陈青
- 作品数：15 被引量：44H指数：4
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生历史地理生物学更多>>
- 白念珠菌诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞焦亡的初步研究
- 2023年
- 目的探讨白念珠菌对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)焦亡的影响。方法通过活细胞工作站实时观察白念珠菌[感染复数(MOI)=50,下同]体外诱导BMDM后是否发生焦亡;将BMDM分为对照组、白念珠菌组,分别用磷酸盐缓冲液和白念珠菌酵母诱导BMDM 6 h,实时荧光定量PCR检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18 mRNA表达水平,Western印迹法检测NLRP3、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)的表达及剪切水平。用白念珠菌诱导BMDM不同时间(0、10、15、20及25 h)后,酶联免疫吸附试验检测IL-1β、IL-18分泌水平。白念珠菌体外诱导野生型(WT)BMDM及GSDMD敲除(KO)BMDM 15 min,采用流式细胞仪比较WT、GSDMD KO BMDM对白念珠菌的吞噬率;诱导6 h后,采用流式细胞仪及乳酸脱氢酶(LDH)释放法分别检测WT、GSDMD KO BMDM的死亡率。分别设置空白对照组、对照组、样品最大酶活性对照孔组、IL-1β组、白念珠菌组、IL-1β+白念珠菌组,用IL-1β和/或白念珠菌酵母诱导BMDM后用LDH释放法分析WT及GSDMD KO BMDM死亡率。采用非配对t检验、Kruskal-Wallis检验、方差分析等统计学方法进行统计分析。结果白念珠菌体外诱导BMDM后细胞可出现气球样变及出泡现象,证实焦亡发生;与对照组相比,白念珠菌组诱导BMDM 6 h后NLRP3、IL-1β的mRNA表达水平明显升高(t=13.02、17.51,P=或<0.001),而IL-18 mRNA表达水平无明显变化(P=0.486),且白念珠菌诱导可引起炎症小体NLRP3表达增多及Caspase-1、GSDMD剪切。白念珠菌诱导BMDM不同时间(0、10、15、20及25 h)后IL-1β的分泌水平随时间逐渐升高(H=12.90,P=0.012),而IL-18的分泌水平无明显变化(F=0.48,P=0.753),且GSDMD KO组BMDM的IL-1β分泌水平低于WT BMDM组(F=24.22,P=0.008)。白念珠菌体外诱导15 min后,GSDMD KO BMDM[(50.3±1.10)%]对白念珠菌的吞噬率低于WT BMDM[(58.53±1.19)%,t=5.09,P=0.007];白念珠菌体外诱导6 h后,流式细胞仪�
- 杨璐段志敏何艳艳王嘉宁陈青陈青李岷
- 关键词：白色念珠菌巨噬细胞白细胞介素1Β白细胞介素18
- 基因分型技术在ABO放散型亚型鉴定中的应用
- 2022年
- 目的分析血清学表型为或疑似放散型亚型的10例样本ABO基因序列,探讨Ael/Bel型用血策略,为临床安全输血提供依据。方法采用常规血型血清学方法对10例样本进行ABO表型鉴定,PCR技术扩增ABO基因第1~7外显子、上游CBF/NF-Y增强子区域、启动子及内含子1的+5.8 kb红细胞特异性调控元件序列,并对扩增产物进行序列分析。结果10例样本血清学表型均为或疑似放散型亚型,经ABO基因测序分析有5例AEL,ABO基因型分别为ABO*AEL.02/O.01.01(2例)、ABO*AEL.08/O.01.01(1例)和ABO*AEL.02/O.01.02(2例);5例BEL的ABO基因型为ABO*BEL.03/O.01.02。结论放散型是血清学检测较难发现的ABO亚型,通过分子生物学技术能精准鉴定其基因型。通过对放散型亚型的基因型定型,能够指导临床采取安全有效的输血策略。
- 张若洋杨东冯晨晨史丽莉李慧薛敏丁文艺陈青
- 关键词：基因分型安全输血
- c.955C>G变异致ABO等位基因增强现象的研究及文献复习被引量：2
- 2022年
- 目的鉴定ABO疑难血型基因型,分析ABO亚型中等位基因增强现象的遗传规律。方法采用血清学方法检测ABO血型,PCR扩增测序ABO基因编码区、上游CBF/NF-Y增强子区、启动子和内含子1中红细胞特异性调节元件的核苷酸序列,克隆测序ABO基因第6和7外显子分析鉴定其基因型。结果血清学结果提示患者为A_(亚)B型,基因测序结果发现其为A/B杂合子。克隆测序确定一个等位基因为ABO*A1.02+c.955C>G,另一个等位基因为ABO*B.01。结论A基因携带c.955C>G(p.Leu319Val)变异且与B基因同时遗传时,存在等位基因增强现象。
- 冯晨晨史丽莉李慧刘太香丁文艺陈青
- 关键词：ABO亚型基因测序
- 误判O型的疑难血型鉴定及安全输血策略的研究被引量：7
- 2021年
- 目的:综合探讨多种误判O型的疑难血型鉴定及安全输血策略。方法:收集2018-2019年本中心接收的无偿献血者和临床患者疑难血型复检标本,对表型为O型但疑似亚型标本使用试管法、吸收放散法等进一步验证;并采用分子生物学方法对受检者的相关血型基因进行检测。结果:14例表型被误判为O型的受检者中,共鉴定出11种基因型,其中无偿献血者3例,ABO血型基因型分别为Ael02/O02、Bel03/O02及1例类孟买B101/O02(FUT1:h3h3;FUT2:Se^(357)Se^(357));临床患者11例,ABO血型基因型分别为Ael02/O01、Ael02/O02(2例)、Ael08/O01、Aw37/O02、Aw43/O02、Bel03/O01、Bel03/O02(3例)及1例类孟买A102/B101(FUT1:h3h3;FUT2:Se^(357)Se^(357))。结论:Ael、Bel、Aw、类孟买等多种亚型的表型易被误判为O型。分子生物学手段有助于鉴定亚型基因型,合理安排相应的输血策略。
- 冯晨晨肖建宇史丽莉张若洋薛敏周彦君黄成垠陈青
- 关键词：基因分型输血安全
- TGF-β1在放射性肺损伤预测及防治中的临床意义被引量：4
- 2012年
- 放射治疗是胸部肿瘤的主要治疗手段之一,在局部晚期或不能手术的早期胸部肿瘤的治疗中发挥着重要作用。而放射性肺损伤是胸部肿瘤放疗的常见且严重的并发症,临床上主要表现为早期的放射性肺炎（radiation pn-eumonitis,RP）和后期的放射性肺纤维化,直接影响患者预后和生存质量。
- 陈青吴锦昌
- 关键词：TGF-Β1肺损伤胸部肿瘤
- 红细胞血型系统研究新进展被引量：5
- 2022年
- 血型研究在安全输血、胎儿和新生儿溶血性疾病、器官移植等方面具有重要临床意义。随着下一代基因组测序技术的迅猛发展,仅2020年就有5个新的红细胞血型系统得到正式命名,本文主要围绕CTL2(ISBT 039)、PEL(ISBT 040)、MAM(ISBT 041)、EMM(ISBT 042)、ABCC1(ISBT 043)这5个血型系统的研究进展进行综述。
- 杨东陈青
- ABO血型基因分型方法的进展与应用被引量：4
- 2022年
- ABO血型系统是临床输血中最重要的血型系统。血清学技术是检测ABO血型常规检测方法,但对于鉴定如抗原或抗体减弱、血浆蛋白异常、多凝集或冷凝集素等较为复杂的ABO疑难样本,血清学存在着一定的局限性。随着分子生物学技术的发展,ABO血型基因被克隆,建立了以DNA为基础的ABO血型基因分型技术,出现了PCR-SSP、Droplet-AS-PCR、PCR-RFLP、PCR-SBT、SNaPshot、MALDI-TOF MS及NGS等不同通量的基因分型技术。基因分型技术克服了血清学的局限性,已成为解决疑难血型必不可少的方法,为ABO血型的正确鉴定提供了强力支持,为精准输血提供保障。本文就ABO血型基因分型方法的进展与应用作一综述。
- 李慧冯晨晨陈青
- 关键词：ABO血型基因分型
- Bw11亚型家系表现ABO等位基因竞争现象的研究被引量：8
- 2021年
- 目的分析携带ABO*BW.11等位基因的家系成员ABO血清学和分子生物学特征。方法应用血清学方法检测先证者及其家系成员共9人的ABO血型表型。采用PCR方法扩增ABO基因第6、7外显子并对扩增产物直接测序,同时克隆测序先证者及其父亲的标本。结果血清学检测初步判断先证者及其弟弟为AB亚型,先证者的父亲及其两女儿为B亚型。克隆测序发现先证者ABO等位基因第7外显子在B101的基础上第695位碱基发生T>C变异,表明为ABO*BW.11等位基因。先证者的父亲、弟弟及其两个女儿均携带该变异等位基因。A基因与BW.11以及BW.11与O基因同时遗传时竞争现象存在明显差异。结论ABO基因c.695T>C变异可能会导致Bw11亚型存在等位基因竞争现象。分子生物学方法结合血清学方法有助于精准鉴定ABO疑难血型。
- 冯晨晨任伟超程道胜高景艳陈健勇李伟超肖建宇刘太香黄成垠陈青
- 关键词：ABO血型基因测序
- Rh弱D1变异型鉴定及输血策略讨论被引量：2
- 2022年
- 目的:分析血清学表现异常的1例RhD抗原变异体患者基因变异情况,探讨输血策略。方法:RhD来源于一位IgM抗-D初筛为弱阳性的患者,经3种不同来源抗血清鉴定RhD变异体,对RHD基因10个外显子及邻近的内含子进行PCR扩增、纯化及测序,并检测RhCE抗原分型和RHCE基因型。结果:患者的血清学表现为D变异型,RHD基因测序分析显示,第6外显子的809位碱基发生T>G变异(c.809T>G,p.Val270Gly),为RHD*01W.01型;RhCE抗原分型为CcEe,RHCE基因型结果与血清学表型一致。结论:此患者RhD抗原变异体为RHD*01W.01型,应对D变异体进行基因分型研究,进而采取安全有效的输血策略。
- 张若洋肖建宇冯强黄成垠丁文艺陈青
- 关键词：血型基因分型
- AW.37/B.01亚型孕妇家系调查及新生儿血型鉴定探讨
- 2020年
- 目的通过鉴定1例患者及其家系成员的ABO疑难血型并制定合理的输血策略,探讨新生儿ABO血型正定型检测的准确性。方法血型血清学方法鉴定ABO血型表型,利用分子生物学方法进行ABO基因分型检测,通过测序确定家系成员ABO血型基因型。结果先证者血清学ABO血型正反定型不一致,血清学检测格局为A_亚B,ABO基因测序发现ABO~*A1.01等位基因第7外显子940位碱基发生A>G变异,导致314位赖氨酸被谷氨酸替换,该患者ABO血型的基因型为ABO~*AW.37/B.01;其父血清型格局为A_亚,基因型为ABO~*AW.37/O.01.02。结论AW.37等位基因可在人群中稳定遗传,并可能影响新生儿血型鉴定。
- 冯强冯晨晨张月香夏勇李文娟刘太香黄成垠丁文艺陈青
- 关键词：ABO亚型ABO基因
