张广献
- 作品数：41 被引量：128H指数：7
- 供职机构：广州中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省中医药管理局基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 人早老蛋白-1基因（ps-1）的克隆及其在PC12细胞中表达
- ＜正＞ 阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease,AD）是常见的神经退行性疾病之一,遗传和分子生物学研究表明,ps-1基因突变与70%-80%的家族性早老性痴呆（FAD）发病有关,其在散发型早老性痴呆（SAD...
- 张广献曲喜英祝其锋
- 文献传递
- NGF诱导PC12细胞分化的研究被引量：20
- 2002年
- 动物实验表明 ,生理浓度的乙醇在脑发育过程中 ,不但可以影响神经细胞的数量 ,还可协同增强NGF诱导PC12细胞形态和功能上的分化 ,分化的PC12细胞具有与交感神经元相似的性状特征。用 10 0mmol/L乙醇和 5 0ng/mlNGF联合诱导可建立PC12细胞分化模型 ,为以神经细胞为研究对象的实验提供一种获得神经细胞的方法。
- 张广献祝其锋
- 关键词：乙醇NGF分化PC12细胞神经细胞
- 薯蓣皂苷元对大鼠肝癌细胞CBRH7919的抑制及凋亡诱导作用被引量：8
- 2010年
- 目的探讨薯蓣皂苷元对大鼠肝癌细胞CBRH7919的生长抑制、诱导凋亡及其对细胞周期的影响。方法体外MTT法测生长抑制率。Hochest染色观察药物作用后的细胞核形态,流式细胞术、彗星电泳技术分析药物对细胞周期、凋亡率和细胞DNA的影响。结果薯蓣皂苷元能抑制大鼠肝癌细胞CBRH7919的生长。药物浓度为6.25、12.5、25和50μmol/L作用72h的抑制率分别为:5.3%、5.5%、18.6%和77.8%,IC50为37.4μmol/L;薯蓣皂苷元50μmol/L作用24、48、72和96h的抑制率分别为:23.2%、66.1%、80.5%和89.3%。Hochest染色后,加药组细胞有明显的凋亡形态特征。流式细胞仪检测显示,薯蓣皂苷元25、50μmol/L组细胞凋亡率分别为19.06%和29.67%,细胞周期S期和G2-M期阻滞增加,彗星电泳显示,12.5、25和50μmol/L加药组形成拖尾,平均光密度值较阴性对照组降低,彗星尾距较阴性对照组增加,且二者改变有剂量依赖关系。结论薯蓣皂苷元能抑制大鼠肝癌细胞CBRH7919的生长和诱导其凋亡。
- 刘喜娟谭宇蕙吴映雅张广献周瑶刘晶晶杜标炎刘军明
- 关键词：薯蓣皂苷元细胞凋亡肝癌
- 芹菜素对自杀基因治疗系统杀伤人黑色素瘤细胞株A375的增效作用
- 2016年
- 目的研究芹菜素对单纯疱疹病毒1型胸苷激酶/更昔洛韦(HSV1-tk/GCV)自杀基因杀伤人黑色素瘤细胞株A375的增效作用及其机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测芹菜素对A375(tk^-)细胞生长的影响,及自杀基因治疗系统联合芹菜素对含20%A375-tk/GFP(tk^+)细胞的tk^+和tk^-混合细胞的杀伤效应的影响,流式细胞仪荧光示踪法分析缝隙连接通讯(GJIC)功能、细胞凋亡变化。结果芹菜素作用A375细胞24,48,72 h的半数抑制量(IC_(50))分别为86.34,25.81,11.16μmol·L^(-1),选用2.5~20μmol·L^(-1)芹菜素进行后续试验;5,10,20μmol·L^(-1)芹菜素联合GCV组对肿瘤细胞的抑制率明显比芹菜素组和GCV组高(P<0.01),协同性分析金正均Q值分别为2.03,1.43和1.36;2.5,5,10μmol·L^(-1)芹菜素处理A375细胞48 h后,各组绿色荧光细胞比值为:0.333±0.003,0.393±0.006,1.105±0.094,芹菜素各组比值均明显高于空白对照组(P<0.01);芹菜素联合GCV各组,与空白对照组、GCV组、芹菜素各组比较,可以增加细胞晚期凋亡率,趋势与MTT结果一致。结论芹菜素可以提高tk^+和tk^-混合细胞对GCV的敏感性,具有协同增强自杀基因系统杀伤效应的作用,其机制可能与芹菜素能够促进A375细胞GJIC功能及诱导细胞凋亡有关。
- 黄暨生张广献谭宇蕙易华罗惠杜标炎
- 关键词：芹菜素黑色素瘤自杀基因缝隙连接通讯
- CRISPR-Cas9系统定向编辑TCR基因的sgRNA筛选被引量：2
- 2015年
- 为构建靶向T细胞抗原受体(T Cell Receptor,TCR)基因的CRISPR-Cas9基因组编辑系统,基于p X458质粒构建靶向TCR基因β链C区的CRISPR-Cas-sgRNA质粒,将其转染Hep G2细胞系,用流式细胞术检测转染效率;转染48 h后提取Hep G2细胞基因组DNA,扩增含有编辑位点的片段,测序分析该片段的峰图改变;对出现双峰的扩增片段做T-A克隆后测序分析,确定基因编辑发生的位置,并结合转染效率计算基因编辑效率.结果表明,成功构建含有3种sgRNA序列(N1、N2、S1)的p X458-sgRNA质粒,其转染效率分别为38.5%(N1)、39.7%(N2)和24.2%(S1);基因组PCR产物测序分析发现,S1组扩增片段在打靶位置出现杂峰;T-A克隆测序发现,20克隆有4个发生了基因编辑(20%),结合转染效率(24.2%)可知,编辑效率约为83%.可见,本文成功构建靶向TCR基因的CRISPR-CassgRNA质粒,并鉴定出基因编辑效率较高的一种sgRNA序列.
- 邵红伟陈辉彭鑫徐畅张广献黄树林
- 关键词：T细胞抗原受体靶向基因组
- 穿梭质粒匹配pHT254电转枯草芽孢杆菌WB800N方法优化
- 2023年
- 目的 枯草芽孢杆菌虽已广泛应用,但不同质粒转化困难或成本较高,限制了其应用。本研究主要观察了生长培养基、电击缓冲液、复苏培养基中添加如山梨醇、甘露醇、聚乙二醇等不同组合添加剂对枯草芽孢杆菌转化效率及稳定性的影响。方法 用穿梭质粒PHT254电转化枯草芽孢杆菌WB800N,研究生长培养基、电击缓冲液和复苏培养基等因素对转化效率的影响。结果 同一电场压力下高渗体系转化效率较常规体系明显提高且稳定性较好,同一电场压力和高渗体系中使用聚乙二醇PEG6000的电击缓冲液转化效率比使用山梨醇或海藻糖高6倍。结论 高渗电击转化法能够提高转化的稳定性,使用聚乙二醇PEG6000作为缓冲液可以获得更高的电转化效率。
- 吴绍锋张广献许晓伍陈光佩
- 关键词：枯草芽孢杆菌聚乙二醇
- 人参总皂苷增强小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接功能的实验研究被引量：5
- 2013年
- 目的探讨人参总皂苷（total ginsenosides，TGs）对小鼠黑色素瘤B16细胞缝隙连接（Gapiunction，GJ）功能的影响及其作用机制。方法MTT法测TGs对B16细胞生长的影响，荧光显微镜结合荧光示踪法分析GJ功能变化，以各试验组受体细胞均数与对照组的比值作为评价GJ功能的指标，流式细胞仪检测对照组和实验组的绿色荧光供体细胞（G4）与双阴性受体细胞（G3）比值（G4／G3）变化分析CJ功能改变，Westernblot分析连接蛋白（Connexin，Cx）表达。结果1～8μmol·L^-1 TGs处理B16细胞48h对其生长状态无明显影响；用1，2，4，8μmol·L^-1 TGs处理细胞48h后，荧光显微镜下观察，TGs能明显提高B16细胞荧光染料Calcein传递，对照组和实验组G4／G3比值分别是0．06±0．01，0．09±0．02，0．10±0．01，0．12±0．03和0．13±0．02，各实验组G4／G3值明显高于对照组（P〈0．01）；Westernblot分析结果显示，用1，2，4，8μmol·L^-1 TGs处理B16细胞48h对其连接蛋白Cx32表达有明显的增强作用，但对Cx43和Cx26表达无影响。结论体外较低浓度TGs能够有效促进B16细胞GJ功能，并具有一定的剂量一效应关系。1～8μmol·L^-1 TGs虽能显著促进B16细胞Cx32蛋白的表达，但在本试验浓度范围内并无明显的量效关系，且对Cx43和Cx26表达无明显影响。
- 王苏萍张广献谭宇蕙肖建勇吴映雅杜标炎丘鹏翔刘娟
- 关键词：人参总皂苷B16细胞连接蛋白流式细胞术
- 基于Blackboard平台的生物化学网络课程建设及应用被引量：4
- 2012年
- 建立基于Blackboard平台的生物化学网络课程,使得生物化学课程更加形象化、生动化,并随时能得到学生的反馈,从而有利于生物化学课堂教学的改进以及生物化学网络课程的随时更新。
- 张广献孙砚辉张韧吴映雅谭宇蕙
- 关键词：生物化学教学方法网络课程
- 微媒体背景下“中医学专业”基础医学教学模式探讨
- 2020年
- 现代信息技术和互联网传播技术在教学过程中的渗透和使用,极大得推动了高等医学教育改革的步伐,并为不断进行的新型教学模式探索提供新的视角和切入点。微信、博客、微博、QQ、智慧教学平台、手机移动app等微媒体与传统教学方式的有机结合,构建线上+线下混合式教学模式,可有效提升"中医学专业"基础医学教学质量,提高学生自主学习的积极性,并为学生创新型、创造性思维模式培养提供了参考和借鉴。
- 刘娜张韧张广献
- 关键词：中医学混合教学
- 3组美容多肽复配中各单肽间功效的相互影响被引量：1
- 2021年
- 为研究常用美容多肽在复配过程中各单肽间功效的相互影响,筛选出3组美容多肽分别进行复配,分别检测各实验组SOD、羟脯氨酸和ACE-1的含量,对复配多肽的功效进行评价。肌肽和三肽-1的复配组的功效与单肽的使用比例相关;棕榈酰四肽-7和乙酰基四肽-5的复配表现出拮抗作用;棕榈酰三肽-5与棕榈酰三肽-1的复配具有协同作用。不同多肽之间进行复配后,各单肽间的功效表现出了不同的影响。
- 吴赟张广献
- 关键词：复配
