姜杨
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：山东大学医学院医学免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省博士后创新项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CD4^+ CD25^+ Foxp3^+及CD4^+ CD25^- Foxp^(3+)调节性T细胞在小鼠衰老过程中的变化规律被引量：2
- 2008年
- 目的分析小鼠脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+及CD4+CD25-Foxp3+调节性T细胞随小鼠年龄增长的变化,探讨调节性T细胞与衰老的关系。方法2个月(青年)、6个月(中年)和15个月(老年)小鼠各5只,无菌取脾脏制备单个脾细胞悬液,首先用PECy5-CD4抗体和FITC-CD25抗体进行细胞表面染色,PBS洗涤后,经打孔液和固定液处理,最后用PE-Foxp3抗体进行核内染色,并用流式细胞仪检测CD4+调节性T细胞的变化。结果脾脏中CD4+T细胞的数量在不同年龄小鼠间变化不大,CD4+T细胞中CD4+CD25+T细胞的数量也无明显改变,但随小鼠年龄的增长CD4+Foxp3+T细胞的数量明显升高,15个月小鼠CD4+Foxp3+T数量高达(16.83±0.44)%,明显高于2个月和6个月小鼠(P<0.01)。随着年龄的增长CD25+Foxp3+调节性T细胞数量逐渐减低,CD25+Foxp3+T细胞在15个月和6个月小鼠脾细胞中的数量明显低于2个月小鼠(P<0.05);而CD25-Foxp3+调节性T瞎胞的数量随着年龄的增长持续升高(P<0.01);随着年龄的增长小鼠脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞与CD4+CD25-Foxp3+T细胞的比值呈下降趋势。结论小鼠衰老过程中CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量明显下降,而CD4+CD25-Foxp3+T细胞的数量明显上升,提示这两群调节性T细胞亚群在小鼠衰老中可能发挥不同作用。
- 高琦马湉张霞姜杨张利宁
- 关键词：小鼠
- 人PDCD4启动子真核报告质粒的构建和鉴定
- 2010年
- 目的克隆人程序性死亡因子4(PDCD4)基因的启动子,插入荧光素酶报告基因载体中,并在细胞内检测其活性,为进一步研究PDCD4表达调控奠定基础。方法采用PCR技术,从人基因组DNA中扩增出PDCD4启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL4-Basic中,测序所扩增的DNA序列,并将构建的pGL4-PDCD4-P1荧光素酶报告质粒,与内参照pRL-TK用脂质体法瞬时共转染OVCAR3,SKOV3细胞系,通过双荧光素酶活性检测确定其启动子活性。结果测序结果表明,扩增的PDCD4启动子序列正确,pGL4-PDCD4-P1转染OVCAR3细胞(高表达内源性PDCD4)24h后,双荧光素酶活性检测显示其启动子相对活性约为pGL4-Basic空载体的67倍;而pGL4-PDCD4-P1转染低表达内源性PDCD4的SKOV3细胞后相对活性约为15倍。结论成功构建PDCD4启动子的克隆及人PDCD4启动子报告基因,为后续研究奠定了基础。
- 刘凤鸣张霞宋兴国姜杨张利宁
- 关键词：启动子荧光素酶
- CD4+CD25+Foxp3+及CD4+CD25-Foxp3+调节性T细胞在小鼠衰老过程中的变化规律
- 研究背景:调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是能抑制其它免疫细胞活化、增殖的一群细胞,在维持自身内环境的稳定、防止自身免疫性疾病的发生、抑制移植排斥反应等疾病中发挥重要的保护作用,已经成为免疫学...
- 高琦马湉张霞姜杨张利宁
- 文献传递
- PDCD4转染卵巢癌细胞系基因表达谱的变化被引量：1
- 2010年
- 目的探讨卵巢癌细胞系SKOV3稳定表达程序性细胞死亡4(PDCD4)基因后基因表达谱的变化。方法将pDsRed2-N1-PDCD4真核表达载体和pDsRed2-N1空载体分别转染至SKOV3并获得稳定细胞系,应用基因芯片技术分析PDCD4基因转染后基因表达的变化,RT-PCR检测基因的表达以验证芯片结果。结果PDCD4转染SKOV3后引起大量基因表达的变化,表达明显差异基因共有467个,其中上调255个,下调212个;RT-PCR验证选取的5个基因的表达差异和芯片显示的结果一致。结论成功筛选出PDCD4基因转染卵巢癌细胞系SKOV3后的差异表达基因,为进一步研究PDCD4的抑癌作用机制提供了实验依据。
- 姜杨张霞王晓燕刘凤鸣宋兴国张利宁
- 关键词：基因芯片差异基因
- PDCD4基因对T淋巴细胞亚群分化的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨PDCD4基因对小鼠T淋巴细胞亚群分化的影响。方法采用流式细胞术检测PDCD4基因缺失小鼠脾细胞和淋巴结细胞中的CD8+T和CD4+T,及其亚群Th1、Th2、Th17和调节性T细胞(Treg)的特异性标记分子,并分析各细胞亚群的比例变化。结果 pdcd4-/-小鼠脾脏和淋巴结中CD8+T细胞数量较野生型C57BL/6小鼠有所下降(P<0.05),CD4+T细胞及Th1细胞也呈下降趋势,差异无统计学意义(P>0.05);而PDCD4基因缺失后Th2和Th17的分化比例无显著变化(P>0.05);进一步分析CD4+T细胞群体中CD25+Foxp3+Treg的表达,发现pdcd4-/-小鼠CD25+Foxp3+Treg比例明显上调(P<0.05)。结论 PDCD4基因能够影响部分T淋巴细胞亚群的分化,PDCD4基因敲除小鼠中CD8+T细胞数量下降和CD25+Foxp3+Treg比例升高,提示PDCD4基因有可能在免疫调节方面起到一定作用。而PDCD4基因对于CD4+T以及Th1、Th2和Th17的分化并无明显作用。
- 刘香岚姜杨王群朱法良董兆静郭春张利宁
- 关键词：CD4+T细胞CD8+T细胞TH1细胞TH2细胞
