王琳琳
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 凋亡抑制因子Survivin siRNA荧光表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 目的构建靶向survivin siRNA真核表达质粒载体,通过RNA干扰技术阻断survivin基因的表达。方法针对目的基因survivin序列设计双链DNA(dsDNA),采用DNA重组技术与载体连接,转化感受态细胞经诱导表达筛选阳性克隆子。结果重组质粒经酶切、测序鉴定,证实插入载体目的基因片段大小与插入方向正确,且转染至肿瘤细胞,可见其发出绿色荧光,转染率为70%-80%。结论靶向survivin-siRNA真核表达载体pGU6/GFP/Neo/survivin-siRNA可用于转染肿瘤细胞、阻断survivin基因表达并诱导细胞凋亡的RNA i实验研究,为肿瘤的基因治疗奠定一定的基础。
- 唐薇薇郑洪王琳琳厉国慧岳昌武姚宁
- 关键词：SURVIVIN基因重组RNAI
- livin基因沉默对人恶性黑素瘤A375细胞周期和凋亡的影响被引量：6
- 2009年
- 目的:探讨小干扰RNA(small interfening RNA,siRNA)沉默livin基因对人恶性黑素瘤A375细胞周期和凋亡的影响。方法:构建2个针对人源livin基因的siRNA表达质粒,并通过脂质体介导转染人恶性黑素瘤A375细胞株,利用荧光定量PCR检测livin mRNA的表达情况,AnnexinⅤ-PE FCM法检测A375细胞凋亡情况,PI单染FCM法检测细胞周期情况。结果:成功构建livin siRNA表达质粒,转染siRNA-1和siRNA-2后48h的A375细胞中livin mRNA表达量较空白对照组分别下降17%和42%,72h分别下降71%和61%。转染siRNA-1和siRNA-2后48h的A375细胞凋亡率(29.45%和33.25%)及72h细胞凋亡率(33.52%和38.18%)均高于空白组(7.95%和9.70%)(P<0.05)。siRNA-2可引起G0/G1期升高,S期下降(P<0.05),siRNA-1作用不明显(P>0.05)。结论:siRNA-1、2体外均能有效抑制livin mRNA的转录,促进人恶性黑素瘤A375细胞凋亡。siRNA-2表达质粒能使人恶性黑素瘤A375细胞周期出现G/G期阻滞,细胞增殖受到抑制。
- 王琳琳郑洪唐薇薇厉国慧安文波
- 关键词：黑色素瘤细胞周期基因LIVIN
