郝倩 作品数:17 被引量:20 H指数:2 供职机构: 北京民海生物科技有限公司 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家科技重大专项 北京市科委重大项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 轻工技术与工程 更多>>
Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗宿主细胞DNA残留量检测方法研究 2017年 目的 建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。方法 提取Vero细胞基因组DNA,制备地高辛标记探针。比较样品不同处理方式的检测差异。对建立的残留DNA检测方法进行特异性、灵敏度和稳定性验证。结果 Vero 细胞基因组DNA的质量浓度为295 μg/ml,260 nm与280 nm波长处的吸光度比值为1.88。探针灵敏度达到0.01 pg/μl。采用苯酚抽提方式处理DNA参考品,检测灵敏度为1 ng;而用碘化钠处理DNA参考品,灵敏度达到10 pg。特异性检测表明,探针与非同源DNA无杂交。灵敏度和稳定性检测结果显示,探针于–70 ℃保存9个月,灵敏度仍为10 pg。 结论 建立了Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法。采用碘化钠提取DNA,回收率高,操作简单,适用于Vero细胞的残留DNA检测。 任玉莹 刘建凯 尹珊珊 徐颖之 邓海清 殷建齐 邢盛宇 张艳红 高宇皎 郝倩 刘杨关键词:脊髓灰质炎病毒疫苗 灭活 VERO细胞 ACYW135群脑膜炎球菌结合疫苗在小鼠模型中的安全性和免疫原性研究 2014年 目的 研究ACYW135群脑膜炎球菌结合疫苗(groups A,C,Y and W135 meningococcal conjugate vaccine,MCV)在小鼠中的安全性及免疫原性.方法 用4价MCV腹腔注射BALB/c小鼠,并于接种前及接种后7d称量小鼠体重,观察小鼠的体重变化.分别于0和14 d用4价MCV皮下免疫BALB/c小鼠,并分别于第1剂接种后7和21 d采血,用间接ELISA测定血清特异性抗体水平.采用成组t检验对实验结果进行统计分析.结果 在7d观察期间,所有小鼠的体重均增加,4价MCV接种小鼠与对照小鼠体重增加间的差异无统计学意义(t=1.988,P>0.05).100%4价MCV接种小鼠的抗各群多糖抗体阳转,且抗体水平随接种次数的增加而提高.4价MCV接种小鼠与相应的单价疫苗原液接种小鼠的血清抗A群(t=2.107,P>0.05)、C群(t=1.343,P>0.05)、Y群(t=1.648,P>0.05)和W135群(t=0.556,P>0.05)抗体水平间的差异无统计学意义.结论 4价MCV在小鼠中具有良好的安全性和免疫原性. 王婷婷 李亚楠 任涛 郝倩 张明华 唐秀丽 魏文进 郑海发关键词:安全性 免疫原性 ACYWl35群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研制 被引量:1 2013年 目的制备安全有效的四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗。方法用溴化氰分别将A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖活化,以己二酸二酰肼作为连接剂,碳化二亚胺作为偶联剂,先制备单价A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素(diphtheriatoxoid,DT)结合疫苗,再配比制成ACYWl35群脑膜炎球菌多糖结合疫苗(groups ACYWl35 meningococcal polysaccharide—DT conjugatevaccine,ACYWl35一DT)。以ACYWl35-DT免疫小鼠,用间接ELISA检测小鼠血清抗各多糖抗体,采用f检验对检测结果进行统计学分析。结果制备的ACYWl35-DT的各项指标均达到质控标准,而且ACYWl35-DT具有良好的安全性和免疫原性,ACYWl35-DT免疫小鼠的抗A群多糖-IgG(f=24.487,P〈0.01)、抗C群多糖-IgG(f=17.056,P〈0.01)、抗Y群多糖-IgG(t=26.213,P〈0.01)和抗W135群多糖-IgG(t=17.392,P〈0.01)水平明显高于四价脑膜炎球菌多糖疫苗免疫小鼠。结论采用此项技术可成功制备ACYWl35-DT。 张明华 任涛 曹欣 唐秀丽 韩菲 王婷婷 胡鹏 张美香 郝倩 何佳琦 郑海发 魏文进关键词:奈瑟球菌 脑膜炎 疫苗 多糖类 细菌 白喉类毒素 B群脑膜炎球菌疫苗研究进展 被引量:1 2015年 脑膜炎球菌是引起流行性脑脊髓膜炎的主要病原菌,是全球重要的公共卫生问题。目前仍缺少安全有效的疫苗用于控制和预防B群脑膜炎球菌引起的感染。此文对B群脑膜炎球菌疫苗研究进展及存在问题进行综述。 王婷婷 任涛 唐秀丽 郝倩 张明华 魏文进 郑海发关键词:疫苗 细菌蛋白质类 口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗的制备及检定 被引量:1 2016年 目的制备口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗,并进行全面检定。方法制备O1、O139群霍乱弧菌灭活菌体原液及重组霍乱毒素B亚单位(recombinant cholera toxin B subunit,r CTB)原液,按比例混合制成口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗,为保护r CTB免受胃酸的破坏,制备了碳酸氢钠抗酸泡腾颗粒,并按照制定的新制品原液及成品的质控标准,对原液及成品进行全面检定。结果制备的口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗工艺稳定,各项指标均达到质控标准。结论口服重组B亚单位O1/O139霍乱疫苗安全、有效,且制备工艺可行,符合规模化生产的要求。 张静飞 陈磊 董思国 曹天成 何金娜 曹欣 胡鹏 郝倩 魏文进 贾丽君 陈翠萍 郑海发 曾明关键词:安全性 免疫原性 5型肺炎球菌荚膜多糖纯化工艺的建立与优化 被引量:1 2022年 目的建立一种应用脱氧胆酸钠沉淀和离子交换色谱技术纯化5型肺炎球菌荚膜多糖的方法。方法 5型肺炎球菌发酵液经离心、超滤、脱氧胆酸钠沉淀处理后, 再经过Capto Q离子交换层析, 得到精制多糖原液。依据中国药典2020年版三部的相关制检规程对精制多糖原液进行检定分析。结果精制多糖原液中蛋白和核酸含量分别不超过3.0%和0.1%, 糖醛酸含量不低于18.4%, 氨基己糖含量不低于22.7%, 各项指标均符合中国药典标准;且多糖回收率达到60.0%以上。结论建立的5型肺炎球菌荚膜多糖纯化工艺可替代使用乙醇或苯酚的工艺, 且操作步骤简便, 具有很好的规模化应用前景。 曹欣 徐永学 刘艳丽 高志鑫 宁云云 王元泽 王研研 郝倩 郝倩 尹珊珊关键词:肺炎球菌 荚膜多糖 层析 纯化 23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗的研制 被引量:5 2010年 目的 研制23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.方法 大罐培养1、2、3、4、5、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、12F、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、和33F型肺炎链球菌并进行各型荚膜多糖的纯化,制备23价肺炎链球菌荚膜多糖疫苗.结果 经检定各型精制多糖主要质量指标均符合〈欧洲药典〉(2005年版)要求.结论 已建立起成熟的细菌培养和多糖纯化工艺. 韩菲 曹欣 胡鹏 张明华 郝倩 张美香 任涛 唐秀丽 何佳琦 王婷婷 郑海发 魏文进关键词:疫苗 肺炎球菌荚膜多糖的制备 公开了制备肺炎球菌荚膜多糖的方法,其包括:提供肺炎球菌发酵液;对所述肺炎球菌发酵液进行分离,得到第一上清液;使用含有氯离子的第一溶液,对所述第一上清液进行过滤,得到第一滤液;向所述第一滤液中加入第一十六烷基三甲基溴化铵(... 刘艳丽 刘建凯 曹欣 尹珊珊 徐永学 李金阳 宁云云 王研研 林浩卿 汪辉 王元泽 邓海清 韩菲 郝倩 殷寻多价肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗及其制备方法 本发明公开了一种多价肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗,包含分离纯化的23种血清型肺炎球菌的荚膜多糖和载体蛋白的偶联物,所述的23中血清型肺炎球菌的血清型为1、2、3、4、5、6B、7F、8、9V、9N、10A、11A、12F、1... 任涛 魏文进 唐秀丽 曹欣 胡鹏 郝倩 张美香 张明华 韩菲 何佳琦 王婷婷文献传递 19A型肺炎链球菌多糖结合物中游离多糖含量测定方法的建立 被引量:2 2017年 目的建立19A型肺炎链球菌多糖(Streptococcus pneumoniae type 19A polysaccharide,19APS)结合物中游离PS含量的测定方法。方法在一定条件下分别用1、3和5g/L脱氧胆酸钠(sodiumdeoxycholate,IX)C)溶液(pH7.3)沉淀不同浓度的破伤风类毒素(tetanustoxoid,1vr),确定不同浓度DOC沉淀载体蛋白1vr的浓度范围。以1g/LDOC分离结合19APS(19APS-TT)和游离19APS,测定上清液中的游离PS含量,并验证该DOC沉淀法的准确度和精密度。结果分别以1和3g/LDOC沉淀19APS-TT时,TT浓度最好分别控制在〈150和〈200μg/ml。该DOC沉淀法的准确度和精密度均良好,加标PS回收率为94.0%~107.2%,相对标准偏差均〈4%。结论成功建立了19APS-TT中游离PS含量的测定方法。 尹珊珊 邓海清 高宇皎 刘杨 郝倩 张艳红 刘建凯关键词:链球菌 肺炎 化学沉淀