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申莹莹
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中国科学院天津工业生物技术研究所
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
轻工技术与工程
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合作作者
付晓平
中国科学院天津工业生物技术研究...
宋诙
中国科学院天津工业生物技术研究...
郑宏臣
中国科学院天津工业生物技术研究...
李树芳
中国科学院天津工业生物技术研究...
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中国科学院天津工业生物技术研究...
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1篇
2016
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耐热普鲁兰酶CBM68结构域中关键位点对其酶学性质的影响
被引量:2
2016年
通过对Anoxybacillus sp.LM18-11来源的耐热普鲁兰酶(Pul A)与麦芽三糖共结晶的晶体结构分析,在新命名的底物结合域CBM68中预测出4个与底物结合有关的氨基酸位点(Y14、D16、K62和R96),分别将4个氨基酸位点突变为丙氨酸,得到突变体Pul A^(Y14A)、Pul A^(D16A)、Pul A^(K62A)和Pul A^(R96A)。其中,突变酶Pul A^(Y14A)和Pul A^(R96A)的底物结合力及催化效率与野生酶Pul A相比均有明显降低,其K_m值分别比Pul A提高了4.2倍和2.5倍,k_(cat)/K_m分别为Pul A的29%和37%。同时,Pul A^(Y14A)和Pul A^(R96A)的最适作用温度均降低了10℃,Pul A^(R96A)的最适作用p H也降低了0.5个单位。说明Y14和R96是CBM68结构域中的关键氨基酸位点,这两个位点的发现为进一步探究CBM68结构域的作用机制奠定了基础。
申莹莹
郑宏臣
李树芳
付晓平
徐健勇
宋诙
关键词:
定点突变
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