段艳慧
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 供职机构:宁夏大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 乌拉尔甘草离体再生与遗传转化技术的研究被引量:1
- 2016年
- 研究乌拉尔甘草离体再生受体系统和遗传转化技术方法,为甘草基因工程育种提供前期实验基础。以乌拉尔甘草茎段为外植体,试验筛选最适不定芽分化培养基和增殖壮苗培养基;以乌拉尔甘草茎段为受体,利用农杆菌介导法对乌拉尔甘草进行GUS和GFP基因的遗传转化研究。结果表明,以乌拉尔甘草去腋芽茎段为外植体,其不定芽最适分化和增殖培养基配方为MS+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L 6BA+0.1mg/L IBA,不定芽分化率达38.8%,增殖倍数3.67,适宜的壮苗培养基为MS+0.5mg/L NAA。与去腋芽茎段相比,带腋芽茎段的不定芽分化率达100%,能够在含抗生素的选择培养基MS+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L 6BA+0.1mg/L IBA+50mg/L Kan+250mg/L Car上存活,确定为最适转化受体;带腋芽茎段在分化培养基上预培养7d后,经OD_(600)=0.6的菌液侵染10min,共培养3d,在选择培养基上培养20d,其不定芽分化率为43.75%,经GFP荧光检测可得到78.88%的GFP基因瞬时表达率;随机选取5株再生转化植株,经PCR检测,均有GFP和GUS基因的目的条带,GFP基因表达较强烈,初步获得了5个株系的阳性转化植株。
- 胡海英张芮段艳慧谢应忠
- 关键词:乌拉尔甘草茎段不定芽分化绿色荧光蛋白