刘桂如
- 作品数：1 被引量：15H指数：1
- 供职机构：河北农业大学农学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 小麦芽生长点的基因枪转化技术研究被引量：15
- 2009年
- 为建立简易的不依赖组织培养和抗性筛选的小麦转基因技术,以小麦品种石4185为对象,以gus和badh/bar为外源基因,围绕适于基因枪转化的种子芽生长点受体的制备、基因枪轰击参数的优化等开展了试验,建立了＂用解剖刀去除种子根、用镊子把芽鞘掰去、用镊尖扫去包盖生长点的未展开叶、将带生长点的部分与胚乳分离＂为特点的受体制备方法;确定1100 Psi＋9 cm为最佳轰击参数组合。对轰击后的小麦芽生长点（70个×3批）进行gus基因瞬时表达检测,以受体数统计时,转化率为22.9%-35.7%;以生长点数统计时,转化率为5.7%-8.6%。用含badh/bar的pABH9质粒转化1000个受体,发育成了802个T0植株,对T0植株所结种子长成的穗行喷200 mg/kg的PPT进行抗性筛选,获得了105个抗性株,究其来源为42个T0株,由此计算抗性率为5.2%。用PCR检测T1植株,6个呈阳性。初步建立了基因枪法转化小麦种子芽生长点的技术。
- 董福双张艳敏杨帆梁新朝刘桂如王海波
- 关键词：小麦基因枪
