王建霞
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金河北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律农业科学环境科学与工程更多>>
- 抗人SMCY抗原胶体金试纸条的研制
- 2018年
- 目的建立一种快速检测SMCY抗原的方法。方法采用胶体金免疫层析技术双抗体夹心检测法,在金标垫上包被胶体金标记的SMCY兔多抗,制成胶体金试纸条,用于检测12份猪、牛、狗、鸡和小鼠等动物血清以及50份人血清。结果制作的胶体金试纸条检测人和常见动物血清具有明显的种属特异性,能够区分男女血清。结论该方法可尝试用于鉴别男女血清,并具有一定种属特异性,其为法医学快速鉴别人类样本性别提供了研究方向。
- 安志远周怀谷王建霞冯晓燕赵东
- 关键词：法医物证学性别鉴定胶体金
- 艰难梭菌tcdC基因的研究进展
- 2016年
- 致病型艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)分泌的Tcd A和Tcd B毒素是主要的毒力因子,其基因表达受到致病性决定区(pathogenicity locus,Pa Loc)基因簇中多个因子调控。有研究表明,Pa Loc中tcd C基因有可能编码一种对tcd A和tcd B基因表达具有负调控作用的蛋白因子,但也有研究结果与上述结论不同。关于tcd C基因功能尚存争论,其在致病过程中的作用机制仍不明确。该文主要针对艰难梭菌tcd C基因结构、功能等方面进行了综述,为进一步深入研究CD的致病机制并探索新的药物治疗靶点奠定理论基础。
- 王建霞王宏伟冯晓燕金大智
- 关键词：艰难梭菌毒力
- SMCY性别特异融合抗原的克隆表达及其抗体制备被引量：1
- 2017年
- 目的利用蛋白检测的快速性优势,研究不同性别在SMCY抗原氨基酸序列的差异,筛选出特异性氨基酸序列,并克隆表达性别特异融合抗原,制备相应抗体,建立一种快速鉴别法医物证性别的方法。方法通过对人SMCY和SMCX进行序列分析,发现了三段差异片段,采用搭桥PCR方法获得差异片段全长基因,连接入p ET-28a载体进行原核表达,用Ni柱纯化后的性别特异融合抗原免疫制备多克隆抗体,用ELISA法和western blot检测SMCY多抗与抗原的反应特异性,制作胶体金试纸条检测样本。结果筛选出具有性别特异性的氨基酸序列,获得SMCY性别特异融合抗原,成功制备出多克隆抗体及胶体金试纸条。结论获得SMCY性别特异融合抗原具有很好的抗原活性,制备的多克隆抗体可以与抗原特异性地结合,用于性别鉴定。
- 安志远田露王建霞冯晓燕唐建平陈新陈荣华毕钢肖雄邱志军胡寅周文斌周怀谷
- 关键词：法医物证学性别鉴定
- 艰难梭菌毒素C蛋白的克隆表达和抗体制备
- 2017年
- 目的克隆艰难梭菌毒素C(tcdC)基因并构建TcdC蛋白的原核表达载体,制备多克隆抗体。方法从艰难梭菌标准株(ATCC43255)基因组DNA中扩增获得tcdC基因的部分片段,连接到原核表达载体并转化到大肠杆菌中,诱导表达GST-TcdC/L和IL1-TcdC/L融合蛋白,前者用作免疫抗原,后者用作检测抗原。采用SDS-PAGE法鉴定融合蛋白的表达,并通过Ni柱纯化IL1-TcdC/L融合蛋白,Q柱纯化GST-TcdC/L融合蛋白。将纯化的GST-TcdC/L融合蛋白于兔背部皮内多点注射,每只1 mg,4周1次,共3次。最后1次免疫后2周,采血分离血清。用IL1-TcdC/L蛋白包被酶联板,采用ELISA法检测多抗血清效价;Western蛋白印迹法检测多抗特异性,结果 SDS-PAGE结果表明,所表达的2个融合蛋白与预期分子质量一致。ELISA结果显示,制备的TcdC多克隆抗体效价>1:6.4×10~4。Western蛋白印迹实验显示,制备的TcdC/L多克隆抗体能特异性识别艰难梭菌中的TcdC蛋白。结论成功克隆了艰难梭菌tcdC/L基因并进行了原核表达,成功制备了其多克隆抗体,为后续研究tcdC基因在艰难梭菌致病过程中的作用及机制奠定了基础。
- 王建霞王宏伟杨锡琴黄忱罗芸金大智冯晓燕张贺秋
- 关键词：艰难梭菌多克隆抗体
- 壬基酚对中华新米虾几种生化指标的影响被引量：2
- 2017年
- 中华新米虾（Neocaridina denticulata sinensis）属于甲壳纲,十足目,匙指虾科,米虾属。中华新米虾是一种小型淡水虾类,具有生长迅速,生命力顽强,对环境的适应能力较强,生长周期短,容易饲养等优点,是一种优良的实验材料。壬基酚（nonylphenol,NP）被广泛用于非离子润滑油添加剂、表面活性剂、洗涤剂等,因而也成为重要的环境污染物。
- 王建霞李林锋赵文博王亚欣孙绍永赵春龙王宏伟
- 关键词：壬基酚米虾属雌激素样作用淡水虾类十足目氧化损伤作用
- 艰难梭菌谷氨酸脱氢酶的表达及抗原性分析被引量：1
- 2016年
- 目的构建艰难梭菌(CD)谷氨酸脱氢酶(GDH)的原核表达载体,表达重组蛋白并鉴定其抗原活性。方法以CD的ATCC43255菌株基因组DNA为模板,通过PCR法扩增GDH全长基因片段,构建原核表达载体并转化到大肠杆菌中,IPTG诱导表达GDH蛋白,并用Ni柱进行纯化。利用CD抗原检测试剂盒对GDH抗原区段的抗原性进行鉴定。结果构建的原核表达载体p ET-28a/GDH可在大肠杆菌中成功表达,获得的GDH抗原能与相应抗体产生特异性反应。结论原核表达的CD的GDH抗原具有很好的抗原活性,为进一步制备相应抗体并建立CD的GDH抗原的免疫检测方法奠定了基础。
- 王建霞杨锡琴金大智黄忱罗芸宋晓国王宏伟冯晓燕张贺秋
- 关键词：艰难梭菌谷氨酸脱氢酶原核表达
