曾玲
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 供职机构：广州中医药大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- p53基因启动子转录活性检测细胞模型的建立被引量：2
- 2013年
- 【目的】构建p53基因启动子靶控报告基因细胞模型,为高通量筛选出以p53为靶标的中药提供新的细胞模型。【方法】采用瞬时转染报告基因测定法,确定最佳转染方案及p53基因启动子转录活性细胞模型的建立和验证,观察p53抑制剂PFT-a、血清饥饿、过氧化氢、自噬激活剂雷帕霉素对p53基因启动子转录活性PC12细胞模型的量效和时效关系。【结果】PFT-α诱导3 h,对p53基因启动子转录活性抑制率达50%左右;血清饥饿诱导12、24、36 h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.6倍;过氧化氢300μmol/L诱导9 h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.3倍;雷帕霉素在浓度为0.1、1 nmol/L可上调p53基因启动子转录活性,呈浓度依赖性,而5 nmol/L及更高浓度可下调p53基因启动子转录活性。【结论】成功建立采用p53基因启动子报告基因检测p53基因启动子转录活性的特异性细胞模型,血清饥饿、过氧化氢、雷帕霉素可诱导p53基因启动子的转录活性。
- 秦红芳曾玲陈静白晔李菲黄开远温泉赖宝玲陈东风黎晖邓汝东周健洪魏刚刘东辉赖英桃李伊为
- 关键词：转录活性细胞模型血清饥饿
- 不同盐浓度影响中药外洗方中小檗碱透皮吸收的体外实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的不同盐浓度影响中药外洗方中小檗碱透皮吸收的体外实验研究。方法建立小檗碱皮肤渗透液的高效液相色谱检测法,利用昆明小鼠腹部皮肤,以Franz扩散池研究盐对小檗碱的透皮能力,研究含0%、0.1%、0.9%、2.7%、3.6%不同盐浓度外洗方中小檗碱的透皮吸收效果。结果小檗碱在体外可以通过透皮吸收,含0.9%和2.7%盐在3～8h的促渗作用明显优于含0%盐组。通过单位时间透皮量比较,2～3 h可能是药物的最佳透皮吸收时间。3.6%盐组在1～4 h有促渗作用,但是4～8 h则抑制小檗碱的透皮吸收。结论 0.1%、0.9%、2.7%盐均能够增加小檗碱的透皮吸收,其中0.9%盐能显著增加小檗碱的透皮量和透皮速率,2～3 h可能是药物的最佳吸收时间。
- 黄开远温泉黎晖杨开磊杨伟华秦红芳陈静曾玲
- 关键词：小檗碱透皮吸收外洗液
- 重组HSV1-tkGFP/GCV荧光蛋白示踪系统的构建及对小鼠黑色素瘤的抑制作用被引量：2
- 2014年
- 目的建立具有绿色荧光蛋白(GFP)示踪功能的单纯疱疹病毒1型胸苷激酶基因/更昔洛韦自杀基因系统(HSV1-tkGFP/GCV),并检测该系统对小鼠黑色素瘤的抑制作用。方法将阳性重组质粒pLXSN-tkGFP和pLXSN-DsRed2分别转染B16细胞,加G418进行筛选。用GCV(5,50,500μmol·L-1)杀伤实验验证tk基因的表达。四甲基偶氮唑盐(MTT)法和荧光示踪法验证该系统存在旁杀伤效应。将B16-tkGFP和B16-RFP细胞按1∶1混合,接种于C57BL/6J小鼠进行肿瘤模型复制,随机分为模型组和GCV(50 mg·kg-1·d-1)组,腹腔注射给药,每3 d检测1次肿瘤大小(n=14)。结果成功获得能发出绿色荧光的B16-tkGFP细胞和能发出红色荧光的B16-RFP细胞,且tk基因在B16-tkGFP细胞中表达正常。该系统存在一定的旁杀伤效应。与模型组比较,GCV组小鼠肿瘤生长受到明显抑制(P<0.01)。结论重组HSV1-tkGFP/GCV系统对小鼠黑色素瘤有明显抑制作用,并可实现直观检测其旁杀伤效应,为后续中药联合自杀基因疗法的研究奠定基础。
- 曾玲吴映雅谭宇蕙丘鹏翔张广献刘娟陈志从杜标炎
- 关键词：单纯疱疹病毒胸苷激酶基因自杀基因系统黑色素瘤
- 六味地黄丸入血成分对自杀基因杀伤B16细胞的增效作用被引量：6
- 2014年
- 目的探讨六味地黄丸主要入血成分对自杀基因系统(HSV-tk/GCV)杀伤黑色素瘤B16细胞的增效作用及作用机制。方法采用MTT法检测六味地黄丸主要入血成分丹皮酚、马钱素、莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸和獐牙菜苷5种化合物及其混合组分对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞的影响;入血成分混合组分处理脾淋巴细胞后培养上清对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞的影响;荧光显微镜观察及流式细胞术结合荧光示踪法分析含药淋巴细胞上清对细胞间缝隙连接通讯(GJIC)功能的影响及Western blot分析缝隙连接蛋白(Cx43)表达;MTT法检测含药淋巴细胞上清对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞的增敏作用。结果 HSV-tk/GCV联合丹皮酚、马钱素、莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸和獐牙菜苷5种化合物及5种化合物的混合组分,均未显示其对自杀基因的杀伤有直接增效作用;而混合组分处理脾淋巴细胞后培养上清对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞具有协同增效作用,并呈一定的量效关系。含药淋巴上清可明显促进Cx43表达,改善B16细胞间缝隙通讯功能。含药淋巴上清对HSV-tk/GCV的B16细胞杀伤敏感性则无明显影响。结论六味地黄丸主要入血成分可能刺激脾淋巴细胞产生某些活性物质,并对HSV-tk/GCV杀伤B16细胞起增效作用,这些淋巴细胞产生的免疫活性物质可能才是六味地黄丸对肿瘤自杀基因疗法增效作用的药效物质基础;其增效机制可能与改善B16细胞间GJIC相关。
- 张广献王苏萍曾玲谭宇蕙吴映雅杜标炎
- 关键词：六味地黄丸HSV-TKB16细胞
- 六味地黄丸入血成分增效自杀基因杀伤肝癌细胞的缝隙连接机制被引量：8
- 2014年
- 【目的】探讨六味地黄丸主要入血成分处理的淋巴上清对大鼠肝癌细胞CBRH7919缝隙连接功能的影响,以期阐明其增强自杀基因疗法杀伤肝癌细胞效应的作用机制。【方法】取大鼠脾淋巴细胞,加入六味地黄丸的5种主要入血成分,体外培养后取含药淋巴上清,采用流式细胞术结合荧光示踪法分析其对细胞缝隙连接通讯功能(GJIC)的影响;利用Western blot法检测含药淋巴上清对大鼠肝癌CBRH7919细胞Cx43蛋白表达的影响;利用GJ阻滞剂甘草次酸(GA)观察阻滞GJIC后,含药淋巴细胞上清联合tk/GCV系统对细胞杀伤作用的影响。【结果】流式细胞术结合荧光示踪法结果表明,占培养液15%(体积分数)的含药淋巴上清能促进大鼠肝癌CBRH7919细胞的GJIC功能;Western blot法结果显示,含药淋巴细胞上清能提高大鼠肝癌CBRH7919细胞Cx43蛋白的表达水平;GA阻断GJIC功能后,含药淋巴细胞上清联合tk/GCV系统对细胞杀伤作用降低。【结论】六味地黄丸入血成分处理的淋巴上清可通过缝隙连接机制发挥对自杀基因杀伤大鼠肝癌细胞的增效作用。
- 刘娟周瑶张广献谭宇蕙肖建勇吴映雅曾玲杜标炎
- 关键词：肝癌六味地黄丸入血成分自杀基因肝癌细胞
- GABAA受体与醒脑静注射液抗神经细胞凋亡作用的相关性
- 2014年
- 目的：研究GABAA受体是否参与醒脑静注射液抗神经细胞凋亡的作用。方法：采用血清饥饿3天的方法建立PC12细胞凋亡模型，并随机分为正常对照组（control组）、模型组（model组）、醒脑静组（XNJ组），GABAA受体阻断剂组（BIC组）、醒脑静加GABAA受体阻断剂组（XNJ＋BIC组）。正常对照组以含10%FBS的正常培养基培养，不作任何处理；模型组换成无血清培养基培养；醒脑静组在无血清培养基基础上加入1.5μL/mL醒脑静注射液；BIC组加入终浓度为200μmol/mL的荷包牡丹碱；XNJ＋BIC组同时加入醒脑静注射液1.5μL/mL和终浓度为200μmol/mL的荷包牡丹碱；每组5个复孔，采用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测神经细胞凋亡数，用Western Blotting检测GABAA受体的蛋白表达。结果：XNJ＋BIC组凋亡少于模型组（P〈0.05）；醒脑静注射液加入GABAA受体阻断剂后其GABAA受体蛋白表达较醒脑静注射液降低。结论：醒脑静注射液抗细胞凋亡的作用机制与提高GABAA受体从而抑制凋亡效应有关。
- 曾玲王海宽
- 关键词：醒脑静注射液PC12细胞凋亡GABAA受体
