高杰英
- 作品数：3 被引量：12H指数：1
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 痢疾杆菌主要毒力基因研究新进展
- 1992年
- 痢疾杆菌的毒力基因广泛地分布在染色体及质粒上,其结构及表达调控甚为复杂.本文就近年O抗原编码基因、侵袭毒力基因(侵袭相关基因、调节基因)的新进展作一综述.
- 吴振彪高杰英
- 关键词：痢疾杆菌毒力基因
- 粪肠球菌和屎肠球菌耐药性分析被引量：12
- 2019年
- 目的了解屎肠球菌和粪肠球菌对抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法收集我院2014年1月-2018年12月临床分离的1068株屎肠球菌和487株粪肠球菌,采用MA120细菌鉴定/药敏分析系统进行菌株鉴定,仪器法联合Kirby-Bauer纸片法进行药敏试验及耐药性分析。结果屎肠球菌和粪肠球菌5年间无利奈唑胺耐药菌株出现,对万古霉素、替考拉宁保持高度敏感,屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素的耐药率分别为1.50%、0.41%。屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、红霉素的平均耐药率均>80%,对氯霉素保持低耐药率,对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星的耐药率不同年份呈上升趋势,对四环素、利福平耐药率呈下降趋势(P<0.05)。粪肠球菌对红霉素和四环素的平均耐药率均>70%,对青霉素、氨苄西林、呋喃妥因的平均耐药率均<3%,对左氧氟沙星和环丙沙星耐药率不同年份呈上升趋势(P<0.05)。屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、左氧氟沙星、环丙沙星、呋喃妥因耐药率高于粪肠球菌,粪肠球菌对四环素和氯霉素的耐药率高于屎肠球菌(P<0.05)。尿液标本屎肠球菌对抗菌药物的耐药率高于非尿液标本(P<0.05)。结论肠球菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁仍保持较好的敏感性,但对多种抗菌药物的耐药性呈上升趋势,且屎肠球菌耐药现状严重,故临床应根据药敏结果合理选择抗菌药物。
- 高杰英王缚鲲顾江陈晶高鹏郭萌王佳钰程琰
- 关键词：屎肠球菌粪肠球菌抗菌药
- EEA1慢病毒表达载体的构建及其对查菲埃立克体感染细胞的影响
- 2019年
- 目的 利用分子生物学方法构建早期内吞体相关蛋白1(EEA1)慢病毒载体,并感染犬的巨噬细胞DH82,建立稳定表达EEA1的DH82细胞系。方法 将聚合酶链反应(PCR)扩增得到的EEA1和慢病毒载体GV287双酶切后连接,构建慢病毒表达载体GV287-EEA1,经酶切、测序鉴定重组质粒。将重组载体与包装系统pHelper1.0、pHelper2.0质粒共转染293T细胞,包装慢病毒并测定滴度。将构建好的慢病毒表达载体感染DH82细胞,通过实时荧光定量PCR(qPCR)和Westernblot检测DH82细胞中EEA1的过表达情况。进一步利用查菲埃立克体感染稳定表达EEA1的DH82细胞。结果 GV287-EEA1经双酶切分析和测序,证实插入序列正确,成功构建慢病毒表达质粒,并成功包装成慢病毒,病毒滴度为1×10^9TU/mL;病毒液有效感染DH82细胞,依据GFP绿色荧光可检测感染率达80%以上;qPCR和Westernblot的结果证实EEA1在mRNA和蛋白水平都成功过表达。用查菲埃立克体感染稳定表达EEA1的DH82细胞36h后,细胞感染率降低,查菲埃立克体在细胞内的增殖被抑制。结论 成功构建了绿色荧光蛋白标记的携带EEA1基因的慢病毒载体GV287-EEA1,建立稳定高表达EEA1的犬巨噬细胞系DH82-EEA1,EEA1过表达后,查菲埃立克体的繁殖受到抑制。
- 程琰毛旭虎宋阳贺政新陈晶曾倩高杰英王缚鲲
- 关键词：查菲埃立克体慢病毒载体
