黄世平
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：国家大学生创新性实验计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 盐胁迫下盐穗木miR393b与预测靶基因Hc TIR1的表达及相关性
- 2019年
- 【目的】研究盐胁迫下盐穗木生长素通路中miR393b和预测的靶基因 TIR1 的表达模式和相关性。【方法】采用生物信息学方法预测盐穗木miR393b的靶基因;通过qRT-PCR方法检测盐胁迫下盐穗木miR393b及预测靶基因 HcTIR1 ( transport inhibitor response1 )的相对表达模式,并分析其相关性。【结果】 miR393b成熟体在不同植物种中高度保守;盐穗木miR393b预测的靶基因为 TIR1;盐胁迫处理,盐穗木同化枝中两基因响应高盐胁迫,并具有一定的负相关性。【结论】盐穗木miR393b和预测的靶基因响应高盐胁迫,二者具有一定的负相关。该结果为进一步探讨盐穗木miR393b与预测靶基因 TIR1 的生物学功能奠定基础。
- 王鹏举黄世平杨瑞瑞曾幼玲
- 关键词：盐穗木盐胁迫
- 盐穗木miR167d和预测靶基因ARF8在盐胁迫下的表达与相关性分析被引量：2
- 2018年
- 【目的】盐穗木(Halostachys caspica)是一种藜科多年生盐生灌木,对盐分适应性极强。miR167是作用于生长素信号通路上的内源非编码小RNA分子,它通过靶向生长素响应因子ARFs(auxin response factors)来调控生长素响应基因的表达。研究从高盐(600 mmol/L NaCl)处理48 h盐穗木根的小RNA文库中筛选到差异表达的miR167d,并从该物种的转录组数据中预测到其靶基因ARF8。该文开展了高盐胁迫下盐穗木miR167d和预测靶基因ARF8的表达模式和相关性分析。【方法】通过荧光定量PCR试验检测和分析高盐胁迫下盐穗木miR167d和预测靶基因的表达模式和相关性;利用烟草瞬时表达试验间接地鉴定盐穗木miR167d对预测靶基因ARF8的靶向关系;采用同源克隆方法结合RACE技术获得盐穗木miR167d的靶基因ARF8的全长序列,并进行生物信息学分析。【结果】(1) 600 mmol/L NaCl处理盐穗木,其同化枝中miR167d和ARF8的表达均受到诱导,胁迫48 h时,miR167d的表达最高并与靶基因的表达呈现显著的负相关性,HcARF8基因的表达随胁迫处理时间的延长呈现先增加后下降的趋势,推测盐穗木miR167d和ARF8两基因可能在响应盐胁迫过程中发挥作用。(2)构建融合GFP的含预测靶基因HcARF8的植物表达载体并转化农杆菌,烟草瞬时表达试验的结果表明,拟南芥miR167d对盐穗木ARF8基因具有剪切作用,间接证明盐穗木miR167d对预测的靶基因HcARF8具有靶向切割作用。(3)克隆获得的盐穗木ARF8基因全长2 861 bp,ORF 2 442 bp,编码813个氨基酸,在编码区与盐穗木miR167d高度互补匹配。生物信息学分析该基因编码的蛋白高度保守,与同科植物甜菜ARF8同源性达到87%,都具有能与生长素相关元件(B3 DNA绑定元件、生长素响应元件,生长素诱导转录IAA超家族的元件)结合的功能域。【结论】盐穗木miR167d和HcARF8基因具有靶向关系,高盐胁迫处理盐穗木,其同化枝中两基因的表达�
- 张慧珍黄世平杨瑞瑞曾幼玲
- 关键词：盐穗木盐胁迫
- 植物醛脱氢酶在逆境胁迫中的研究进展被引量：6
- 2015年
- 干旱、盐和病虫害等逆境胁迫已成为制约植物生长和作物产量的主要因素。植物在生长过程中进化出从形态到生理的一系列机制以缓解胁迫对自身的损害。逆境胁迫下醛类物质的富集会产生一系列的过氧化链式反应,危害细胞膜系统正常生理功能。过量的醛也会与蛋白质和核酸反应,破坏蛋白质和核酸的正常结构和功能,甚至直接导致植物死亡。植物体内醛脱氢酶基因(Aldehyde dehydrogenase,ALDH)在胁迫诱导条件下表达水平增加,大量累积的醛脱氢酶蛋白(ALDHs)将醛物质氧化成相应的羧酸,减少脂类物质的过氧化,参与到植物对生物及非生物的胁迫以及植物的发育调节。从ALDH的分类、功能及作用途径展开详细论述。
- 黄世平曾幼玲
- 关键词：逆境胁迫
- 盐穗木醛脱氢酶基因HcALDH7A1原核表达载体的构建及蛋白诱导表达与优化被引量：1
- 2015年
- 【目的】为构建盐穗木盐响应基因Hc ALDH7A1的原核表达载体并进行外源基因的诱导表达和优化。【方法】以实验室已构建好的p m D18-T Si mple-Hc ALDH7A1/DH5α(Pst I,Sac I)重组载体中盐穗木醛脱氢酶基因(Hc ALDH7A1)为模板,设计带有酶切位点(EcoR I,Xho I)的引物通过PCR扩增亚克隆到p m D18-T Si mple vector中,测序鉴定正确后,通过EcoR I和Xho I双酶切,构建重组的原核表达载体p ET28aHc ALDH7A1。将鉴定正确的重组质粒转化到大肠杆菌Transetta(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白表达,并对其表达体系进行优化。【结果】成功构建盐穗木醛脱氢酶基因Hc ALDH7A1的原核表达载体,诱导Hc ALDH7A1外源基因表达蛋白优化的最佳条件为IPTG终浓度为0.6 mmol/L,30℃诱导时间为4 h。融合蛋白分子量大小为61 k D。【结论】成功在大肠杆菌体内诱导表达盐穗木醛脱氢酶Hc ALDH7A1基因,并明确目的蛋白的最佳表达条件。为后续在原核表达系统大肠杆菌细胞中探索盐穗木Hc ALDH7A1的生物和非生物胁迫的功能奠定了基础。
- 黄世平戴玲玲宋策曾幼玲
- 关键词：盐穗木原核表达
