病理组织学损伤、HSPs组织细胞内定位以及HSPs转录、表达水平的动态变化。结果:在MDV感染14d后,感染组鸡肝组织可见大小不等的淋巴样瘤细胞浸润和局灶性生长;HSP90、HSP60在淋巴瘤细胞的细胞质内强表达,而HSP27、HSP70主要分布于肿瘤细胞外的肝细胞的细胞质内;感染组HSP70和HSP90mRNA转录水平始终极显著高于空白对照组和疫苗免疫对照组;感染组HSP90的表达量始终极显著高于空白对照组,HSP70表达量在14和21日龄时,极显著高于空白对照组,在28和35日龄时显著高于空白对照组,42日龄后与空白对照组和疫苗免疫对照组相比差异不显著。在MDV引发鸡肿瘤发生、发展过程中,HSP60、HSP90与HSP70、HSP27之间在肝组织细胞内定位截然不同,且HSP70与HSP90在肝组织内表达量变化趋势差异明显,说明不同HSPs在MD肿瘤发生、发展过程中的生物学作用存在差异。
- 段世豪路建彪李旭勇刘成张树金殷国政司振书李玉保
- 关键词：鸡马立克病热休克蛋白荧光定量RT-PCR
- H6亚型禽流感病毒研究进展被引量：2
- 2020年
- 禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)是一种单股负链RNA病毒,可对禽类和哺乳动物造成严重的呼吸系统疾病。H6 AIV属于低致病性禽流感病毒(LPAIV),在野鸟和家禽中广泛存在。研究表明,H6 AIV的基因片段中出现氨基酸残基突变时,使其具有跨越种属障碍而感染哺乳动物的潜在风险,对人类的生命安全及家禽产业经济发展造成威胁。因此,加强对H6 AIV的监控对畜牧业生产和公共卫生安全至关重要。论文从H6 AIV遗传进化特征、H6 AIV在家禽和野鸟中感染情况、受体结合特征对H6 AIV跨物种传播的影响、H6 AIV对哺乳动物的致病力及对公共卫生安全造成的威胁等方面进行了论述。
- 张龙凤郭晶杨佳欣李旭勇
- 关键词：低致病性禽流感病毒哺乳动物
- 犬流感病毒的研究进展被引量：2
- 2022年
- 犬流感(CI)是由犬流感病毒(CIV)引起的以呼吸道症状为主的犬类传染性疾病。2004年,在犬体内发现马源犬流感病毒后,人源、猪源、禽源等多种不同动物来源的犬流感病毒相继出现。这些病毒在犬体内复制、重配,甚至通过犬传播至其他宿主,对其他动物造成威胁。文章以犬流感的进化过程为基础,分析流感病毒在宿主改变过程中发生的对犬的适应性变化,以及不同犬流感的重点防治方向。
- 张新宇郭晶李旭勇
- 关键词：基因进化疫苗
- H7N9流感病毒人源分离株与禽源分离株复制特性研究被引量：1
- 2018年
- 为了解H7N9流感病毒的生物学特性,本研究对H7N9流感病毒人源分离株(AH1)和禽源分离株(CK53)复制特性进行了系统比较研究。序列分析显示,AH1和CK53病毒在进化关系上同源性较高,仅有8个氨基酸位点差异。两株病毒分别接种禽类细胞DF1和CEF,人类细胞A549和Calu-3,检测其复制能力,结果显示在33℃和37℃两种温度条件下,两种病毒在禽类细胞中复制能力相似,但在人类细胞中AH1复制能力强于CK53。CK53在哺乳动物细胞连续培养5代后出现包含PB2/E^(627)K在内共5个氨基酸位点的突变,显示禽源分离株在哺乳动物细胞复制过程中可以迅速获得适应性突变。突变病毒CK53-P5在A549细胞中复制水平明显强于CK53,其复制能力与AH1差异不明显。本研究进一步揭示了H7N9流感病毒人源分离株与禽源分离株的生物学特性差异,为深入了解其致病分子机制提供了实验依据。
- 郭晶李媛媛裴兰英邓国华施建忠陈化兰李旭勇
- 关键词：流感病毒细胞
