王金良
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：华侨大学化工学院工业生物技术福建省高等学校重点实验室更多>>
- 发文基金：福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 米曲霉pyrG基因克隆及其同源转化系统的建立被引量：7
- 2010年
- 建立以乳清酸核苷-5'-磷酸脱羧酶基因(pyrG)为选择标志,以米曲霉为宿主菌的同源转化系统。以米曲霉基因组为模板,通过PCR扩增获得pyrG基因,将该片段与表达载体pMD18-T相连,转化大肠杆菌DH5α,经蓝白斑筛选、PCR快速筛选、酶切和测序验证,获得重组质粒pMD-pyrG,完成pyrG基因的克隆。序列分析表明该基因与米曲霉KBN616的pyrG基因编码序列的同源性为99.9%,两者经推导的氨基酸的同源性为99.6%。以米曲霉pyrG营养缺陷株为受体菌,通过PEG/CaCl2诱导的原生质体转化方法,将重组质粒导入该受体菌,使米曲霉pyrG缺陷株发生基因转化,成为pyrG+,由此成功建立了以pyrG为筛选标记基因、同型米曲霉pyrG基因缺陷株为受体菌的基因转化系统。
- 王金良陈宏文
- 关键词：重组质粒克隆
- 米曲霉为宿主茵的重组表达性质粒的构建
- 丝状真菌中的曲霉菌(aspergillus)由于其有生长迅速、易于培养、可大量产生分泌性蛋白质的特点，受到人们极大的关注。其中米曲霉(Aspergillus oryzae)是一种公认的安全真菌，它除了在生产各种真菌代谢物...
- 王金良林艳陈宏文方柏山
- 米曲霉为宿主菌的重组表达性质粒的构建
- 丝状真菌中的曲霉菌(aspergillus)由于其有生长迅速、易于培养、可大量产生分泌性蛋白质的特点,受到人们极大的关注。其中米曲霉(Aspergillus oryzae)是一种公认的安全真菌,它除了在生产各种真菌代谢物...
- 王金良林艳陈宏文方柏山
- 文献传递
