苑学礼
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
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- 大鼠良性增生前列腺腺上皮细胞系的建立
- 2014年
- 目的 探讨大鼠良性增生前列腺腺上皮细胞系的建立方法. 方法 2011年12月至2012年12月选取13周龄雄性自发性高血压大鼠20只,屏障环境下常规饲养至29周龄.取大鼠前列腺组织行苏木精-伊红染色鉴定前列腺上皮增生情况.取前列腺腹侧叶组织,剪碎后用Ⅰ型胶原蛋白酶消化,收集细胞,分别使用WAJC-404、PrEGM培养液进行体外培养14 d并传代.免疫细胞化学方法(CK8/18)鉴定原代培养的增生前列腺腺上皮细胞的特异性表达.绘制细胞生长曲线,比较两种培养基培养前列腺腺上皮细胞的生长情况. 结果 采用WAJC-404、PrEGM培养基体外原代培养自发性高血压大鼠前列腺腺上皮细胞均达14 d,并成功纯化和传代.免疫细胞化学实验证实原代培养的增生前列腺腺上皮细胞特异性表达细胞角蛋白CK8和CK18.细胞生长曲线显示:PrEGM培养基培养的腺上皮细胞与WAJC-404培养基相比,细胞形态更好,细胞活力更为旺盛,进入对数生长期的时间更短(4d与7d),细胞生长曲线平均峰值更高(15.3× 104/ml与12.8× 104/nl). 结论 大鼠良性增生前列腺腺上皮细胞系可体外构建,PrEGM培养基比WAJC-404培养基更适合该细胞系的建立.
- 牛鹏飞蔡建良苑学礼那彦群
- 关键词:良性前列腺增生细胞系原代培养
- 脱特罗定持续干扰胆碱能神经支配时大鼠良性增生前列腺腺上皮细胞的影响被引量:2
- 2014年
- 目的观察脱特罗定持续干扰胆碱能神经支配对大鼠良性增生前列腺腺上皮的影响。方法将29周龄雄性自发性高血压(SHR)大鼠42只,分为实验组18只,对照组18只,正常对照组6只。实验组每天2次脱特罗定(3.5mg/kg体质量,溶解于1.0ml生理盐水)灌胃给药,对照组每天2次胃内灌人等量的生理盐水,正常对照组不做任何处理。每12周处死一批大鼠,比较各组SHR大鼠前列腺腹侧叶大体形态、湿重/体质量比值、干重/湿重比值,组织切片光镜、透射电镜下观察,免疫组织化学LC3—Ⅱ染色等。结果各阶段实验组SHR大鼠前列腺腹侧叶大体形态与对照组差异不明显,两组大鼠前列腺腹侧叶湿重/体质量比值随周龄均进行性升高,各阶段两者差异均无统计学意义(P〉0.05);对照组大鼠前列腺腹侧叶干重/湿重比值随周龄进行性升高,但实验组升高趋势不明显,41周龄后两组差异有统计学意义(P〈0.01);光镜下观察,对照组大鼠前列腺腺上皮细胞继续呈现良性增生状态且进行性明显,而实验组大鼠前列腺腺上皮细胞逐渐出现萎缩性改变,41周龄后两组差异较为明显;电镜下观察,对照组前列腺腺上皮细胞呈现随周龄进行性明显的细胞增生和分泌功能亢进,腺细胞胞质内自噬体、自噬前体和自噬溶酶体结构众多;而实验组腺上皮细胞增生表现和胞质内自噬体结构随大鼠周龄的增加而逐渐下降,41周龄后两组差异有统计学意义(P〈0.01);典型的细胞凋亡现象在实验组和对照组各阶段差异均不明显;免疫组织化学实验发现,实验组大鼠前列腺腺上皮细胞胞质LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ阳性染色较同周龄对照组大鼠显著下降,其差异亦随大鼠周龄的延长而更明显,41周龄后差异有统计学意义(P〈0.01)。实验组大鼠与正常对照组比较,上述差异均无统计学意
- 蔡建良姚炜敏苑学礼夏溟那彦群
- 关键词:良性前列腺增生胆碱能神经去神经支配
- 在肾癌细胞系GRC-1细胞周期不同阶段Wnt-5A基因的表达情况
- 1999年
- Wnt 基因所编码的蛋白质与许多生长因子一样具有分泌型生长因子的结构特点, 其家族成员Wnt5A 是许多恶性肿瘤的自分泌生长因子, 在肾细胞癌中表达显著升高. 为研究在细胞周期的不同阶段生长因子Wnt5A 在转录水平的表达情况, 我们采用胸腺嘧啶双阻断及高压笑气处理的方法, 使肾细胞癌细胞系GRC1 细胞同步化.用半定量反转录多聚酶链反应对处于细胞周期不同阶段的细胞cDNA 进行扩增, S期与G1 , M 期Wnt5Am RNA表达存在差异显著( P< 0-05) . 结果提示生长因子Wnt5A 在肾细胞癌的发生中具有潜在的作用, 在S 期作用可能尤为显著.
- 庄立岩张志文郭宏骞李宏军唐东起苑学礼刘漓波丁义郭应禄
- 关键词:WNT-5A肾细胞癌细胞周期基因表达RT-PCR
- 长链非编码RNA DUXAP9、DUXAP10和LINC01296在膀胱癌细胞系中的特异性高表达研究被引量:6
- 2016年
- 目的:探寻与膀胱癌相关的长链非编码RNA,并明确它们在膀胱癌细胞系中的表达状况。方法:用lncRNA双通道表达谱芯片分析4对尿路上皮癌组织及癌旁正常尿路上皮的lncRNAs表达差异,筛选出差异表达的候选lncRNAs,并在膀胱癌细胞系(T24,RT4,BIU-87,EJ)、正常细胞系和其他肿瘤细胞系中,利用实时荧光定量PCR反应(Real-time PCR)进行验证。结果:根据芯片结果,挑选候选lncRNAs共6条,包括DUXAP9、DUXAP10、LINC01296、UCA1、PVT1、MEG3,进行细胞系表达验证。DUXAP9、DUXAP10和LINC01296在膀胱癌细胞系中显著特异性高表达。UCA1在胰腺癌、膀胱癌和肝癌各细胞系中均高表达,PVT1在膀胱癌细胞系中未见特异性高表达,MEG3在膀胱癌细胞系表达亦不高。结论:我们首次报道了DUXAP9、DUXAP10和LINC01296在膀胱癌细胞系中特异性高表达状况,与已报道的UCA1、MEG3、PVT1相比,这三个lncRNAs可能具有更好的膀胱癌特异性。
- 秦英超汪磊宫雁冰纪翔王刚孟军杨冰苑学礼李宁忱那彦群
- 关键词:长链非编码RNA膀胱癌