李燕娇
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 富甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的直接表达和纯化被引量：4
- 2009年
- 利用RT-PCR技术从果蝇总RNA中克隆出富甘氨酸果蝇抗菌肽基因,将该基因插入原核表达载体pET-32a(+)的Nde I和Xho I酶切位点之间,然后用重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)利用乳糖操纵子的葡萄糖效应IPTG诱导表达,经15%SDS-PAGE、Western blot分析,在大约8 kD处出现了含6×His标签的抗菌肽蛋白。再以Ni-N TA纯化树脂进行亲和层析、脱盐、冻干,成功制备了富甘氨酸果蝇抗菌肽蛋白。
- 冯志国陆婕郎君李燕娇陈正望
- 关键词：果蝇纯化
- 一新富含甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的优化表达被引量：6
- 2008年
- 目的:探索大肠杆菌原核表达系统制备具有生物功能的抗菌肽的最佳诱导条件。方法:将富甘氨酸果蝇抗菌肽基因的核心片段构建表达载体pET32a+中,经序列分析证实基因序列的正确性。在不同温度、不同时间和不同IPTG浓度进行诱导后,用15%SDS-PAGE检测融合蛋白的表达,发现有一条分子量约8kD的新增蛋白条带。结果:研究表明在37℃菌液OD值0.8时诱导7h蛋白表达量最高(IPTG 0.7mmol/L,AMP 100μg/ml,0.3%Glu)。结论:获得了抗菌肽表达的最佳诱导条件,为大量诱导产生该抗菌肽奠定了理论基础。
- 冯志国刘慧娟陆婕郎君李燕娇陈正望
- 关键词：果蝇
