帅丽芳
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：广州军区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种丙型肝炎病毒完整结构蛋白与GB病毒B的嵌合病毒
- 本发明涉及病毒、组合物及其制备或纯化领域，具体涉及一种丙型肝炎病毒完整结构蛋白与GB病毒B的嵌合病毒，该嵌合病毒由GB病毒B的5’端非编码区序列、丙型肝炎病毒的完整结构蛋白基因序列和GB病毒B的非结构蛋白及3’端非编码区...
- 黎诚耀李婷婷帅丽芳王文敬
- 重组慢病毒载体介导不同启动子驱动的绿色荧光蛋白在多种(不同)细胞中的表达影响被引量：4
- 2015年
- 目的比较不同启动子的慢病毒转导细胞后,在不同细胞系中驱动绿色荧光蛋白表达的效率高低。方法采用3种不同启动子的转移质粒,与包装质粒共转染293T细胞,转染60 h后,收集慢病毒上清。用等量的三种慢病毒液转导5种细胞系(293A、MOLT-4、PC3、DU145及RM1),72 h后,荧光显微镜下观察转导效果;流式细胞仪计数转导效率。结果不同启动子(Ubiquitin,EF1α,CMV)在5种细胞系中驱动绿色荧光蛋白的表达及转导效率不同。在293A和PC3细胞中,CMV为最强启动子,转导率分别为(94.83±2.87)%和(20.90±3.15)%;但在MOLT-4和DU145细胞中,EF1α为最强启动子,转导率分别为(74.27±2.14)%和(25.13±4.95)%;在RM1细胞中,Ubiquitin为最强启动子,转导率为(16.77±0.38)%。结论在慢病毒载体介导基因表达研究中,要考虑选取合理的细胞和启动子以获得高效的转导效率。
- 张玲翁云层张云帅丽芳李婷婷王文敬李红卫赵卫黎诚耀
- 关键词：重组慢病毒绿色荧光蛋白
- 高效包装重组慢病毒及其定量方法的建立被引量：1
- 2015年
- 目的高效包装不同启动子的重组慢病毒(LV),建立LV的定量方法。方法采用分子克隆方法获得p FUGW、p TY-EF1α-EGFP及p TY-CMV-EGFP 3种转移质粒,然后采用脂质体法与另两种包装质粒p SPAX2及p MD2.G共同转染293T细胞,制备含有不同启动子的LV。设计针对3’-LTR的探针和引物,建立LV的荧光定量PCR定量方法。结果获得了不同启动子的转移质粒,制备了3种不同启动子的LV,应用荧光定量PCR方法测定制备的病毒,载量能达到109copies/ml。结论成功构建了不同启动子的转移质粒,获得了三种LV,建立了针对LV的荧光定量PCR方法,为后续研究不同启动子在多种细胞系中驱动目的蛋白的表达奠定了基础。
- 张玲翁云层张云帅丽芳李婷婷王文敬李红卫赵卫黎诚耀
- 关键词：重组慢病毒绿色荧光蛋白荧光定量PCR
- 丙型肝炎病毒结构蛋白的嵌合病毒狨猴感染模型被引量：1
- 2010年
- 李婷婷帅丽芳陈姿喧黎诚耀
- 关键词：狨猴丙型肝炎结构蛋白黄病毒科股静脉采血
- 一种丙型肝炎病毒完整结构蛋白与GB病毒B的嵌合病毒
- 本发明涉及病毒、组合物及其制备或纯化领域，具体涉及一种丙型肝炎病毒完整结构蛋白与GB病毒B的嵌合病毒，该嵌合病毒由GB病毒B的5’端非编码区序列、丙型肝炎病毒的完整结构蛋白基因序列和GB病毒B的非结构蛋白及3’端非编码区...
- 黎诚耀李婷婷帅丽芳王文敬
- 文献传递
- 重组干扰素慢病毒共感染对腺病毒体外复制的影响被引量：2
- 2015年
- 目的测定不同启动子的重组干扰素(IFN)慢病毒(LV)共感染对5型腺病毒在体外293A细胞中复制的影响。方法以重组LV-EF1α-IFNγ、LV-CMV-IFNα、LV-CMV-IFNγ、LV-Ubi-IFNα与5型腺病毒共感染293A细胞,72 h后,荧光定量PCR法测定5型腺病毒载量。结果 LV-EF1α-IFNγ、LV-CMV-IFNα、LV-CMV-IFNγ、LV-Ubi-IFNα共感染组的腺病毒载量低于非共感染对照组(P<0.01)。结论使用重组LV-IFN感染293A后,能够显著抑制腺病毒复制,为进一步开展HIV/AIDS等病毒性疾病的基因治疗研究提供参考。
- 何小艳翁云层张艺凡张云帅丽芳李红卫黎诚耀张玲
- 关键词：腺病毒共感染
