朱怡文
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：上海市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 人转铁蛋白转基因克隆牛整合位点检测被引量：1
- 2012年
- 为检测外源基因整合在转基因克隆牛染色体上的定位情况,通过优化染色体荧光原位杂交技术,成功对4头人转铁蛋白转基因克隆牛的整合位点进行定位。每头牛分析中期分裂相40个以上,杂交率在53.1%～86.8%之间,且杂交信号分别位于转基因克隆牛的11号、15号和19号染色体的相应位置;另外采用定量PCR方法对杂交信号强弱不同的转基因克隆牛个体进行整合位点拷贝数的检测,结果显示拷贝数的多少与杂交信号强弱直接有关。
- 刘宇朱怡文许淼黄英
- 关键词：荧光原位杂交整合位点拷贝数
- 应用实时荧光定量PCR测定牛体细胞端粒长度被引量：2
- 2010年
- 本研究为了验证应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative PCR,Q-PCR)测定牛基因组端粒长度的可行性,选取18个不同来源牛耳成纤维细胞抽提基因组DNA为样本,对Q-PCR和经典的Southern印迹法进行了相关性分析。结果显示,Q-PCR测定端粒长度相对T/S为1.16±0.24,Southern印迹法测量端粒平均TRF值为16.99 kb±0.85 kb,两种方法获得的结果相关性分析R2=0.5612(P<0.01),因此实时荧光定量PCR是一种测定牛基因组端粒长度的可靠的方法。
- 吕昆林丹许淼朱怡文黄英
- 关键词：荧光定量聚合酶链式反应印迹法牛体细胞端粒长度
- 比较牛催乳素与生长激素对外源基因表达的影响
- 2013年
- 目的:用牛生长激素(bGH)和牛催乳素(bPRL)乳腺特异载体DNA分别转染携带人转铁蛋白(hTF)的转基因小鼠乳腺上皮细胞,比较这二种载体对外源基因(人转铁蛋白)的表达影响,为研制特异、高效表达外源蛋白转基因动物过程中载体的合理构建,提供有价值的理论和技术基础。方法:将构建β-酪蛋白启动子(P1A3)调控的bGH和bPRL乳腺特异表达载体分别转染体外培养的转基因小鼠乳腺上皮细胞;并将转染pcDNA3.1质粒和未转染细胞作为对照,收集不同代数的细胞及上清液,用RT-PCR及Elisa法分析mRNA及蛋白,分析比较二者对hTF表达水平的影响。结果:RT-PCR显示人转铁蛋白转录电泳条带明显;Elisa表明二者均能提高hTF蛋白水平的表达。结论:首次应用牛生长激素和催乳素对外源基因表达影响作用进行比较研究;β-酪蛋白启动子(P1A3)调控的bGH和bPRL均能促进在乳腺上皮细胞水平上外源蛋白表达。因此,在研制转基因动物———乳腺生物反应器中,采用bGH和bPRL促进乳汁中外源蛋白特异、高效表达的载体都将是可选择的新技术途径。
- 闫亚彬蔡勤蔡琳琳龚秀丽朱怡文管翌华黄英
- 关键词：牛生长激素乳腺生物反应器
- 首个非羧酸类FFA4激动剂GSK-137647A的体内药理活性、长期给药有效性及安全性研究
- 2019年
- 目的阐明首个非羧酸类FFA4激动剂GSK-137647A的体内药理活性、长期给药有效性及安全性,为FFA4激动剂进一步的研究开发奠定基础。方法 a.剂量依赖性试验:雄性ICR小鼠分别给予溶媒,200 mg·kg^(-1)二甲双胍及GSK-137647A(20,40及80 mg·kg^(-1)),给药30 min后灌胃给予3 mg·kg^(-1)葡萄糖,测定葡萄糖耐量(OGTT)。b.低血糖风险评估:空腹ICR小鼠分别给予溶媒,15 mg·kg^(-1)格列本脲及80 mg·kg^(-1) GSK-137647A,测定给药后相应时间点的血糖水平。c.DIO小鼠长期给药研究:雄性C57BL/6小鼠以高脂饲料喂养8周诱导产生DIO模型小鼠,随机分组后连续60天分别灌胃(1天2次,给药间期12 h)给予溶媒,40 mg·kg^(-1) GSK-137647A及200 mg·kg^(-1)二甲双胍,测定第0天和第59天的OGTT,在给药第60天,DIO小鼠摘眼球取血,以生化自动分析仪测定血清生化指标。结果 GSK-137647A体内降糖呈现剂量依赖性,其最大药效剂量约为40 mg·kg^(-1),且低血糖风险较低。在DIO小鼠长期给药实验中,GSK-137647A不会导致FFA4受体脱敏,其介导的外周胰岛素增敏作用使得长期给药后降糖活性显著提高。血清生化分析表明GSK-137647A长期给药后肾功能受损,可能原因在于GSK-137647A的水溶性较差,高剂量长期给药容易在肾脏中形成结晶,对肾脏具有一定的损伤,提示我们通过结构改造以改善其水溶性,将进一步提高其安全性。此外,GSK-137647A可能通过促进GLP-1分泌和改善胰岛素抵抗,发挥降低血糖和血脂的双重药理作用。结论首个非羧酸类FFA4激动剂GSK-137647A具有较好的药理活性及耐受性,具有改善血糖和血脂的双重药理作用,表明FFA4激动剂在改善代谢综合征方面具有广阔应用前景;同时也提出针对GSK-137647A较差的水溶性缺陷进行结构优化的研究思路。
- 吴周全朱怡文薛济鸿赵丽
- 关键词：水溶性
- 儿童外周血淋巴细胞内21号染色体空间构象的量化分析研究
- <正>目的:比较正常儿童和唐氏综合征(Down syndrome,DS)患儿外周血淋巴细胞内21号染色体空间构象上的差异方法:3D-FISH技术结合共聚焦激光扫描显微镜成像技术是获取细胞内染色体三维原位荧光图像的重要手段...
- 朱怡文周密黄淑帧曾凡一
- 文献传递
