吴程
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：福建省教育厅资助项目福建省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 基因改造AiiA蛋白在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2015年
- 基于毕赤酵母基因组偏好密码子数据表对编码Aii A蛋白的碱基序列进行密码子优化,并构建多拷贝重组Oaii A表达载体p PICZαB-x Oaii A(x=1,2,3),成功表达出具有活性的Aii A蛋白.实验结果表明,优化后Oaii A基因的表达量(2.64 mg·L-1)较优化前aii A的表达量(1.38 mg·L-1)提高约两倍.优化后二拷贝和三拷贝表达量分别为2.84 mg·L-1和2.93 mg·L-1.结果表明密码子优化可以有效提高Aii A蛋白在毕赤酵母中的表达,但是多拷贝表达载体对Aii A的表达促进作用并不显著.提示未来在探索Aii A蛋白在毕赤酵母中的高表达时,通过增加拷贝数来提高产量并不是一个很好的途径,而进行密码子的优化可以有效提高产量.
- 简思美蔡斌斌吴程何晶晶曾世涌杨梅
- 关键词：密码子优化多拷贝毕赤酵母
- 一株日本鳗鲡肠道乳酸菌SOD酶基因克隆表达与应用研究
- 2016年
- 为了解决日本鳗鲡抗生素滥用的问题,探究能够替代抗生素的微生态制剂,从日本鳗鲡肠道中筛选益生菌乳酸菌,克隆其SOD酶基因,并在大肠杆菌中进行表达,将SOD酶、益生乳酸菌同基础饲料配制成3组不同的饲料饲喂鳗鲡后进行血液生化指标分析.实验结果表明,益生菌、SOD酶以及乳酸菌和SOD酶制成的复合酶饲养的鳗鲡的血清总蛋白相对于对照组分别提高2%、8%、18%;葡萄糖相对于对照组分别提高64.8%、19.1%、79.7%;超氧化物歧化酶相对于对照组分别提高10.7%、25.4%、47.1%.各项指标提示添加乳酸菌、SOD酶蛋白有利于日本鳗鲡的生长,在一定程度上提高宿主的抗病能力和免疫性能.
- 吴程蔡斌斌简思美杨梅
- 关键词：鳗鲡乳酸菌超氧化物歧化酶血液生化指标
- 基于高通量测序技术研究白甲鱼肠道微生物群落组成被引量：12
- 2018年
- 为研究白甲鱼肠道微生物菌群组成及其多样性.通过高通量测序技术研究白甲鱼肠道内容物菌群组成结构及多样性.结果表明:从36只健康白甲鱼肠道内容物样品中测得白甲鱼肠道中共有22个门,202个物种组成的微生物群.白甲鱼肠道细菌以梭杆菌门Fusobacteria (70. 51±3. 72)%、变形菌门Proteobacteria (22. 55±4. 21)%、螺旋菌门Spirochaetae (2. 84±2. 14)%、厚壁菌门Firmicutes (2. 61±1. 10)%和软壁菌门Tenericutes (1. 12±0. 88)%为主.梭杆菌门中Cetobacterium平均占有(70. 51±3. 72)%的OTUs,是最大的细菌属. Fusobacteria和Proteobacteria为白甲鱼肠道中的优势菌群.实验分析了白甲鱼肠道微生物菌群结构,发现白甲鱼肠道内存在复杂的微生物菌群,为进一步研究白甲鱼对营养物质的吸收利用提供了理论基础.
- 苏月华陈少威吴程蔡斌斌杨梅
- 关键词：白甲鱼肠道微生物高通量测序
- 苏云金芽胞杆菌aiiA的5'端侧翼序列的克隆与功能鉴定被引量：1
- 2018年
- 为了研究苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine Lactonase,AiiA蛋白)表达调控机制,确定aiiA的启动子区域。本研究克隆了aiiA的5'端侧翼区(aP-1930--1),以gfp作为报告基因,分段克隆aiiA的5'侧翼区,鉴定启动子活性,并对aiiA启动子序列中的碱基对-150和-142之间的2个连续的TATA盒进行定点突变。结果显示,侧翼序列aP-295--101和aP-295--1可作为启动子,实现GFP在大肠杆菌中的异源表达,启动子序列aP-295--101比aP-295--1活性更强,aP-101--1序列不能启动GFP表达。定点突变pET28a-aP-295--101-gfp载体2个TATA盒显著降低GFP表达。表明-295--1bp为aiiA的启动子区,-429--296与-100--1序列是aiiA的负调控序列。-150--142 bp区域的2个TATA盒对aiiA的5'侧翼区域的启动子活性起关键的作用。
- 陈少威吴程苏月华蔡斌斌谢盼盼杨梅
- 关键词：苏云金芽胞杆菌启动子定点突变
- 小菜蛾β-1,3-葡聚糖识别蛋白βGRP基因的克隆与表达
- 2017年
- 为研究小菜蛾的先天免疫机制,从小菜蛾幼虫体内克隆得到一条β-1,3-葡聚糖识别蛋白(β-1,3-glucan recognition protein,βGRP)基因,利用生物信息学软件对该基因及其编码蛋白的理化性质、疏水性、结构等方面进行分析与预测,同时构建系统进化树.为研究该蛋白的功能,以大肠杆菌为宿主表达该基因,利用镍柱纯化目的蛋白.实验结果表明,该序列的开放阅读框长1 287 bp,编码428个氨基酸,编码的蛋白质理论分子质量约48.13 ku,理论的等电点为6.18,为亲水性蛋白;进化树分析表明,该蛋白跟家蚕、柞蚕、菜青虫、棉铃虫、冬尺蠖蛾、粉纹夜蝶归为同一大类;经大肠杆菌表达的蛋白均为不溶性的包涵体,通过对包涵体的变性及镍柱的纯化,得到了浓度较高的可溶性目的蛋白.
- 陈少威吴程蔡斌斌杨梅
- 关键词：小菜蛾先天免疫
- 小菜蛾PGRP-S2基因的克隆表达及功能分析被引量：1
- 2020年
- 肽聚糖识别蛋白(peptidoglycan recognition protein,PGRP)对于昆虫来说是一种高度保守的病原识别蛋白。为阐明PGRP-S2在小菜蛾Plutella xylostella抵抗病原微生物过程中的作用,本研究结合RT-PCR和RACE技术克隆得到小菜蛾PGRP-S2基因的cDNA全长序列,命名为PGRP-S2(GenBank登录号:MG570190)。生物信息学分析结果表明,PGRP-S2的开放阅读框为588 bp,编码195个氨基酸;蛋白质预测分子量为21.46 kDa,理论等电点为8.46;编码蛋白具有PGRP超家族保守结构域和酰胺酶结构域,是典型的肽聚糖识别蛋白,包含一条信号肽,不存在跨膜结构;同源序列比对和系统进化树分析表明PGRP-S2与家蚕Bombyx mori的BmPGRP-S 1进化距离最近。利用大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)高效表达重组蛋白PxPGRP-S2,利用倒置显微镜及平板涂布观察重组蛋白对大肠杆菌E.coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus的作用,结果表明PxPGRP-S2蛋白能够与两种细菌发生结合并凝集细菌,但不具备直接杀菌功能。本研究为进一步研究基于PGRP-S2介导的小菜蛾免疫防御反应提供基础。
- 杜少萱吴程苏月华杨梅
- 关键词：小菜蛾肽聚糖识别蛋白原核表达凝集试验
