马睿泽
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
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- 重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的构建及其在FRT细胞中的表达和定位被引量：3
- 2013年
- 目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得aquaporin-4编码区基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N1。经酶切和测序鉴定证实为aquaporin-4后,Lipofectamine 2000脂质体转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体至FRT细胞中,倒置荧光显微镜下观察aquaporin-4在FRT细胞中的表达和分布,并应用Western blotting法检测aquaporin-4蛋白的表达。同时检测转入FRT细胞内钙黄绿素的相对荧光强度以判断FRT细胞水通透性的状况。结果:EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切和测序重组载体结果证实目的基因aquaporin-4成功克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。荧光显微镜下观察融合EGFP的aquaporin-4主要在FRT细胞膜上表达;Western blotting结果证实脂质体转染重组载体的FRT细胞表达aquaporin-4。转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的FRT细胞水通透性显著高于未转染的FRT细胞,其水通透性是未转染FRT细胞的1.65倍。结论:成功构建aquaporin-4真核表达载体,证实其可在FRT细胞中表达,并具有明显的膜蛋白特性和良好水通透性。
- 李凤娥郝峰藏雨轩马睿泽孔繁利刘磊李艳
- 关键词：AQUAPORIN-4转染
- 《生物化学检验》实验课教学改革探讨被引量：14
- 2012年
- 临床生物化学检验是医学检验专业一门重要的专业课,临床生物化学检验实验课教学在临床生物化学检验教学中占有重要地位临床生物化学检验室一门实践性很强的学科,组织好实验课这个实践环节,对于提高教学质量,培养学生的动手能力和学习能力具有极为重要的意义。根据学科发展并结合自身实际情况,对临床生物化学检验实验课做了一系列教学改革尝试,提出合理配置实验课的课时;改革实验课的考核方式;及时接触临床生产实习等改革措施,为提高临床生物化学检验实验课教学质量进行了有益的探索。
- 郝峰许会静马睿泽王雪燕姜勇李艳
- 关键词：实验教学教学改革
