刘凤鸣
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：山东大学医学院医学免疫学研究所更多>>
- 发文基金：山东省博士后创新项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PDCD4转染卵巢癌细胞系基因表达谱的变化被引量：1
- 2010年
- 目的探讨卵巢癌细胞系SKOV3稳定表达程序性细胞死亡4(PDCD4)基因后基因表达谱的变化。方法将pDsRed2-N1-PDCD4真核表达载体和pDsRed2-N1空载体分别转染至SKOV3并获得稳定细胞系,应用基因芯片技术分析PDCD4基因转染后基因表达的变化,RT-PCR检测基因的表达以验证芯片结果。结果PDCD4转染SKOV3后引起大量基因表达的变化,表达明显差异基因共有467个,其中上调255个,下调212个;RT-PCR验证选取的5个基因的表达差异和芯片显示的结果一致。结论成功筛选出PDCD4基因转染卵巢癌细胞系SKOV3后的差异表达基因,为进一步研究PDCD4的抑癌作用机制提供了实验依据。
- 姜杨张霞王晓燕刘凤鸣宋兴国张利宁
- 关键词：基因芯片差异基因
- 人PDCD4启动子真核报告质粒的构建和鉴定
- 2010年
- 目的克隆人程序性死亡因子4(PDCD4)基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并在细胞内检测其活性,为进一步研究PDCD4表达调控奠定基础。方法采用PCR技术,从人基因组DNA中扩增出PDCD4启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL4-Basic中,测序所扩增的DNA序列,并将构建的pGL4-PDCD4-P1荧光素酶报告质粒,与内参照pRL-TK用脂质体法瞬时共转染OVCAR3,SKOV3细胞系,通过双荧光素酶活性检测确定其启动子活性。结果测序结果表明,扩增的PDCD4启动子序列正确,pGL4-PDCD4-P1转染OVCAR3细胞(高表达内源性PDCD4)24h后,双荧光素酶活性检测显示其启动子相对活性约为pGL4-Basic空载体的67倍;而pGL4-PDCD4-P1转染低表达内源性PDCD4的SKOV3细胞后相对活性约为15倍。结论成功构建PDCD4启动子的克隆及人PDCD4启动子报告基因,为后续研究奠定了基础。
- 刘凤鸣张霞宋兴国姜杨张利宁
- 关键词：启动子荧光素酶
