罗成
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 基于Red重组系统进行基因替换的方法建立被引量：1
- 2012年
- 快速、高效替换目的基因是大肠杆菌基因工程菌研究的前提和基础。该试验利用Red重组系统结合基因工程技术替换基因工程菌苗中的氯霉素抗性基因,同时留下半乳糖筛选标记基因,结果在Red重组系统的帮助下成功实现了半乳糖筛选标记基因对氯霉素抗性基因的置换,同时菌苗的其他表型特征未发生任何改变。该方法的建立将为具有新遗传特性的工程菌株和基因功能研究提供有力的工具。
- 黄晓萍郭建军钟青罗成
- 关键词：RED重组系统
- 新城疫病毒F48E9株F-HN蛋白融合基因在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2011年
- 利用重叠PCR技术拼接新城疫病毒F蛋白基因和HN蛋白基因,并将构建好的融合基因克隆到载体pET28a,经测序后融合基因插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOXⅠ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白F-HN。重组质粒pPIC9K-F-HN经SacⅠ线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,经G418筛选得到转化子。PCR扩增鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,目的蛋白为分泌性表达,分子量约为86.5 ku;Western-blot结果表明融合蛋白具有良好的免疫反应性,为下一步研究高效亚单位基因工程苗奠定基础。
- 郭建军范汉东杨一兵罗成
- 关键词：新城疫病毒毕赤酵母
