王寒
- 作品数：10 被引量：27H指数：4
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省科技厅科技支撑计划项目长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 组合式离心管架
- 本实用新型公开了一种实验用工具，具体涉及一种组合式离心管架，其特征在于，包括柜架、柜体、轴套，柜架上设置多个隔板，隔板间利用轴套安置多个柜体，柜架下端设置多个柜脚，柜体中部设置为管孔，柜体四边均设置护板，柜体下侧设置多个...
- 王寒姚学萍巫晓峰李捷崔开放张博曹随忠余树民沈留红孙成亮
- 文献传递
- 牦牛SPAG11基因克隆与生物信息学分析被引量：1
- 2016年
- 【目的】克隆牦牛(Bos grunniens)精子相关抗原11(Sperm-Associated Antigen 11,SPAG11)基因,并了解其分子结构特征,为进一步研究牦牛SPAG11生物学功能奠定基础。【方法】从牦牛睾丸中提取总RNA,RTPCR扩增并克隆SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E基因,测序后进行生物信息学分析。【结果】克隆出牦牛SPAG11基因3个亚型:SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E,序列大小分别是351,408和261bp,分别编码117,129和80个氨基酸,其中SPAG11 D和SPAG11E序列包含1个完整开放阅读框(ORF),SPAG11C序列包含部分ORF。牦牛SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E核苷酸序列与黄牛(Bos taurus)相应序列相似性最高,而与黄牛β-防御素1相似性较低(<50%)。3个蛋白亚型均具有β-防御素家族基本特性,生物信息学分析显示其均含有磷酸化位点。【结论】成功克隆牦牛SPAG11C、SPAG11 D和SPAG11E基因,明确了其编码蛋白的分子结构特征。
- 徐绮嫔王寒李计尚周金伟张于沈留红余树民彭广能曹随忠
- 关键词：牦牛Β-防御素生物信息学
- 四川部分地区禽源空肠弯曲菌的分离鉴定、分子分型及毒力相关基因检测
- 空肠弯曲菌(Camplobacterjejuni,C.jejuni)感染是人类上世纪最广泛的传染病之一,主要引起人细菌性腹泻,严重的可引发格林巴利综合症。多种动物携带C.jejuni,其中家禽是主要的携带者,感染动物多没...
- 王寒
- 关键词：空肠弯曲菌毒力相关基因
- 文献传递
- 病原体相关分子模式(PAMP)诱导对奶牛乳腺成纤维细胞TLR4、NOD2、IL-6、IL-8和TNF-α mRNA表达的影响被引量：7
- 2015年
- 通过观察病原体相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP)诱导对奶牛乳腺成纤维细胞(bovine mammary fibroblast,BMFB)TLR4、NOD2、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA表达的影响,揭示BMFB的免疫应答功能。本试验以BMFB为研究对象,分别用100 mg/L lipid A和10 mg/L胞壁酰二肽(MDP)诱导24 h,采用半定量RT-PCR检测细胞中TLR4、NOD2、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA表达的情况。结果显示,BMFB可表达TLR4、NOD2、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA;与对照组相比,lipid A组TLR4、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达水平显著上调(P<0.05);胞壁酰二肽(MDP)组NOD2、IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达水平显著上调(P<0.05)。结果表明,BMFB可能通过表达TLR4和NOD2识别PAMP,进而上调炎症细胞因子的表达。
- 徐绮嫔王寒廖纯颖沈留红余树民彭广能曹随忠
- 关键词：病原体相关分子模式NOD2乳房炎
- 奶牛乳样和粪样中幽门螺杆菌PCR检测方法的建立及初步应用被引量：2
- 2017年
- 【目的】建立一种特异、灵敏的牛源幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)检测方法,为家畜感染幽门螺杆菌的流行病学调查鉴定提供支持。【方法】分别选取Hp的16SrRNA、UreA、glmM为靶基因设计特异性引物,以H.pylori动物模型适应菌株SS1株为标准菌株建立PCR检测方法,并进行PCR条件优化,运用所建立的最优PCR方法检测临床奶牛乳样和粪样中Hp的分布情况。【结果】PCR特异性试验结果显示,仅Hp SS1株能扩增出特异性条带,而对照菌株金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠杆菌及蜡样芽孢杆菌均无扩增条带。PCR灵敏度试验结果显示,16SrRNA、UreA、glmM基因在乳样中的最低检出浓度分别为101,103和103CFU/mL,在粪样中的最低检出浓度分别为101,104和104 CFU/mL。应用该PCR方法对采集自规模化养殖场及散养的共计41头奶牛的乳样和粪样进行检测,成功检出Hp DNA,靶基因16SrRNA、UreA和glmM序列与NCBI上所发表的J166和ATCC43504菌株序列的同源性均达98%以上。【结论】成功建立了特异、灵敏的牛源Hp的PCR检测方法,可以应用于临床奶牛乳样和粪样中Hp的检测。
- 张于王寒文月玲江涛沈留红余树民曹随忠姚学萍
- 关键词：奶牛幽门螺杆菌RRNA基因
- 四川部分地区禽源空肠弯曲菌MLST分型及遗传进化分析被引量：4
- 2019年
- 目的为了解四川部分地区分离到的48株禽源空肠弯曲菌间的分子特征,以对来源不同的空肠弯曲菌进行分子分型及遗传进化分析。方法本研究参照MLST数据库,选取了空肠弯曲菌MLST分型7个管家基因aspA,glnA,glyA,gltA,tkt,pgm和uncA作为目的基因分别扩增及测序,并将所得序列经比对后进行遗传进化分析。结果 48株分离株中共含24种不同的序列型分属于9种不同的克隆系及11种独特型,其中22株分离株含有新序列型,占分离株的45.83%(22/48);9种不同的克隆系中以CC-21、CC-353、CC-464克隆系所含菌株相对较多,而克隆系CC-45、CC-48最少,均为1株分离株;11种独特型共存于21株分离株中,其中以ST-8675序列型最多,为8株。遗传进化树显示,属同一克隆系的不同型别间的分离株亲缘关系较近,如同属于CC-21克隆系的ST-298与ST-760型别分离株处于同一小分支、亲缘关系较近,但不同克隆系的分离株间遗传进化关系较远,鹌鹑源分离株(V13-20)单独处于一大分支与其余禽源分离株间的亲缘关系最远。总体而言,不同地区、宿主来源的分离株呈现遗传多样性。结论本研究中分离株间具有基因多样性,MLST分型为了解该地区空肠弯曲菌的遗传特性和分布特点提供了参考依据。
- 姚学萍张博王寒邬旭龙周丽军曹随忠王印王印杨泽晓
- 关键词：空肠弯曲菌管家基因遗传进化
- 四川部分地区禽源空肠弯曲菌ERIC-PCR分型及毒力相关基因分析被引量：4
- 2017年
- 为了解四川地区禽源空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)的遗传多样性和毒力相关基因的携带情况,对从四川成都、雅安及眉山市采集的鸡源、鸭源和鹌鹑源的盲肠及肛拭子样品进行C.jejuni的分离鉴定、ERICPCR分型和17种毒力相关基因的检测分析。结果显示,总体分离率为10.23%(48/469),其中鸡源分离率显著高于鹌鹑源(P<0.05)。ERIC-PCR聚类分析显示48株C.jejuni可分为6簇、16类共31种基因型,不同场分离株多在某一类或某一簇内聚集分布,而部分菌株在不同地区、不同场之间呈交叉分布。毒力基因检测结果显示,15种毒力相关基因的携带率在50%以上,其中鹌鹑源分离株的毒力基因携带率高于其他动物的携带率。由此表明四川地区禽源C.jejuni毒力基因的携带率高并且具有较高的遗传多样性。
- 王寒张博莫亚霞罗正中姜思讯孙成亮曹随忠姚学萍
- 关键词：家禽空肠弯曲菌毒力相关基因
- 奶牛乳腺成纤维细胞中Toll样受体与NOD样受体及其信号通路相关分子mRNA的检测被引量：4
- 2014年
- 先天性免疫应答中,由模式识别受体（pattern recognition receptor,PRR）识别病原微生物的病原体相关分子模式（pathogen associated molecular patterns,PAMP）,如脂多糖（liposachride,LPS）、肽聚糖（peptidoglycan,PGN）、脂磷壁酸（lipoteichoic acid）等。Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）是典型的PRR，主要分布于免疫细胞的细胞膜表面。
- 廖纯颖文月玲王寒江涛张于姚学萍沈留红余树民曹随忠
- 关键词：TOLL样受体NOD样受体免疫应答
- 一株羊源链球菌的分离鉴定及溶血素(SLS)基因序列分析被引量：4
- 2017年
- 为分析一株羊源链球菌分离株的部分生物学特性及溶血素(SLS)基因的变异特点,本研究自四川省某绵羊养殖场一只病死绵羊肺脏中分离到一株链球菌并命名为SZ-1,经纯化培养后观察该菌的生长、染色特性,并对其进行16S rRNA基因PCR鉴定、生化鉴定、药物敏感性试验以及SLS基因序列分析。结果显示纯化培养后的细菌于哥伦比亚血琼脂培养基上呈现β溶血;分离菌株16S rRNA基因序列与马链球菌兽疫亚种的同源性在99%以上;药物敏感性试验显示分离株对螺旋霉素、红霉素、萘啶酸、庆大霉素、氯霉素、青霉素、克林霉素敏感,对四环素和卡那霉素耐药;SLS基因与马链球菌兽疫亚种属参考菌株的核苷酸序列相比在第87、291、450位出现了单个碱基的置换,核苷酸同源性为98.77%,SLS基因遗传进化树显示SZ-1与马链球菌兽疫亚种(BHS5、CY、ATCC36524)菌株的亲缘关系最近。综上所述本实验分离株为马链球菌兽疫亚种菌,该研究结果为该菌的临床诊断、选药治疗及其SLS基因的遗传动态变异研究等奠定了基础。
- 张博姚学萍王印杨泽晓邬旭龙张鹏飞莫亚霞王寒
- 关键词：马链球菌兽疫亚种
- 枯草芽孢杆菌与生物炭对马铃薯叶片抗氧化特性的影响
- 2022年
- 马铃薯病害逐年增加,其产量和品质严重下滑,遏制区域经济发展。榆林市是我国马铃薯主产区之一,以榆林市榆阳区农业示范园区的马铃薯为研究对象,在施用常规基肥和常规基肥(70%、80%、90%)的情况下,加施枯草芽孢杆菌和生物炭,测定其对马铃薯叶片抗氧化特性的影响。结果表明:经KS80处理后的马铃薯叶片的PPO、CAT、POD、SOD等活性及总抗氧化能力与KS90处理后的无显著性差异,较CK分别提高了29.40%、84.84%、48.39%、81.98%和81.80%。经KS80处理后的马铃薯叶片GOD、总巯基的含量、非蛋白巯基含量和羟自由基清除能力与KS90处理后的差异性不显著,较CK分别提高了14.08%、256.26%、180.50%和31.85%。因此,大田试验中可在采用80%常规基肥的条件下,加入枯草芽孢杆菌(375 kg/hm^(2))和生物炭(2250 kg/hm^(2))可以提高马铃薯叶片抗氧化酶的活性,进而改善马铃薯品质,为马铃薯减施化肥和农药的措施奠定理论基础。
- 卢娇娇刘明庆王寒王梅张凯煜贺英
- 关键词：枯草芽孢杆菌生物炭马铃薯抗氧化酶
