李田田
- 作品数：6 被引量：28H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牛群爆发口腔黏膜溃疡类疾病的实验室诊断被引量：6
- 2015年
- 牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎和牛恶性卡他热能引起牛出现呼吸道、消化道症状,通过临床症状很难鉴别诊断。2014年8月,大庆市某牛场爆发了以口腔黏膜溃疡为特征的传染病。通过PCR和基因测序方法对上述疑似牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎和牛恶性卡他热的病例进行了鉴别诊断,结果确诊牛恶性卡他热是造成该牛群爆发疫病的主要病因,为该病的防治提供了理论依据。
- 邢思毅倪宏波周玉龙常春龙常敬伟李田田王士霞
- 关键词：牛病毒性腹泻牛恶性卡他热巢式PCR
- 牛副结核分枝杆菌的分离及鉴定被引量：10
- 2018年
- 为进一步确定新疆某奶牛场疑似感染副结核病的病原菌,本研究采集了37头疑似患病奶牛的直肠刮取物,应用卵黄琼脂培养基对其进行分枝杆菌的分离培养,经菌落形态观察、抗酸染色以及多重PCR等方法对分离菌进行病原学鉴定,并利用副结核分枝杆菌亚型鉴定引物进行PCR扩增及测序分析。结果显示,分离培养的7株分离菌均为抗酸染色阳性的分枝杆菌;经多重PCR鉴定,其中3株谱型与副结核分枝杆菌k10参考株一致;进一步通过基因分型的PCR扩增及测序分析,确定这3株分离菌均为牛副结核分枝杆菌。本研究为进一步开展该菌病原学和流行病学研究提供了必要的研究资料。
- 刘虹秀程玉笛党光辉李田田李鹤崔子寅宋宁宁陈利苹刘思国
- 关键词：副结核分枝杆菌多重PCR亚型鉴定
- 犬细小病毒VP2基因的生物信息学分析被引量：2
- 2015年
- 近年来，随着我国饲养宠物的人群迅速扩大，宠物疾病严重危害这个群体的健康。张晋等人对2007年北京地区犬的流行病发病情况进行了统计分析，结果表明，犬细小病毒病是北京地区犬病毒病中最主要的流行病。
- 李田田张俊峰靳玉舒高鹏飞
- 关键词：犬细小病毒病VP2基因生物信息学分发病情况流行病
- BVDV P7蛋白的原核表达及其生物信息学分析被引量：3
- 2016年
- 为了对BVDV-1 P7蛋白进行原核表达及生物信息学分析,采用RT-PCR的方法扩增BVDV NADL株BVDV-1 P7的ORF,扩增产物经Bam H I、Sal I双酶切后插入原核表达载体p EGX4T-1(+),构建P7基因原核表达载体并将其转化至工程菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,并对其进行生物信息学预测。结果表明,成功扩增并构建了BVDV NADL株的BVDV-1 P7原核表达载体,命名p EGX4T-1-P7。SDS-PAGE和Western blot表明,在分子质量34 k Da的位置出现与预期大小一致的蛋白条带;生物信息学结果表明在P7蛋白有信号肽,存在疏水区。该研究成功的表达了P7蛋白,该蛋白是一个疏水性蛋白,为其进一步的功能研究奠定了坚实的基础。
- 李田田翟军军倪宏波
- 关键词：BVDV原核表达生物信息学
- 牛病毒性腹泻/黏膜病毒抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2016年
- 为建立一种检测牛病毒性腹泻、黏膜病病毒抗体的间接ELISA方法,利用昆虫细胞真核表达系统成功表达E2蛋白并纯化,使用纯化后的蛋白作为包被抗原。确定最佳抗原包被浓度为6μg·m L-1,最佳血清稀释度为1∶80,最佳包被液为碳酸缓冲液,最佳盐封闭液为5%脱脂乳,最佳血清作用时间为60 min,酶标抗体作用最佳浓度为1∶10 000;最佳底物作用时间为5 min,阳性临界值为D450 nm≥0.282。与IDEXX的BVDV间接ELISA试剂盒比较,总符合率为91.5%,板内和板间重复性试验变异系数均小于10%。该方法与牛副流感病毒Ⅲ型、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛冠状病毒阳性血清无交叉反应。因此,该ELISA诊断方法可用于大批量样本抗体水平监测和流行病学调查。
- 常敬伟邢思毅常春龙毕莹王士霞李田田周玉龙倪宏波
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白间接ELISA
- 与结核分枝杆菌PE25/PPE41和PE35/PPE68相互作用的宿主蛋白的筛选被引量：1
- 2017年
- 为筛选与结核分枝杆菌(MTB)的PE25/PPE41和PE35/PPE68两对异源二聚体相互作用的宿主蛋白,本研究以这两对异源二聚体为诱饵蛋白筛选与其相互作用的宿主蛋白。首先将PCR扩增的PE25/PPE41或PE35/PPE68基因串联克隆于改造的pc DNA3.1(+)中(在5'端引入了以编码烟草蚀纹病毒蛋白酶切位点的序列连接的ZZ和Flag标签序列),构建诱饵重组质粒pcDNA-PE25-PPE41和pc DNA-PE35-PPE68。分别将构建的诱饵重组质粒转染293T细胞后提取细胞总蛋白,经ZZ和Flag标签蛋白两步串联亲和层析钓取宿主蛋白,SDS-PAGE电泳分离后切取差异蛋白胶条进行质谱分析,结果显示,PE25/PPE41鉴定到15个差异蛋白,PE35/PPE68鉴定到29个差异蛋白,并分别挑选了与PE25/PPE41和PE35/PPE68相互作用的3个和7个差异蛋白,为进一步验证与PE25/PPE41和PE35/PPE68直接作用的宿主蛋白及研究其生物学功能奠定了基础。
- 李田田陈利苹刘思国
- 关键词：结核分枝杆菌串联亲和纯化
