游凤
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：西南大学更多>>
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- 禽网状内皮组织增生病毒gp90蛋白的原核表达与纯化
- 2017年
- 为了研究禽网状内皮组织增生病毒(REV)gp90蛋白的生物学功能和免疫学功能,合成了gp90蛋白基因,将该基因克隆至原核表达载体p ET-22b(+)上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导剂诱导目的蛋白表达,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting鉴定了蛋白表达情况和蛋白表达形式。使用小规模蛋白纯化系统将表达的蛋白进行了纯化。结果表明:将gp90蛋白基因连接表达载体转化宿主菌后,成功在大肠杆菌上以包涵体形式表达,纯化的蛋白纯度超过90%。
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- 关键词：原核表达包涵体蛋白纯化
- 鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：8
- 2018年
- 分离鉴定某蛋鸡养殖场病鸡的病原并对病原的部分重要生物学特性进行研究.通过病理剖检、细菌和菌落形态观察、分子生物学鉴定、生化试验和动物回归试验,确定从8只病鸡分离的21株病原菌为大肠杆菌.对30种抗菌药物的药物敏感性试验分析表明,这些菌株存在广泛的多重耐药,特别是对青霉素G、阿莫西林、卡那霉素、甲氧嘧啶、复方新诺明、四环素、氯霉素和万古霉素耐药严重,对头孢哌酮、头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、阿米卡星、妥布霉素较为敏感.对超广谱β-内酰胺酶(ESBL)表型及基因型分析可知,所有菌株均为产ESBL大肠杆菌,其主要的ESBL耐药基因为bla_(TEM).
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- 关键词：大肠杆菌PCR药物敏感性试验超广谱Β-内酰胺酶
- 快速筛选猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白抗原间接ELISA方法的建立
- 引言猪支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS)是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hy opneumoniae,Mhp)引起的一种慢性、接触性呼吸道传染病,广泛分布于世界各地...
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- 文献传递
- 一种快速鉴定猪肺炎支原体免疫显性蛋白抗原的ELISA方法的建立被引量：4
- 2018年
- 旨在建立一种快速鉴定猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)血清体液免疫显性蛋白抗原的方法。通过构建p GEX-6P-1-mhp366重组表达质粒并转入大肠杆菌BL21(DE3),将GST-Mhp366重组蛋白进行原核表达。将GST-Mhp366重组菌和GST工程菌裂解液加入谷胱甘肽包被板进行抗原包被,分别与17份Mhp阳性血清和13份Mhp阴性血清反应,通过对抗原包被量、封闭液、血清和二抗稀释度的优化,确定间接ELISA的反应条件。最终确定GST-Mhp366重组菌和GST工程菌裂解液原液为抗原的最佳包被量,PBS+10%FBS+2.5%脱脂奶粉为最佳封闭液,分别将血清按照1∶500稀释、酶标二抗按照1∶40 000稀释作为最佳工作浓度,从而建立了一种基于间接ELISA的快速鉴定Mhp血清体液免疫显性蛋白抗原的方法,同时通过已知的血清体液免疫显性蛋白Mhp156和Mhp364对所建立的方法进行了验证。该方法的建立能够用于在基因组水平高通量筛选Mhp血清体液免疫显性蛋白抗原,并为Mhp初乳体液免疫和黏膜免疫显性蛋白抗原鉴定方法的建立奠定基础。
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- 关键词：猪支原体肺炎酶联免疫吸附试验
- 猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白抗原间接ELISA快速筛选方法的建立
- 周瑶琴游凤钟杰王豪举丁红雷
