吕苗苗
- 作品数：10 被引量：40H指数：4
- 供职机构：宁夏大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区教育厅资助项目宁夏回族自治区教育厅基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 葡萄霜霉病菌实时荧光定量PCR检测体系的建立和应用被引量：23
- 2019年
- 【目的】葡萄霜霉病是葡萄生产上重要的单年流行病害,研究旨在构建葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)的实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测体系,为葡萄霜霉病的早期诊断和预测预报提供依据。【方法】依据GenBank中葡萄霜霉病菌cox2基因序列设计1对特异性引物(F-cox-Pv/R-Pv),建立并优化常规PCR和real-time PCR反应体系,利用葡萄霜霉病菌、葡萄炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)、葡萄白粉病菌(Uncinula necator)、葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、葡萄白腐病菌(Coniella diplodiella)、葡萄溃疡病菌(Botryosphaeria dothidea)、白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)、辣椒炭疽病菌(C.capsica)、甘草根腐病菌(Fusarium solani)、西葫芦白粉病菌(Sphaerotheca fuliginea)、番茄菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、马铃薯干腐病菌(F.equiseti)、西瓜枯萎病菌(F.oxysporum)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)等14种葡萄及其他作物病原菌和拮抗菌的菌丝DNA进行常规PCR和real-time PCR特异性检测,并对灵敏度和可重复性进行评价。运用已构建的real-time PCR体系对人工接种葡萄霜霉病菌的潜育期叶片内病原菌DNA进行定量检测,利用SPSS 19.0软件分析接种时间与叶片内葡萄霜霉病菌潜伏侵染量的关系。【结果】研究设计的引物特异性高,常规PCR仅对葡萄霜霉病菌DNA有扩增条带,为139 bp;real-time PCR检测结果表明该对引物对葡萄霜霉病菌有唯一的产物吸收峰,对其他供试菌株均未检测到产物吸收峰。常规PCR检测的灵敏度为10 pg·μL^(-1),real-time PCR的灵敏度可达到0.1 pg·μL^(-1),是常规PCR检测灵敏度的100倍。以携带目的基因片段的重组质粒为标准品,构建real-time PCR循环阈值(Ct)与模板浓度的线性关系,标准曲线y=42.27-3.36x,相关系数R^2=0.997,扩增效率为98.50%,线性范围达7个数量级,在2.4×10~3—2.4×10~9 copies/μL呈现良好的线性关系。对人工接种葡萄霜霉病菌的潜�
- 李文学肖瑞刚吕苗苗丁宁石华荣顾沛雯
- 关键词：葡萄霜霉病菌COX2实时荧光定量PCR潜伏侵染
- 小麦-苜蓿邻作带步甲科物种多样性及其时空动态
- 2016年
- 选取宁夏银川市贺兰山农牧场小麦-苜蓿邻作带为研究样地,对步甲科昆虫种类和个体数进行了调查,研究其邻作界面不同距离的小麦和苜蓿地步甲昆虫群落多样性及时空动态。结果表明,共采集步甲昆虫2 055头,分属20种,其中毛青步甲(Chlaenius pallipes)、彩角青步甲(Chlaenius touzalini)、谷婪步甲(Harpalus calceatus)分别占总个体数的37.81%、21.99%、16.25%,为该地区的优势种;步甲的发生具有明显的边缘正效应;Shannon-Wiener多样性指数为边际带>小麦带>苜蓿带,并随界面距离的加大小麦和苜蓿地步甲多样性趋于降低,距离带间差异显著;丰度和个体数变化与Shannon-Wiener指数变化趋势基本一致,但在不同距离带间步甲种类和个体数变化受调查时间的影响更大;优势种毛青步甲个体数量和群落多样性受农事操作的影响,麦地灌水主要影响步甲优势种个体数量的分布,苜蓿刈割影响不同田块步甲的多样性。本研究提示,利用农事操作可以限制天敌的转移,控制害虫爆发。
- 张艳荣胡文超吕苗苗洪波关晓庆贺达汉
- 关键词：步甲物种多样性
- 宁夏白芨滩国家级自然保护区苦豆子内生真菌多样性及生态分布被引量：3
- 2016年
- 为探索宁夏干旱荒漠区苦豆子(Sophora alopecuroides L.)内生真菌的多样性及区系组成,为苦豆子内生真菌的合理开发和利用提供理论依据。从宁夏白芨滩国家级自然保护区不同植被和土壤类型的6个样区采集苦豆子样品30份,采用组织匀浆法从植株的根、茎、叶和种子中分离内生真菌,根据培养性状、菌落、孢子等形态特征,结合rDNA-ITS序列分析对菌株进行鉴定;根据内生真菌的相对频率、物种多样性指数、丰富度指数和相似性系数分析其区系组成特点。结果表明,从30份样品中共分离得到内生真菌213株,分别属于19个属,其中镰刀菌属(Fusarium)、链格孢属(Alternaria)和茎点霉属(Phoma)为优势属。苦豆子内生真菌的分布具有一定的组织特异性,根部的内生真菌数量高于其他部位,茎部内生真菌多样性指数最高。植被类型中,沙生植被草原(样区Ⅴ)分离的内生真菌物种多样性指数最高,而荒漠草原(样区Ⅲ)最低。荒漠草原(样区Ⅰ)和沙生植被草原(样区Ⅴ)内生真菌群落有密切的相似性。可见,苦豆子蕴含丰富的内生真菌资源,其内生真菌具有很高的宿主特异性,且分布受生境影响。
- 高媛周星辰孙牧笛吕苗苗顾沛雯
- 关键词：苦豆子内生真菌多样性RDNA-ITS序列分析
- 宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶伴随病毒的多重RT-PCR检测
- 宁夏贺兰山东麓地区由于其独特的光、热、水、土等自然条件,是目前国内外公认的最佳酿酒葡萄产区之一,现已成为我国酿酒葡萄原产地保护区之一。葡萄病毒病是一类为害地域广而且难以治愈的病害,其中,葡萄卷叶病是宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄...
- 吕苗苗顾沛雯
- 关键词：卷叶病RT-PCR
- 宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶伴随病毒的多重RT-PCR检测
- 宁夏贺兰山东麓地区由于其独特的光、热、水、土等自然条件,是目前国内外公认的最佳酿酒葡萄产区之一,现已成为我国酿酒葡萄原产地保护区之一。葡萄病毒病是一类为害地域广而且难以治愈的病害,其中,葡萄卷叶病是宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄...
- 吕苗苗顾沛雯
- 关键词：卷叶病RT-PCR
- 文献传递
- 苜蓿田及不同邻作地地表步甲群落多样性及其扩散动态被引量：4
- 2017年
- 本研究选取宁夏银川市贺兰山农牧场苜蓿地及苜蓿-玉米、苜蓿-小麦、苜蓿-防护林、苜蓿-休闲地4种邻作边缘带,用陷阱法对步甲科昆虫种类和个体数进行了调查,研究了地表步甲昆虫的物种组成与数量、多样性以及季节迁移动态。调查共采集步甲昆虫9239头,21种。其中毛青步甲(Chlaenius pallipes)、谷婪步甲(Harpaluscal ceatus)、彩角青步甲(Chlaenius touzalini)分别占总个体数的41.17%,18.77%,17.07%,为该地区的优势种类。分析表明,4种邻作型的苜蓿边缘地步甲丰富度为防护林-苜蓿边缘地>小麦-苜蓿边缘地=玉米-苜蓿边缘地>休闲地-苜蓿边缘地;多样性为小麦-苜蓿边缘地>防护林-苜蓿边缘地>玉米-苜蓿边缘地>休闲地-苜蓿边缘地;小麦-苜蓿边缘地的均匀度指数和优势度指数均为最高。苜蓿边缘地与相邻作物边缘地步甲群落多样性比较,前者的步甲多样性指数明显高于后者。地表步甲种群在苜蓿田边缘带与相邻作物田边缘带之间存在着明显的季节迁移,其迁移动态的程度受不同邻作作物类型、苜蓿刈割及灌水等农事操作的显著影响。
- 张艳荣胡文超吕苗苗洪波关晓庆贺达汉
- 关键词：步甲物种多样性苜蓿田
- 宁夏地区葡萄卷叶伴随病毒遗传变异的PCR-SSCP分析被引量：5
- 2019年
- 宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶病病株率较高,严重影响了酿酒葡萄产业的健康发展,但有关其病原葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaVs)的遗传变异情况则鲜有报道.利用RT-PCR技术对宁夏酿酒葡萄不同种植区的7个主栽品种的GLRaV-1和GLRaV-3进行分子检测,利用SSCP技术对扩增片段进行遗传变异分析.试验结果共获得8个GLRaV-1和13个GLRaV-3的阳性样本.8个GLRaV-1分离物基于CP基因分析差异明显,可分为3类;13个GLRaV-3分离物基于RdRp基因分析差异明显,可分为3类,而基于CP和HSP70基因分析可分为2类.说明宁夏酿酒葡萄不同种植区、不同品种的GLRaV-1和GLRaV-3种群分子特性存在差异且遗传变异明显.这有助于宁夏地区酿酒葡萄GLRaVs流行学调查和分子诊断分析,为该病害的防控提供理论依据.
- 李文学吕苗苗胡丽杰闫思远孙牧笛顾沛雯
- 关键词：葡萄卷叶伴随病毒RT-PCR检测SSCP
- 宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄病毒病田间自然发病率调查及检测被引量：5
- 2017年
- 对宁夏贺兰山东麓8个酿酒葡萄种植地区8个葡萄品种的病毒病田间自然发病情况进行调查,采用RT-PCR方法,检测了40份样品中GLRaV-1~5这5种葡萄卷叶伴随病毒的感染率。结果表明:宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄主要病毒病有葡萄卷叶病、扇叶病和栓皮病,其中葡萄卷叶病尤为严重;不同酿酒葡萄种植区和品种间葡萄卷叶病的感染存在着差异,老葡萄种植区中品种间葡萄卷叶病发病率明显高于新葡萄种植区的品种;"蛇龙珠"和"黑比诺"是感染葡萄卷叶病毒的主要品种,发病率高达85.1%和52.7%;利用5种葡萄卷叶伴随病毒引物进行RT-PCR检测,检出3种病毒类型,且GLRaV-3的检出率最高,为87.5%。
- 吕苗苗纳莹孙牧笛徐全智顾沛雯
- 关键词：RT-PCR检测
- 葡萄卷叶伴随病毒1号和3号宁夏分离物部分基因序列分析被引量：3
- 2018年
- 为明确葡萄卷叶伴随病毒(GLRaVs)在宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄上的侵染状况,采用RT-PCR技术对40份酿酒葡萄样品中的GLRaV-1~GLRaV-5进行了外壳蛋白(CP)、复制酶(RdRp)和热激蛋白(HSP70)基因序列的克隆和分析。检测结果表明,在所检测的5种病毒中,除GLRaV-2和GLRaV-4未检测到外,GLRaV-1和GLRaV-3的检出率最高,分别为20.0%和32.5%,GLRaV-5的检出率仅为5.0%;有6个样品存在GLRaV-1和GLRaV-3两种病毒复合侵染。序列分析表明,GLRaV-1宁夏分离物的部分CP基因序列长度为232nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为90%,与已报道的国内外其他分离物CP基因序列相比,其同源率为90%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的CP基因序列长度为942nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为40%,与已报道的国内外其他分离物CP基因序列相比,其同源率为40%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的RdRp基因序列长度为683nt,其各分离物间的核苷酸序列同源率为90%以上,与已报道的国内外其他分离物RdRp基因序列相比,其同源率为90%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的HSP70基因序列长度为546nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为96%,与已报道的国内外其他分离物HSP70基因序列相比,其同源率为96%~99%。
- 吕苗苗李文学孙牧笛胡丽杰顾沛雯
- 关键词：RT-PCR检测克隆
- 不同番茄品种对西花蓟马为害的生理响应
- 2016年
- 以5个番茄品种为试材,通过测定西花蓟马(Frankliniella occidentalis)为害后番茄各项生理指标的综合变化,并结合西花蓟马种群动态趋势,探讨番茄不同品种的抗性强弱。结果表明:蓟马为害后,引起番茄叶片内蜡质、单宁、游离脯氨酸及总酚含量的变化。蓟马数量与蜡质、单宁、游离脯氨酸含量呈正相关,与总酚含量呈负相关。抗性强的"瑞芬"品种,其单宁、游离脯氨酸、总酚含量较其它品种变化快,感虫品种"中研TT"物质含量变化相反,其它品种含量及变化居中。蜡质含量在各品种间偏低。
- 庞洪翠吕苗苗贾彦霞
- 关键词：番茄西花蓟马蜡质游离脯氨酸总酚
