- 新型拓扑异构酶抑制剂抗肿瘤活性及其机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的拓扑异构酶是近年来发现的多种肿瘤化疗的重要靶点,与肿瘤细胞的发生、增殖和发展密切相关。本研究分析两种新型拓扑酶抑制剂的体外抗肿瘤活性,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测两种受试物对人肿瘤细胞增殖的抑制作用;质粒pBR322解旋反应检测抑制剂对TopoⅠ催化活性的影响,蛋白质印迹法检测细胞中TopoⅠ和TopoⅡ的蛋白表达变化;Hoechst 33258荧光染色、AO荧光染色、彗星实验和流式细胞术等方法观察两种受试物对HEp-2细胞凋亡和细胞周期的影响。结果 MTT法的结果显示,受试物1和2对9种人肿瘤细胞株均有显著的抗肿瘤活性(P<0.05),并呈现浓度依赖性;受试物1和2可抑制TopoⅠ介导的质粒DNA超螺旋的解旋,并且两种受试物都可下调细胞中TopoⅠ、Ⅱ的蛋白表达,P<0.05;Hoechst 33258荧光染色表明受试物可诱导HEp-2细胞凋亡,AO染色也得到相同的结果;彗星实验检测出两种受试物可导致DNA损伤;流式细胞仪检测的结果表明,处理组的细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),并且,受试物1使HEp-2细胞周期在S期和G2/M期发生阻滞(P<0.01),而受试物2使其阻滞在G1期(72h),P<0.05;蛋白质印迹法结果显示促凋亡蛋白Bid、Bax和JNK表达增加(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少(P<0.01),细胞周期蛋白Cyclin B1和Cyclin D1表达减少(P<0.05)。结论受试物1和2可以抑制HEp-2细胞的生长,这可能与以下机制有关:通过抑制TopoⅠ的催化活性并下调细胞中TopoⅠ和TopoⅡ的表达;调控凋亡相关基因的表达,诱导其凋亡;造成肿瘤细胞周期紊乱,促进凋亡。
- 陈列松虞莹王攀王文娟梁中琴
- 关键词：细胞凋亡细胞周期
