张芮 作品数:10 被引量:12 H指数:3 供职机构: 宁夏大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 宁夏回族自治区科技支撑计划项目 国家自然科学基金 宁夏回族自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 经济管理 更多>>
甜叶菊甜菊醇糖苷生物合成关键酶基因表达量与莱宝迪苷A含量的相关关系 被引量:3 2015年 莱宝迪苷A(rebaudioside,RA)是甜叶菊甜菊醇糖苷中的主要甜味成分,其含量受到生物合成中多个酶基因的影响。本研究以6个甜叶菊品种为材料,利用实时荧光定量RT-PCR测定RA生物合成途径中UGT85C2、UGT91D2m和UGT76G1三个关键酶基因的表达量,并与其RA含量进行相关性分析。结果显示UGT76G1基因相对表达量与RA含量有极显著相关关系(p=0.008),而UGT85C2和UGT91D2m基因表达量与RA含量无相关关系,说明UGT76G1基因的表达对RA合成有着较为重要的影响。研究结果可为利用基因工程手段人为调控甜菊醇糖苷的生物合成,提高RA的含量提供理论依据。 张虹 张芮 薄玉瑶 刘祥 张自萍 张自萍关键词:甜叶菊 实时荧光定量RT-PCR 乌拉尔甘草离体再生与遗传转化技术的研究 被引量:1 2016年 研究乌拉尔甘草离体再生受体系统和遗传转化技术方法,为甘草基因工程育种提供前期实验基础。以乌拉尔甘草茎段为外植体,试验筛选最适不定芽分化培养基和增殖壮苗培养基;以乌拉尔甘草茎段为受体,利用农杆菌介导法对乌拉尔甘草进行GUS和GFP基因的遗传转化研究。结果表明,以乌拉尔甘草去腋芽茎段为外植体,其不定芽最适分化和增殖培养基配方为MS+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L 6BA+0.1mg/L IBA,不定芽分化率达38.8%,增殖倍数3.67,适宜的壮苗培养基为MS+0.5mg/L NAA。与去腋芽茎段相比,带腋芽茎段的不定芽分化率达100%,能够在含抗生素的选择培养基MS+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L 6BA+0.1mg/L IBA+50mg/L Kan+250mg/L Car上存活,确定为最适转化受体;带腋芽茎段在分化培养基上预培养7d后,经OD_(600)=0.6的菌液侵染10min,共培养3d,在选择培养基上培养20d,其不定芽分化率为43.75%,经GFP荧光检测可得到78.88%的GFP基因瞬时表达率;随机选取5株再生转化植株,经PCR检测,均有GFP和GUS基因的目的条带,GFP基因表达较强烈,初步获得了5个株系的阳性转化植株。 胡海英 张芮 段艳慧 谢应忠关键词:乌拉尔甘草 茎段 不定芽分化 绿色荧光蛋白 用于植物多基因表达载体构建的质粒体系及其应用 本发明公开了一种用于植物多基因表达载体构建的质粒体系及其应用。通过对大肠杆菌质粒载体pUC18和双核农杆菌Ti质粒pBI121进行改造,形成了重组质粒pKAFCR0和pKAFCR100。pKAFCR0具有植物基因表达最常... 陈任 张虹 张芮 周涛 安韶雅文献传递 甜叶菊叶片外植体再生体系的建立 被引量:2 2018年 以甜叶菊品种"中山二号"为试材,首先选用叶片、茎段和茎节3种外植体,在添加3种植物激素萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid,NAA)、苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,BAP)和激动素(kinetin,KT)不同浓度组合的MS(murashige and skoog)培养基上培养,明确其对愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。以叶片作为外植体,使用激素噻苯隆(Nphenyl-N′^(1),2,3-thidiazol-5-yl-urea,TDZ)替换NAA(BAP和KT浓度范围不变),在不同浓度组合的MS培养基上进行愈伤组织、不定芽和丛生芽诱导,以期建立一套快速、有效的甜叶菊再生体系。结果表明:在培养基中TDZ浓度达到3.0mg·L^(1)、BAP 1.0mg·L^(1)和KT0.5mg·L^(1)时,诱导的愈伤组织分化的不定芽最多,且随后形成了大量的丛生芽。丛生芽继代到无添加激素的1/2MS培养基上,能够继续生长,分化成茎叶和根,形成完整植株。该再生体系生产周期短、繁殖系数高,可用于生产上大规模快速繁殖和基因转化研究。 包晗 包晗 张美玲 张芮 陈任关键词:甜叶菊 植物激素 愈伤组织 不定芽 丛生芽 康乃馨‘白雪公主’叶片培养植株再生 被引量:2 2014年 为建立一套快速、有效的康乃馨白色品种的再生体系,以康乃馨‘白雪公主’的幼叶为外植体,对其愈伤组织和不定芽诱导、不定芽伸长和不定根诱导各阶段所需的植物激素、植物材料的影响进行了探讨。结果表明,当叶片外植体的长度为5mm时,在TDZ 0.5mg·L^-1、NAA 0.5mg·L^-1的MS培养基上,愈伤组织和不定芽的诱导效果最为理想;从愈伤组织切下不定芽,移植于单独添加NAA为0.5mg·L^-1的培养基能有效地促进不定芽的伸长;不定芽伸长至3-4cm后,在添加NAA 0.1mg·L^-1的培养基上,不定根分化的数量最多;再生植株经移栽和炼苗后生长状态良好。 吕世佳 张虹 虎娟 张芮 王丽娟 徐宏波 陈任关键词:植物激素 愈伤组织 不定芽 不定根 用于植物多基因表达载体构建的质粒体系及其应用 本发明公开了一种用于植物多基因表达载体构建的质粒体系及其应用。通过对大肠杆菌质粒载体pUC18和双核农杆菌Ti质粒pBI121进行改造,形成了重组质粒pKAFCR0和pKAFCR100。pKAFCR0具有植物基因表达最常... 陈任 张虹 张芮 周涛 安韶雅用于植物多基因表达载体构建的质粒系统 被引量:3 2018年 为克服目前常用于植物基因表达载体构建的质粒由于酶切位点有限,目的基因片段难于插入,缺少植物基因表达所必须的启动子、终止子和筛选标记等功能元件,无法构建多个基因表达载体等缺点,本研究通过对大肠杆菌(Escherichia coli)质粒p UC18和双核农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti(tumer inducing)质粒p BI121进行改造,建立了一套适用于植物基因表达载体构建的质粒系统,即重组质粒p KAFCR80和p KAFCR100。p KAFCR80具有植物基因表达最常用的CAMV 35S启动子(cauliflower mosaic virus 35S promoter)和NOS终止子(Nopaline synthase terminator),并在其上游、中间和下游引入了多个克隆酶切位点,利用PCR等方法克隆得到的目的基因片段可以多种方式连接到35S启动子与NOS终止子之间;p KAFCR100具有卡那霉素NPTⅡ(neomycin phosphotransferaseⅡ)耐性基因和s GFP(synthetic green-fluorescent protein with S65T mutation)绿色荧光蛋白报告基因,以及其中间的多克隆酶切位点。p KAFCR80与p KAFCR100两个质粒的配合使用,可以方便地构建植物单个或多个基因表达载体。本研究以PCR扩增的甜叶菊葡萄糖基转移酶三个基因为材料,利用该质粒系统以单独和组合形式成功地构建了植物表达载体,验证了该系统的实用性。 陈任 陈任 张芮 张虹 周涛 张芮 林哲关键词:多基因表达载体 甜菊醇糖苷生物合成途径关键基因的功能评价 甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)生产的甜菊醇糖苷因其具有高甜度、低热能、不参与人体内代谢兼具保健功能等特点,被誉为最有发展前途的新糖源,具有广泛的应用前景和很高的经济价值。本文利用现代分子生物... 张芮关键词:糖料作物 甜叶菊 生物合成 宁夏盐池县金融扶贫政策实施效果研究 金融扶贫作为现阶段参与式扶贫的重要手段,近年来一直备受国内外学者专家的关注,盐池县金融扶贫模式做为金融扶贫的典型模式获得了国务院的督察表扬并得到了大力宣传和推广,本文利用经济学相关理论以及实际实施效果对盐池县金融扶贫的实... 张芮关键词:金融扶贫 信用建设 借贷资金 文献传递 甜菊醇糖苷生物合成关键基因的导入和鉴定分析 2023年 甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)生产的甜菊醇糖苷因具有高甜度、低热能、不参与人体内代谢兼具保健功能等特点,被誉为最有发展前途的新糖源。从甜叶菊叶片克隆了甜菊醇糖苷生物合成途径中的关键基因SrUGT85C2、SrUGT91D2m和SrUGT76G1,构建植物基因过量表达载体,以单独或组合的形式将这些基因导入到甜叶菊中,获得转基因植株。与野生型对照植株相比,单独导入SrUGT85C2的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量提高,总糖苷、莱包迪苷A含量及占比没有明显变化;单独导入SrUGT91D2m的转基因植株中甜菊醇单糖苷含量显著降低,而甜菊醇双糖苷含量显著增加;单独导入SrUGT76G1的转基因植株中,总糖苷含量显著提高,莱包迪苷A含量达到10%以上,比对照提高了2倍,而甜菊糖苷含量减少了一半。3个基因组合同时导入的转基因甜叶菊植株与单独导入SrUGT76G1的转基因甜叶菊植株类似,其总糖苷、莱包迪苷A含量及其占比均显著提高。这些结果为以后通过分子生物学技术来调控甜菊醇糖苷生物合成关键基因的表达,培育莱包迪苷A含量高的高品质甜叶菊新品系提供了理论依据和技术方法。 张君 张虹 张虹 路国栋 张芮 郎思睿 路国栋关键词:甜叶菊 基因转化