李书贵
- 作品数：5 被引量：41H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院烟草研究所更多>>
- 发文基金：中国烟草总公司科技项目海南省科技计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学经济管理更多>>
- 基于高通量测序和传统分离研究雪茄外包皮表面细菌多样性及演替被引量：26
- 2018年
- 细菌在烟叶发酵过程中起着重要作用,为探索烟叶的发酵机理,采用Illumina miseq高通量测序技术（Highthroughput sequencing,HTS）和传统微生物分离方法,对墨西哥不同发酵时期雪茄外包皮表面细菌群落结构、丰富度及演替进行研究.（1）HTS获得有效序列条数514 641条,包含65个OTUs,主要种属为棒状杆菌属（Corynebacterium）、葡萄球菌属（Staphylococcus）、不动杆菌属（Acinetobacter）、假单胞菌属（Pseudomonas）、芽孢杆菌属（Bacillus）等.HTS结果表明,墨西哥雪茄外包皮表面细菌群落组成丰富,细菌群落结构随发酵进程而变化,优势微生物由棒状杆菌属（44.64%）和假单胞菌属（40.88%）演替为后期的葡萄球菌属（72.78%）.α多样性结果表明FJQY-1和FJQY-2样品的细菌群落具有较高的丰富度.β多样性分析发现FJQY-2、FJQY-3和FJQY-4三个样品细菌结构及丰度较为相似.（2）传统分离结果显示,不同发酵时期雪茄外包皮表面细菌主要为芽孢杆菌属（55.10%）和葡萄球菌属（22.45%）,与HTS结果比较,单一传统分离方法不能全面反映不同时期雪茄外包皮表面细菌群落结构和演替.本研究表明,在不同发酵时期,雪茄外包皮表面细菌发生着群落演替;HTS测序在揭示微生物群落演替中发挥了重要作用;传统微生物分离鉴定方法不能全面反映微生物多样性及群落演替,但能获得发酵过程中的部分微生物用于后期功能研究.
- 张鸽梁开朝辛玉华王娟李书贵李书贵王帆张海波刘好宝
- 关键词：高通量测序细菌多样性群落演替
- 林烟草NsylCBL10互作蛋白激酶NsylCIPK的鉴定与分析被引量：1
- 2018年
- 植物中的类钙调神经素B亚基蛋白CBL (calcineurin B-like protein)家族成员与其互作蛋白激酶CIPK (CBL-interacting kinase protein)家族成员形成了复杂精细的CBL-CIPK信号调控网络,在解码生物和非生物胁迫激发的钙信号及信号的进一步传导中发挥重要作用。CBL家族成员CBL10参与植物抵抗高盐胁迫、应对病菌侵染、参与分生组织和花器官发育、调节离子平衡等多个过程,对其下游互作CIPK家族成员的筛选与鉴定对于明确上述调节机制至关重要。为了鉴定林烟草(Nicotiana sylvestris) NsylCBL10下游互作NsylCIPK家族成员,本研究首先以拟南芥(Arabidopsis thaliana) AtCIPK家族成员和水稻(Oryza sativa) OsCIPK家族成员基因的CDS序列为检索序列,利用NCBI和中国烟草基因组数据库对林烟草中可能存在的NsylCIPK家族成员进行了预测;然后通过RT-PCR方法对预测到的NsylCIPK家族成员进行了克隆并利用生物学分析软件对其基因结构和蛋白保守结构域进行了分析;最后通过酵母双杂交实验鉴定了与Nsyl CBL10互作的NsylCIPK家族成员。结果表明,在林烟草中可能存在28个NsylCIPK家族成员,实际克隆获得了20个NsylCIPK家族成员,在酵母双杂交体系中与NsylCBL10互作的只有1个NsylCIPK家族成员Nsyl CIPK14a。本研究为解析林烟草及其他物种中CBL-CIPK信号通路的调节功能提供了试验数据。
- 许迪之史素娟毛静静张鸽李书贵李书贵Zia Ullah刘好宝王倩
- 关键词：钙信号酵母双杂交
- 凉攀烟区生产用工现状分析被引量：1
- 2020年
- 为探明烤烟生产过程中相关工序及用工量,以便在四川烟区开展烤烟优质轻简高效栽培技术研究,采用问卷调查、实地调研与动态跟踪相结合的方法对凉攀烟区生产用工现状进行调查分析。结果表明,凉攀烟区烤烟生产过程划分为6个环节,共23道工序,从各环节所用工序对比来看,大田移栽环节工序最多,达10个,占总工序数量的43.48%,田间管理工序次之,有7个,占总工序数量的30.44%;凉攀烟区烤烟用工量为315.45个/hm^2,生产各环节用工量表现为田间管理>采收烘烤>大田移栽>烟地整理>育苗>冬耕深翻,田间管理环节用工量109.35个/hm^2,采收烘烤环节用工量97.50个/hm^2,大田移栽环节用工量92.40个/hm^2,这3个环节用工量占总生产用工的94.86%,是烤烟生产过程中用工量较多、劳动强度较大的几个关键环节。
- 吴涛刘好宝李书贵张宗锦官宇罗富国王勇
- 关键词：烤烟生产用工量
- 林烟草NsylCBL10启动子的克隆及功能分析被引量：1
- 2017年
- 【目的】探究林烟草(Nicotiana sylvestris)类钙调神经素B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因家族成员Nsyl CBL10的启动子在烟草不同生长发育过程及光信号刺激下的活性变化。【方法】克隆Nsyl CBL10启动子并初步预测其顺式作用元件;构建Nsyl CBL10启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)的融合表达载体并将其转入普通烟草(Nicotiana tabacum),获得转Nsyl CBL10pro::GUS的纯合材料;利用所获转基因材料探究Nsyl CBL10启动子在种子萌发期、幼苗期和成熟期的组织特异活性和在幼苗下胚轴的光诱导活性。【结果】预测结果表明,Nsyl CBL10启动子含有与组织特异性和响应光信号、植物激素和胁迫等相关的顺式作用元件;组织化学染色试验表明,Nsyl CBL10启动子驱动的GUS基因在种子萌发期主要在子叶节区-根过渡区、根尖表达,子叶伸展期主要在子叶、子叶节区-根过渡区和根尖表达,十字期主要在叶片中表达,成熟期在柱头、成熟的花药、侧根根尖和侧根根基部表达量较高;幼苗下胚轴中,Nsyl CBL10启动子驱动的GUS的基因表达在光下受到抑制,黑暗下被增强。【结论】Nsyl CBL10启动子活性在烟草不同发育期的组织中呈现动态变化。在烟草分生能力强的部位和成熟期的花器官中其启动活性较强,在幼苗下胚轴中的启动子活性受到光信号的调控。
- 毛静静王倩史素娟张鸽许迪之李书贵刘好宝
- 关键词：GUS活性组织特异性
- 四个国家雪茄外包皮烟叶表面细菌分离与活性测定被引量：21
- 2018年
- 研究不同国家雪茄外包皮烟叶表面细菌差异,并为筛选菌株在雪茄外包皮烟叶发酵中的利用奠定基础。利用常规分离方法对美国、巴西、多米尼加及中国4个国家的7个雪茄外包皮烟样表面细菌进行分离鉴定,并初步测定筛选细菌的功能活性。结果表明,4个不同国家雪茄外包皮烟叶表面共分离获得细菌100株;属水平上不同地区雪茄外包皮烟叶表面细菌多样性及数量存在差异,基本以芽孢杆菌和葡萄球菌为主,尤其芽孢杆菌属为优势菌属;细菌种类多米尼加>美国-2=中国-1>巴西-1>巴西-2>中国-2>美国-1。活性分析结果显示,具有纤维素酶、果胶酶和蛋白酶分泌功能的菌株分别为24株、20株和22株,耐烟碱菌株46株,有7株芽孢杆菌同时具有上述4种活性。本研究证明国内外不同地区雪茄外包皮烟叶表面细菌种类存在差异,以芽孢杆菌属为优势细菌,其次是葡萄球菌,且芽孢杆菌属酶活更全面,不同菌株间活性差异较大。
- 张鸽张鸽辛玉华王娟李书贵王帆李书贵刘好宝
- 关键词：表面细菌活性测定
