孟鹏
- 作品数：9 被引量：38H指数：4
- 供职机构：沈阳农业大学生物科学技术学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达的研究被引量：1
- 2009年
- [目的]研究植物病毒表达载体pC1YVV/CP/W的构建及用pC1YVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考。[方法]用三叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pC1YVV基因组的Mb/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶NIa切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pC1YVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pC1YVV/CP/W中构建pC1YVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定。[结果]pC1YVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型C1YVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pClYVV/CP/W的开放阅读框;外源基因在F_4子代病毒基因组中稳定存在;重组病毒克隆pC1YVV/CP/W/GFP至少到F_4子代病毒能稳定表达GFP。[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体。
- 王振东王晓华孟鹏秦会权郑新伟刘芳普薛立江张敏
- 向日葵甜菜碱醛脱氢酶的电子克隆与分析被引量：5
- 2007年
- 采用电子克隆技术获得了向日葵甜菜碱醛脱氢酶基因的cDNA序列(HaBADH)。该序列长1901bp,编码一个由503个氨基酸残基组成的蛋白质。HaBADH与其他物种的BADHs在蛋白质水平上表现较高的相似性,在进化上与同科的甘菊BADH蛋白距离较近。HaBADH蛋白具有醛脱氢酶家族高度保守的十肽和与酶功能有关的氨基酸残基Cys。
- 易乐飞王萍孟鹏
- 关键词：向日葵甜菜碱醛脱氢酶BADH电子克隆
- 向日葵抗坏血酸过氧化物酶的电子克隆和生物信息学分析被引量：2
- 2012年
- 利用电子克隆技术得到长753 bp的向日葵抗坏血酸过氧化物酶(HaAPX)cDNA。通过生物信息学分析发现,HaAPX在核酸水平和蛋白质水平上都与常见物种的APX非常相似,具有极其保守的酶活作用域Peroxidase-1(-divtlsggHtl-)和Peroxidase-2(-aplmlRlawHsa-),且配体结合位点和金属结合位点完全保守。HaAPX与甘薯(Ipomoea batatas)APX亲缘关系很近,其编码蛋白由250个氨基酸组成,分子量为2.7 ku,无信号肽和跨膜区,二级结构由37.6%α-螺旋、13.2%β-折叠、9.2%β-转角和40%无规则卷曲组成,三维构象与豌豆APX的非常相似。
- 孟鹏李根英陈国强王振东
- 关键词：向日葵抗坏血酸过氧化物酶电子克隆生物信息学
- 植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达(摘要)(英文)
- 2009年
- [目的]研究了植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及用pClYVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考。[方法]用三叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pClYVV基因组的NIb/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶NIa切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pClYVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pClYVV/CP/W中构建pClYVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定。[结果]pClYVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型ClYVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pClYVV/CP/W的开放阅读框;以感染叶总RNA为模板,对pClYVV/CP/W/GFP表达GFP外源基因的稳定性进行了检测,从F0(重组病毒质粒最初转录出的病毒)一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,外源基因在F4子代病毒基因组中稳定存在;以从感染叶中提取的总蛋白为抗原,以GFP抗体为第1抗体,以碱性磷酸酶标记抗体为第2抗体,用Western杂交对重组病毒克隆pCVYVV/CP/W/GFP表达外源蛋白进行了定性检测。从F0一直检测到F4子代病毒。检测结果表明,重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP至少到F4子代病毒能稳定表达GFP。[结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体。
- 王振东王晓华孟鹏秦会权郑新伟刘芳普薛立江张敏
- 植物铜锌超氧化物歧化酶的分子进化分析
- 从 NCBI、Expasy、Swiss-Prot 等主要数据库下载植物 Cu/ZnSOD 的成熟氨基酸序列, 包括单子叶植物9种、双子叶植物37种、裸子植物1种、苔藓植物2种、绿藻植物1种,共 50个物种的56个氨基酸序...
- 陈国强吴文建孟鹏王萍
- 关键词：超氧化物歧化酶分子进化进化树
- 文献传递
- 不同小麦品种的潮霉素耐受性研究被引量：8
- 2011年
- 潮霉素是基因转化过程中常用的筛选剂,为了探索不同小麦品种对潮霉素的抗性,本研究设置0、25、50、75、100、125、150 mg/L不同的潮霉素浓度,对K35、065657、扬麦158、Bobwhite和济引1号5个幼胚再生率高的小麦品种进行幼胚拯救并测试其对潮霉素的耐性。结果表明:K35和065657幼胚的最适筛选浓度是125 mg/L,扬麦158、Bobwhite和济引1号幼胚的最适筛选浓度是100 mg/L。
- 梁水美高洁孟鹏郭凤芝黄承彦李根英李斯深
- 关键词：小麦幼胚拯救转基因
- 高粱抗坏血酸过氧化物酶基因的电子克隆及序列分析被引量：12
- 2011年
- 利用高粱EST数据库及电子克隆等技术克隆了高粱APX基因,其开放阅读框大小为753bp,编码250个氨基酸残基,推导的蛋白质分子量为27.1kDa,等电点约为5.135。它与C4植物玉米的胞质APX(ACG41151)在进化上的距离最短,亲缘关系最近。高粱APX无信号肽,是亲水性蛋白,推测它定位于细胞质中。第33-44氨基酸片段为其过氧化物酶活性区域,第155-165氨基酸片段则是其与亚铁血红素配基结合的区域。预测的二级结构及三级结构都表明高粱APX含有较多的不规则卷曲和α螺旋,三级结构上呈椭球体。
- 陈国强孟鹏刘李黎陈刚王萍
- 关键词：高粱电子克隆
- 山东优异小麦品种(系)的成熟胚培养能力研究被引量：2
- 2011年
- 选择CIM、W4、SD2和MSD2四种脱分化培养基,与MRM和1/2 MS+5mg/L玉米素两种再生培养基形成8种培养基组合,利用模式品种扬麦158和Bobwhite对上述培养基的愈伤诱导和再生效率进行评价,筛选出最佳培养基组合为诱导培养基CIM与再生培养基1/2 MS+5mg/L玉米素。利用这一培养基组合对包括对照品种Bobwhite在内的40个山东优异冬小麦品种(系)的成熟胚培养能力进行了研究。结果显示:不同品种的成熟胚脱分化形成愈伤组织的能力差异不显著,最高诱导率100%,最低诱导率也超过了94%,但这些愈伤组织在发育过程中形成的愈伤状态差别很大,转移到再分化培养基上后,8个品系的再生率超过10%,分别是08H020、8H05、08B08、泰麦20-2、泰山5024、聊9514、菏麦9803、Bobwhite,占参试品种的20%,其中08H05的再生率(23.0%)超过了对照品种Bobwhite(21.3%)。有7个品种没有获得再生苗,占17.5%;再生率在1%到10%之间的品种25个,占62.5%。
- 王振东孟鹏高洁郭凤芝李玉莲樊庆琦黄承彦李根英
- 关键词：小麦成熟胚脱分化再分化
- 黄鳝研究现状及其活性物质研发前景被引量：8
- 2007年
- 黄鳝属合鳃目(Synbanchiformes),合鳃科(Synbranchidae),黄鳝属,主要分布于东印度、日本和中国,因其丰富的营养价值、独特的药用价值和较高的经济价值,使其在近几年的养殖面积不断增加,目前已经发展成为我国主要经济水产品之一,与此同时,其遗传学、活性物质等研究也日益受到人们的重视。归纳总结了黄鳝遗传学、分子生物学、氮代谢和活性物质等方面最新研究成果,探讨黄鳝活性物质的开发前景,供黄鳝研究者参考。
- 李联泰安贤惠吴学丹王静孟鹏
- 关键词：黄鳝遗传学氮代谢活性物质
