郝一妹
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 猪唾液酸黏附素氨基端结构域基因的克隆表达及其多克隆抗体制备被引量：4
- 2012年
- 本试验旨在克隆出猪唾液酸黏附素的近氨基端结构域基因,进而构建原核表达载体并诱导表达重组蛋白,以制备多克隆抗体。试验中应用RT-PCR技术从健康仔猪肺巨噬细胞中克隆出猪唾液酸黏附素的近氨基端结构域的cDNA序列,并将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-Sn150,成功表达了分子质量大小约为43.1ku的γ亚单位重组蛋白。将重组蛋白pET-Sn150免疫小鼠,制备获得鼠抗pET-Sn150重组蛋白多克隆抗体,将得到的重组蛋白多克隆抗体采用间接ELISA和Western blotting试验方法检测,ELISA测定多克隆抗体的血清效价为1∶12800;Western blotting试验结果证明,制备的鼠抗pET-Sn150多克隆抗体可以与重组蛋白进行特异性结合,从而证明重组蛋白具有较好的免疫原性。本试验克隆出猪唾液酸黏附素的近氨基端结构域基因并成功表达,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。
- 张继希张志远张宜娜周永辉张祥郝一妹张元元夏平安崔保安
- 关键词：克隆原核表达多克隆抗体
