吴翱
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 供职机构：云南农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高层次科技人才培引工程更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪瘟病毒E0和E2蛋白融合表达的重组腺病毒构建及免疫保护性研究被引量：10
- 2010年
- 为评价重组腺病毒融合表达猪瘟病毒(CSFV)E0和E2蛋白的免疫保护效果,本研究以CSFV基因组为模板,应用RT-PCR扩增E0和E2蛋白的编码基因,通过pET-32a载体将E0和E2基因串联,形成pET-E0-E2重组质粒。用KpnⅠ和NotⅠ双酶切pET-E0-E2得到E0-E2融合基因,定向亚克隆于穿梭载体pAdTrack-CMV中,采用"两步转化法"在细菌内同源重组,构建携带E0-E2基因的重组腺病毒转移载体质粒pAdEasy-E0-E2,经PacⅠ酶切线性化后转染人胚胎肾细胞(HEK293),成功包装出重组腺病毒(rAd-E0-E2),PCR和western blot检测表明,E0-E2基因已重组于腺病毒基因组中并获得表达。将rAd-E0-E2接种于小鼠和猪,并通过ELISA进行抗体检测。另外,将rAd-E0-E2经肌肉2次(间隔7d)免疫接种6周龄～7周龄猪,3周后用103TCID50CSFV石门株攻毒。结果表明,rAd-E0-E2免疫组6/7头存活,各组织器官带毒时间不超过10d,而非重组腺病毒rAd-CMV免疫组和空白对照组全部死亡,各组织器官均能分离到CSFV。结果提示,rAd-E0-E2能使免疫猪抵抗CSFV强毒攻击,为进一步研制猪瘟基因工程疫苗提供了实验依据。
- 杨玉艾初晓辉毕保良杨亮宇吴翱邱春富孙永科
- 关键词：重组腺病毒猪瘟病毒
- 云南一株猪瘟流行毒株的分离鉴定
- 2010年
- 猪瘟（Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起的猪的一种高度接触性传染病，其流行广、传染性强、致死率高，所以国际兽疫局将之列为A类传染病。我国从20世纪50年代起广泛应用猪瘟兔化弱毒疫苗预防注射，基本上控制了猪瘟的流行。近年来，猪瘟的流行特点发生了很大的变化，多以非典型性、慢性及隐性形式出现，
- 杨玉艾杨亮宇初晓辉毕保良吴翱邱春富孙永科
- 关键词：猪瘟病毒流行毒株猪瘟兔化弱毒疫苗接触性传染病VIRUS
