高伟
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
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- 损毁外侧丘系背核对耳鸣小鼠下丘GAD67/NR2A表达的影响
- 2023年
- 目的探讨外侧丘系背核(dorsal nuclei of lateral lemniscus,DNLL)在耳鸣发生中的作用及可能机制。方法选取听力正常的雄性C57B/6小鼠24只,随机分为4组,每组6只。A组每天腹腔注射水杨酸钠350 mg/kg,连续14 d;B组同A组法注射等量生理盐水;C组脑立体定位仪下右侧DNLL内注射10 mmol/L的红藻氨酸0.25μl造成化学损毁;D组同C组法注射等量生理盐水。处理前后检测各组小鼠ABR阈值、旷场、高架十字、强迫游泳、声刺激-跳杆反射等行为学指标;并于处理后第14 d,用Western blot法检测各组下丘组织中谷氨酸脱羧酶67(GAD67)、N-甲基-D-天冬氨酸受体2A(NR2A)的表达含量。结果与处理前相比较,处理后①ABR:A组小鼠纯音32、16、8 kHz和click声反应阈值均明显升高(P<0.05),C组小鼠纯音32、16 kHz反应阈值显著升高(P<0.05),B组和D组反应阈值未见明显变化;②行为学:A组和C组小鼠旷场及高架十字迷宫行为指标均明显减少,强迫游泳中不动时间明显增加,声刺激-跳杆反射中假阳性次数明显增加(P<0.05);而B组和D组上述行为学指标均无明显改变;③Western blot:A组小鼠下丘组织中GAD67表达明显降低,NR2A明显升高;C组小鼠DNLL损毁侧GAD67表达明显降低,NR2A无明显变化;DNLL未损毁侧NR2A表达明显升高,而GAD67无明显变化。结论损毁DNLL可以导致小鼠耳鸣,其机制可能是通过减少对下丘抑制性神经递质的输入以下调下丘中GAD67的表达、同时上调NR2A的表达而实现的。
- 邬信芳马春蕾王雁鹏顾晓孙文凯孙卉高伟李钦
- 关键词:耳鸣下丘NR2A
- 实时荧光定量RT-PCR检测STAT3 mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达被引量:2
- 2015年
- 目的采用实时荧光定量RT-PCR检测STAT3mRNA在食管鳞状细胞癌癌组织及癌旁正常组织中的表达水平,研究食管鳞状细胞癌STAT3mRNA与临床病理特征的关系。方法对100例食管鳞状细胞癌患者术后肿瘤组织及癌旁正常食管粘膜组织采用实时荧光定量RT-PCR方法检测STAT3 mRNA表达,分析其在二者中的表达及其与临床病理特征的关系。结果STAT3mRNA在癌组织中的表达(0.0027±0.0064)是癌旁正常组织(0.0014±.0031)的2倍;存在显著性差异,(P<0.05)。STAT3mRNA表达与淋巴结转移(t=2.970 P<0.05)和分化程度(t=5.936 P<0.05)相关,与临床分期、浸润深度、肿瘤大小无明显相关(P>0.05)。结论实时荧光定量RT-PCR技术可准确可靠地反映各靶基因的表达倍数;在食管鳞状细胞癌组织中STAT3mRNA的表达高于癌旁正常组织,是正常组织的2倍,证实STAT3在食管鳞状细胞癌的发生发展中发挥着重要作用,STAT3mRNA的表达与淋巴结转移和分化程度相关。
- 彭海英马育华高伟
- 关键词:鳞状细胞癌食管STAT3实时荧光定量RT-PCR
- 胰岛再生源蛋白3A对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响及机制
- 2023年
- 目的探讨胰岛再生源蛋白3A(REG3A)对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响及其分子作用机制。方法收集2017年10月17日至2018年10月18日于临沂市人民医院行手术治疗的10例胶质瘤患者的癌及癌旁组织,低级别和高级别胶质瘤各5例。体外培养不同胶质瘤细胞株(SF295、U251、TG905、A172和CRT)及原代胶质瘤细胞株PT1,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测组织标本及各细胞株中REG3A的mRNA和蛋白表达水平。通过脂质体转染si-REG3A至TG905细胞敲低REG3A的表达,通过慢病毒包装REG3A质粒感染SF295细胞上调REG3A的表达,使用REG3A重组蛋白和Akt抑制剂单独或联合处理胶质瘤细胞,采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测细胞中N-cadherin、vimentin和磷酸化Akt(p-Akt)的表达情况。结果实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)结果显示,U251、TG905、CRT、A172和PT-1细胞中REG3AmRNA的表达水平分别为2.129±0.13、2.22±0.59、5.02±0.31、6.62±1.34和9.18±0.61,高于SF295细胞(1.00±0.18,均P<0.001)。高级别胶质瘤组织中REG3AmRNA的表达水平为3.18±2.92,高于癌旁组织(1.00±1.14,P=0.031)和低级别胶质瘤组织(0.90±0.67,P=0.014)。Western blot和免疫组化检测结果与RT-qPCR结果一致。si-REG3A组TG905细胞的迁移率为(60.57±5.30)%,低于空白对照组[(79.65±12.09)%,P=0.076]和si-NC组[(84.18±13.63)%,P=0.038]。REG3A质粒转染组SF295细胞的迁移率为(96.05±6.41)%,高于空载转染组[(74.47±8.23)%,P=0.021]。REG3A重组蛋白能够上调SF295细胞中N-cadherin、vimentin和p-Akt的表达。与对照组[(100.00±2.53)%]相比,REG3A重组蛋白组的增殖率[(117.70±10.24)%]明显提高,REG3A重组蛋白+Akt抑制剂组的增殖率[(98.31±3.64)%]明显低于REG3A重组蛋白组(P=0.017)。REG3A重组蛋白+Akt抑制剂组的迁移率为(63.35±4.06)%,低于REG3A重组蛋白组[(89.26±11.07)%,P=0.019]。结论REG3A能够通�
- 全艳春王利莹王增勇高伟车峰远
- 关键词:胶质瘤细胞增殖细胞迁移
- 外周血中MicroRNA-9与MicroRNA-99a联合检测用于子宫内膜癌的诊断研究
- 2020年
- 目的:研究外周血中MicroRNA-9与MicroRNA-99a联合检测对子宫内膜癌(Endometrial carcinoma,EC)的诊断价值。方法:通过实时荧光定量RT-PCR方法检测35例子宫内膜癌患者和35例正常对照外周血中MicroRNA-9与MicroRNA-99a的表达,建立ROC曲线分析二者联合检测对子宫内膜癌的诊断意义。结果:MicroRNA-9在子宫内膜癌患者外周血中与正常对照相比表达降低,正常对照的相对表达量约为子宫内膜癌患者的1.78倍(P<0.05)。MicroRNA-99a在子宫内膜癌患者外周血中与正常对照相比表达升高,子宫内膜癌患者的相对表达量约为正常对照的2.05倍(P<0.05)。外周血中MicroRNA-9与MicroRNA-99a可以区分子宫内膜癌患者和正常人群(AUC:0.79,95%CI:0.70~0.90,AUC:0.79,95%CI:0.68~0.90)。MicroRNA-9与MicroRNA-99a联合检测鉴别子宫内膜癌患者更准确(AUC:0.98,95%CI:0.93~1.00)。结论:外周血中MicroRNA-9与MicroRNA-99a联合检测对子宫内膜癌诊断方法研究具有重要意义。
- 刘丽高伟
- 关键词:子宫内膜癌
- 非小细胞肺癌组织中DEC1 mRNA、DEC2 mRNA表达及意义被引量:7
- 2016年
- 目的探讨非小细胞肺癌组织中分化型胚胎软骨发育基因1(DEC1)mRNA和DEC2 mRNA表达变化及意义。方法收集42例非小细胞肺癌患者的癌组织标本,28例癌旁正常组织标本;采用实时RT-PCR法检测两种组织标本中DEC1 mRNA、DEC2 mRNA的相对表达量;分析DEC1 mRNA、DEC2 mRNA表达与非小细胞肺癌患者临床病理参数的关系。结果 DEC1在非小细胞肺癌组织中相对表达量为0.045 6,正常组织为0.001 7;DEC2 mRNA在非小细胞肺癌组织中的相对表达量为0.056 6,正常组织为0.000 9;两组比较P均<0.05。DEC1 mRNA、DEC2mRNA表达与非小细胞肺癌患者性别、年龄、肿瘤直径、分化程度和TNM分期均无关(P均>0.05);DEC1 mRNA、DEC2 mRNA在腺癌中的相对表达量均高于鳞癌(P均<0.05)。非小细胞肺癌组织中DEC1 mRNA、DEC2 mRNA表达呈正相关(r=0.691,P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中DEC1、DEC2过表达,二者的表达变化可能参与非小细胞肺癌的发生和发展。
- 马育华彭海英王志蕙高伟汪运山