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Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗宿主细胞DNA残留量检测方法研究: 2017年; 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。方法提取Vero细胞基因组DNA，制备地高辛标记探针。比较样品不同处理方式的检测差异。对建立的残留DNA检测方法进行特异性、灵敏度和稳定性验证。结果 Vero 细胞基因组DNA的质量浓度为295 μg/ml，260 nm与280 nm波长处的吸光度比值为1.88。探针灵敏度达到0.01 pg/μl。采用苯酚抽提方式处理DNA参考品，检测灵敏度为1 ng；而用碘化钠处理DNA参考品，灵敏度达到10 pg。特异性检测表明，探针与非同源DNA无杂交。灵敏度和稳定性检测结果显示，探针于–70 ℃保存9个月，灵敏度仍为10 pg。结论建立了Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。采用碘化钠提取DNA，回收率高，操作简单，适用于Vero细胞的残留DNA检测。; 任玉莹刘建凯尹珊珊徐颖之邓海清殷建齐邢盛宇张艳红高宇皎郝倩刘杨; 关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗灭活 VERO细胞

19A型肺炎链球菌多糖结合物中游离多糖含量测定方法的建立被引量：2: 2017年; 目的建立19A型肺炎链球菌多糖（Streptococcus pneumoniae type 19A polysaccharide，19APS）结合物中游离PS含量的测定方法。方法在一定条件下分别用1、3和5g／L脱氧胆酸钠（sodiumdeoxycholate，IX）C）溶液（pH7．3）沉淀不同浓度的破伤风类毒素（tetanustoxoid，1vr），确定不同浓度DOC沉淀载体蛋白1vr的浓度范围。以1g／LDOC分离结合19APS（19APS-TT）和游离19APS，测定上清液中的游离PS含量，并验证该DOC沉淀法的准确度和精密度。结果分别以1和3g／LDOC沉淀19APS-TT时，TT浓度最好分别控制在〈150和〈200μg／ml。该DOC沉淀法的准确度和精密度均良好，加标PS回收率为94．0％～107．2％，相对标准偏差均〈4％。结论成功建立了19APS-TT中游离PS含量的测定方法。; 尹珊珊邓海清高宇皎刘杨郝倩张艳红刘建凯; 关键词：链球菌肺炎化学沉淀

反相高效液相色谱法检测吸附无细胞百白破联合疫苗2-苯氧乙醇含量被引量：2: 2018年; 目的建立检测吸附无细胞百白破联合疫苗(diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,DTa P)中2-苯氧乙醇含量的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈∶水(1∶1),流速1.0 m L/min,检测波长270 nm,柱温25℃,以外标法测定2-苯氧乙醇含量,并对该方法进行线性、重复性、中间精密度、准确度、专属性、耐用性验证。结果 2-苯氧乙醇浓度在100~500μg/m L范围内,与峰面积线性关系良好,R2大于0.99;3批供试品重复性试验2-苯氧乙醇含量相对标准偏差(RSD)分别为0.8%、0.4%和1.2%,中间精密度验证2-苯氧乙醇含量RSD分别为2.38%、2.36%和2.68%;准确度回收率在97.4%~101.9%之间;供试品中加入戊二醛和甲醛对2-苯氧乙醇含量的检测无干扰,专属性较好;温度变化对检测结果无显著影响,耐用性较好。结论该检测方法简单、快速、可靠,可用于疫苗中2-苯氧乙醇含量检测。; 邓海清尹珊珊刘杨张艳红郝倩高宇皎任玉莹殷建齐邢盛宇刘建凯; 关键词：反相高效液相色谱法吸附无细胞百白破联合疫苗

几种新型病毒性疫苗介绍: 2018年; 从古至今人类一直与病毒做斗争，天花、麻疹等病毒性疾病蔓延曾造成大规模的人类死亡，病毒性疫苗的使用使病毒性疾病的发生和流行得到了有效的预防、控制。全球已成功消灭天花，我国已消灭天花和脊髓灰质炎，麻疹、腮腺炎、风疹、乙型脑炎等传染病的发病率和病死率均有95％以上的下降。; 任玉莹尹珊珊邢盛宇殷建齐张艳红刘杨张弦弦刘建凯; 关键词：病毒性疾病脊髓灰质炎乙型脑炎天花腮腺炎病死率

23F型肺炎链球菌多糖蛋白结合物游离蛋白含量检测方法的建立及验证被引量：2: 2019年; 目的建立一种检测23F型肺炎链球菌多糖结合物游离蛋白含量的方法,并进行方法学验证。方法采用体积排阻高效液相色谱(size exclusion chromatography and high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)法检测23F型肺炎链球菌多糖结合物游离蛋白含量。色谱柱:TSKgel G3000(300 mm×78 mm,5μm);流动相:10 mmol/L PBS(150 mmol/L NaCl,pH 6. 8);检测波长:214 nm;流速:0. 5 m L/min;柱温:25℃;自动进样:100μL。同时对该方法进行线性、精密度、准确度、耐用性及专属性验证。结果建立的方法在纯化载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)含量为3～18μg/mL时,与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数(R2)> 0. 99;23F-2017001、23F-2017002、23F-2017003批供试品重复性相对标准偏差(RSD)分别为0. 1%、0. 3%、1. 0%,中间精密性RSD分别为3. 7%、8. 5%、4. 8%;加入6、8、10μg/mL纯化载体蛋白TT样品的3次检测结果回收率在93. 2%～102. 6%之间,回收率的RSD均为0. 6%;进样温度为20～30℃条件下的保留时间和峰面积相对偏倚在-0. 1%～0. 5%之间;流动相溶液中含甘氨酸及低浓度硼酸时对检测结果无干扰,硼酸浓度为20 mmol/L以上时对游离蛋白峰检测有一定干扰。结论本实验建立的方法具有良好的线性、精密性、准确性、耐用性及专属性,可用于23F型肺炎链球菌多糖结合物游离蛋白含量检测。; 邓海清尹珊珊郝倩顾行举刘杨张艳红高宇皎刘建凯; 关键词：肺炎链球菌

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刘杨

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