张玉洁
- 作品数：6 被引量：28H指数：4
- 供职机构：宁夏医科大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区研究生教育创新计划项目盐城市医学科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清对肺脏上皮细胞氧化应激的保护作用被引量：6
- 2017年
- 背景:前期研究证实人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的清除活性氧自由基的能力,且本身具有一定的抗氧化酶活性。目的:探究人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下所得上清对氧化应激损伤的肺脏上皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:分别使用不同浓度的过氧化氢(200,400,500,600,800μmol/L)对肺脏上皮细胞A549细胞系进行6,12,24 h的氧化刺激,通过CCK-8法对肺脏上皮细胞存活率进行检测,得出存活率为50%时的过氧化氢浓度作为氧化损伤模型的最适条件。用Hochest33258染色及Western Blot对模型有效性进行验证。采用无血清培养基培养胎盘胎儿侧间充质干细胞,收集P3代细胞培养上清将其作用于氧化损伤的肺脏上皮细胞,培养24 h,即上清组。同时设立损伤组(仅进行氧化损伤)和维生素C组(培养基中添加100μmol/L的维生素C)。利用流式细胞术对各组细胞凋亡情况进行检测以及Western Blot检测凋亡相关蛋白及氧化应激经典信号通路Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8法检测得出,采用600μmol/L的过氧化氢对肺脏上皮细胞进行24 h的氧化刺激,A549细胞存活率为(56.41±3.31)%。Hochest33258染色及Western Blot证实模型的可靠性;(2)流式细胞术结果显示维生素C组和上清组氧化损伤细胞的凋亡率与损伤组细胞相比有不同程度的降低,其中上清组与损伤组相比差异有统计学意义(P<0.05);(3)Western Blot对凋亡相关蛋白的检测显示,与损伤组对比,维生素C组和上清组凋亡促进基因Bax蛋白表达减弱,凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达增强,且差异有统计学意义(P<0.05)。Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白显示与损伤组对比,维生素C组和上清组Nrf2蛋白表达增强,Keap1分子表达减弱且差异有统计学意义(P<0.05);(4)上述结果提示,实验成功构建了肺脏上皮细胞损伤模型,且人胎盘胎儿侧间充�
- 付雪刘国攀张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞间充质干细胞氧化应激WESTERNBLOT法
- 群体感应分子Farnesol联合CSA对白色念珠菌生物膜作用的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨群体感应分子法尼醇(Farnesol)联合钙调神经磷酸酶抑制剂环孢菌素A(CSA)对白色念珠菌的生物膜形成、形态转换、生长及活性、耐药性、凋亡反应和氧化应激反应的作用及其相关机制。方法体外构建生物膜状态白色念珠菌,分别经CSA、Farnesol、Farnesol联合CSA处理后,用qRT-PCR法检测生物膜状态白色念珠菌中生物膜形成过程中的相关基因CDR1、CEK1、CPH1、EFG1、ERG11、GPR1、HAT1、MDR1、HWP1、ALS3、TUP1mRNA表达水平的变化。结果白色念珠菌均具有不同程度的产膜能力,且单用CSA、Farnesol抗真菌药物对白色念珠菌生物膜的抑制率很低,而联合使用时,受试菌生物膜生长状态受到明显抑制。从临床血流感染中分离获得1株强产生物被膜白色念珠菌,命名为CA NX05;经不同药物组处理后生物膜状态白色念珠菌中的生物膜菌丝形成相关基因CEK1、CPH1、EFG1、ERG11、GPR1、HAT1、HWP1、ALS3、TUP1与其耐药性相关基因CDR1、MDR1的mRNA表达量与空白处理组相比均显著降低(F_(CEK1)=15.725,F_(CPH1)=6.230,F_(EFG1)=87.817,F_(ERG11)=17.527,F_(GPR1)=21.793,F_(HAT1)=65.318,F_(HWP1)=550.531,F_(ALS3)=10.514,F_(TUP1)=16.580,F_(CDR1)=8.089,F_(MDR1)=7.228;F>P,P<0.05)。结论群体感应分子Farnesol联合CSA处理较CSA及Farnesol处理能更有效地抑制白色念珠菌生物膜的形成,从而使其对抗真菌药物的敏感性增加,为临床合理使用抗真菌药物提供了科学导向。
- 商安全魏军潘红超张玉洁刘晓明吴健王微微陆文英
- 关键词：白色念珠菌生物膜环孢菌素A
- 非小细胞肺癌患者血清miR-22和miR-126的检测及其临床意义被引量：10
- 2017年
- 目的:探讨液体活检外周血清miR-22和miR-126的表达在非小细胞肺癌(NSCLC)发生和转移中的作用。方法:收集盐城市第六人民医院2013年5月至2015年5月期间确诊的127例NSCLC患者,设健康对照112例,采用q PCR检测患者血清中miR-22和miR-126的相对表达水平,Logistic回归分析法及ROC曲线分析miR-22和miR-126在NSCLC发展与转移预测中的敏感性及特异性。结果:病例组血清miR-22水平显著高于对照组,而血清miR-126水平低于对照组(均P<0.05);与腺癌患者相比,鳞状细胞癌患者的血清miR-22水平显著升高(P<0.05)、血清miR-126显著降低(P<0.01);与Ⅰ+Ⅱ期患者相比,Ⅲ+Ⅳ期患者血清miR-22水平升高、miR-126水平相对降低(均P<0.01);与未转移患者相比,转移患者血清miR-22水平升高,而血清miR-126水平降低(均P<0.01);有家族遗传史的患者与没有家族遗传史的患者相比,血清miR-22水平升高但miR-126水平降低(均P<0.01)。血清miR-22与miR-126水平对NSCLC预测的特异性与敏感性分别为99.11%和84.30%、82.68%和96.40%。血清miR-22与miR-126水平对NSCLC转移的特异性与敏感性分别为59.74%和96.00%、84.00%和62.30%。结论:在NSCLC患者血清中,miR-22呈高表达而miR-26呈低表达,液体活检miR-22和miR-126可作为预测NSCLC的发生及转移的一个生物学指标。
- 张玉洁王微微商安全魏军
- 关键词：非小细胞肺癌血清
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清的抗氧化活性分析被引量：6
- 2017年
- 背景:目前关于间充质干细胞的研究大多集中于其免疫调节功能,而关于细胞和培养上清的其抗氧化能力的研究较为少见。目的:观察人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下,其上清的抗氧化能力。方法:采用无血清培养基培养胎儿侧胎盘间充质干细胞,分别于48 h收集P2-P6代细胞培养上清。在空白培养基中添加维生素C 100μmol/L作为阳性对照。检测P2-P6代人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清的总抗氧化能力、清除活性氧自由基的能力和抗氧化酶活性。结果与结论:(1)抗氧化能力:各代次人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的抗氧化能力,且不同代次间的上清具有一定的差异,其中总抗氧化能力与40-80μmol/L的维生素C相当,各代次上清均具有一定的清除二苯基苦基苯肼自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基等自由基清除能力;(2)抗氧化酶活性分析:各代次间的人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清中均可以检测到一定水平的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性;(3)结果提示,在无血清条件下培养胎儿侧胎盘间充质干细胞的上清具有一定的抗氧化能力和抗氧化酶的活性。人胎盘胎儿侧间充质干细胞的抗氧化能力与其旁分泌机制有关,但其中的抗氧化成分及分子机制有待进一步的研究。
- 付雪张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞胎盘间充质干细胞培养上清抗氧化旁分泌
- 一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法
- 本发明属于间充质干细胞技术领域，具体涉及一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法，其是从胎盘中提取人胎盘胎儿侧间充质干细胞得原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞；将原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞进行培养得第一代间充质干细胞...
- 魏军严秀蕊刘晓明付雪张玉洁
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